牛蒡根水提物對(duì)高脂血癥大鼠血脂和動(dòng)脈粥樣硬化程度的影響

陳志英，趙 晨，陳夢冉，仲偉珍

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院，山東青島 266071)

牛蒡(Arctium lappa L.)別名山牛蒡，為中國古老的藥食兩用植物。其嫩葉及肉質(zhì)根可食用，并具有降血脂、抗腫瘤、抗衰老、抗疲勞、抗炎等作用［1］。目前研究發(fā)現(xiàn)牛蒡根提物能顯著降低高脂模型大鼠血脂水平［2］，但其抗氧化特別是抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用研究尚不多見。2013年8～11月，我們檢測了牛蒡根水提物對(duì)高脂血癥大鼠血脂和動(dòng)脈粥樣硬化程度的影響。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性Wista大鼠60只，體質(zhì)量187～209 g，由山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司提供。

1.1.2 藥品及檢測試劑盒 辛伐他汀片(杭州莫沙東制藥有限公司，批號(hào)J20090001)。牛蒡根水提物，制備方法為:選取新鮮牛蒡，采用0.05%的維生素C和0.05%的檸檬酸護(hù)色液進(jìn)行護(hù)色處理，脫水10 s，切成1.5～2.5 mm的薄片，置-30℃冷風(fēng)環(huán)境下干燥40 min，在20～40℃下烘干炒制，冷卻后粉碎成顆粒。每10 g牛蒡顆粒加80～90℃水100 mL浸泡30 min，提取2次，將2次浸提液合并，用BC-R1001旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，在 -0.08 MPa、(68 ±1)℃下減壓濃縮至6.0 mL備用。總膽固醇(TC)檢測試劑盒、甘油三酯(TG)檢測試劑盒、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)檢測試劑盒、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)檢測試劑盒、超氧化物歧化酶(SOD)檢測試劑盒及丙二醛(MDA)檢測試劑盒均由北京中生北控生物技術(shù)股份有限公司生產(chǎn)。所用儀器為KNOE PRO型全自動(dòng)生化分析儀(芬蘭康藝儀器公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及處理 將60只大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、辛伐他汀組［3，4］及牛蒡根水提物高、中、低劑量組，各10只。除空白組外均飼喂高脂飼料，同時(shí)腹腔注射維生素D3，共1個(gè)月，建立高脂血癥動(dòng)物模型。高脂飼料成分［5］:基礎(chǔ)飼料88.6%、膽固醇1.2%、豬油10%、膽鹽0.2%。然后空白組、模型組大鼠給予生理鹽水10 mL/kg每日灌胃;牛蒡根水提物高、中、低劑量組分別給予牛蒡根水提物8、4、2 g/kg每日灌胃;辛伐他汀組給予辛伐他汀10 mg/kg每日灌胃?？瞻讓?duì)照組給予基礎(chǔ)飼料，其余各組仍給予高脂飼料。連續(xù)灌胃7周。

1.2.2 觀察項(xiàng)目及檢測方法 ①血脂:末次灌胃后禁食不禁水12 h，乙醚麻醉后于眼內(nèi)眥取血，收集新鮮血液2 mL，5000 r/min離心10 min收集上清液，測定血清 TG、TC、HDL-C、LDL-C、SOD 和 MDA水平。動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)(AI)=(TC值-HDL-C值)/HDL-C值。②主動(dòng)脈壁形態(tài)學(xué)變化:大鼠于最后一次采血后處死，分離并剪取主動(dòng)脈弓約0.5 cm，冷鹽水灌洗除去血管內(nèi)血液，后迅速置于10%中性福爾馬林溶液固定24 h以上，經(jīng)固定、脫水、透明、包埋，制備橫切面石蠟切片，厚度3 μm，行 HE染色，在光鏡下觀察。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)軟件。數(shù)據(jù)用表示，組間比較采用重復(fù)設(shè)計(jì)的方差分析和單因素方差分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)過程中各組大鼠生長活動(dòng)正常，一般狀況良好，皮毛、清潔度、二便均無異常，體質(zhì)量正常變化。7周后各組大鼠血脂、SOD、MDA、AI見表1。由表1可見，7周后牛蒡根水提物高、中劑量組及辛伐他汀組的 TC、LDL-C和 AI明顯低于模型組，HDL-C和SOD明顯高于模型組(P均＜0.05)，但牛蒡根水提物高、中劑量組與辛伐他汀組上述指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;牛蒡根水提物高劑量組、辛伐他汀組的TG、MDA明顯低于模型組(P均＜0.05)，牛蒡根水提物高劑量組與辛伐他汀組上述指標(biāo)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。牛蒡根水提物低劑量組的HDL-C水平與模型組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但低于辛伐他汀陽性組(P＜0.05)。空白組肉眼見主動(dòng)脈內(nèi)膜不增厚，無脂質(zhì)條紋及粥樣斑塊形成;鏡下內(nèi)皮連續(xù)完整而光滑，中膜平滑肌細(xì)胞排列規(guī)則。模型組肉眼見主動(dòng)脈壁增厚，管腔狹窄，內(nèi)壁有大小不等的脂質(zhì)條紋及斑塊形成;鏡下內(nèi)皮細(xì)胞呈連續(xù)性缺失，底層膠原纖維暴露，內(nèi)皮下有大量吞噬脂質(zhì)的泡沫樣細(xì)胞形成。牛蒡根水提物高、中劑量和辛伐他汀組肉眼見內(nèi)膜較光滑，鏡下見內(nèi)膜下少量脂質(zhì)沉積，形成少量泡沫樣細(xì)胞;低劑量組肉眼見管壁少量脂質(zhì)條紋形成，鏡下見內(nèi)膜下脂質(zhì)沉積較多。

表1 各組血脂、SOD、MDA、AI比較()

表1 各組血脂、SOD、MDA、AI比較()

注:與模型組比較，*P ＜0.05;與辛伐他汀組比較，△P ＜0.05

組別 TG(mmol/L)LDL-C(mmol/L)HDL-C(mmol/L)TC(mmol/L) SOD(U/mL)MDA(nmol/mL)AI空白組 0.86 ±0.40 0.35 ±0.11 0.73 ±0.06 1.01 ±0.23 137.54 ±18.62 12.24 ±1.58 0.38 ±0.21模型組 1.08 ±0.66 1.16 ±0.07 1.01 ±0.14 3.86 ±0.21 92.63 ±14.21 23.68 ±2.36 2.82 ±0.53辛伐他汀組 0.60 ±0.20* 0.42 ±0.04* 1.37 ±0.74* 2.97 ±0.14*123.64 ±15.35*15.99 ±2.95*1.17 ±0.61*牛蒡根水提物高劑量組 0.59 ±0.28* 0.44 ±0.08* 1.33 ±0.15* 2.88 ±0.20*120.37 ±11.49*14.84 ±1.87*1.16 ±0.53*牛蒡根水提物中劑量組 0.81 ±0.18 0.53 ±0.08* 1.29 ±0.18* 2.67 ±0.27*116.41 ±13.72*17.74 ±3.08 1.07 ±0.28*牛蒡根水提物低劑量組 0.78 ±0.27 1.07 ±0.13 1.03 ±0.12△3.56 ±0.26 99.48 ±16.31 21.65 ±2.33 2.45 ±0.61

3 討論

動(dòng)脈粥樣硬化是大、中動(dòng)脈內(nèi)膜出現(xiàn)含膽固醇、類脂肪等的黃色物質(zhì)，多由脂肪代謝紊亂、神經(jīng)血管功能失調(diào)引起［6］。脂肪代謝異常通常指血漿中脂質(zhì)量和質(zhì)的異常，包括TC、TG、LDL-C升高和HDLC降低;其中高脂血癥是動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病的危險(xiǎn)因素［7，8］。

目前研究表明，牛蒡根具有降血脂和抗氧化作用［9］，脂質(zhì)浸潤和氧化損傷是動(dòng)脈粥樣硬化的主要發(fā)病機(jī)制。本研究結(jié)果證實(shí)，牛蒡根水提物能夠顯著降低大鼠血清TC、TG、LDL-C水平并升高HDL-C水平，進(jìn)而發(fā)揮其降低血脂的作用。牛蒡根的主要活性成分有氨基酸類、微量元素、糖類、多酚類(綠原酸等)、炔類等［10，11］。Chang 等［12］報(bào)道，綠原酸可抑制白細(xì)胞介素-1β(IL-1β)誘導(dǎo)的活性氧的生成。Lou等［13］研究發(fā)現(xiàn)牛蒡葉多酚類物質(zhì)對(duì) DPPH自由基、羥自由基有較強(qiáng)的清除作用。牛蒡根水提物可能通過以上作用機(jī)制發(fā)揮抗氧化作用，并達(dá)到抗動(dòng)脈粥樣硬化的效果。本研究結(jié)果顯示，牛蒡根水提物能夠顯著降低大鼠血清MDA水平并升高SOD水平，降低AI及主動(dòng)脈病理損傷程度，故筆者認(rèn)為牛蒡根水提物具有較好的降血脂、抗氧化及抗動(dòng)脈粥樣硬化的作用。

隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，高蛋白、高脂飲食增多，運(yùn)動(dòng)量減少，使得高血脂和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)病率逐年增長，并且發(fā)病呈現(xiàn)年輕化趨勢［14］。因此，開發(fā)像牛蒡根這樣經(jīng)濟(jì)實(shí)用、安全有效的新型降血脂藥物具有顯著而深遠(yuǎn)的意義;對(duì)于牛蒡根的藥用價(jià)值和作用機(jī)理還需深入的認(rèn)識(shí)和發(fā)掘［15～17］。

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