滄州血站篩查抗-HIV的兩種ELISA試劑質(zhì)量的評估

薛文穎 王瑞麗 許丹 張燕 張國霞

·調(diào)查研究·

滄州血站篩查抗-HIV的兩種ELISA試劑質(zhì)量的評估

薛文穎 王瑞麗 許丹 張燕 張國霞

抗-HIV；試劑；篩查

目前我國大部分血站對輸血傳染病的篩查方法是ELISA血清學(xué)檢測，采用的模式是使用兩個廠家的ELISA試劑對標(biāo)本進(jìn)行抗原或抗體篩查。隨著科技的進(jìn)步分子生物學(xué)得到突飛猛進(jìn)的發(fā)展，核酸檢測技術(shù)已成熟發(fā)展起來。滄州中心血站在2010年著手開展核酸檢測技術(shù)應(yīng)用于獻(xiàn)血者篩查的準(zhǔn)備和實(shí)驗(yàn)工作。2012年初我國衛(wèi)生行政主管部門出臺新的《血站技術(shù)操作規(guī)程》提出了允許采供血機(jī)構(gòu)采用ELISA檢測和核酸檢測各一遍的檢測模式對血液進(jìn)行安全檢測。為此，將在兩個ELISA試劑中取消一個，為了探討檢測模式的改變是否對血液安全造成影響，我們僅就兩個ELISA試劑廠家對45 463份獻(xiàn)血者血樣抗-HIV篩查結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并對篩查出的樣本做進(jìn)一步確認(rèn)試驗(yàn)。結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本來源 2012年1月1日至2012年12月31日65 463名次符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》(GB18467-2011)ALT快速篩查及HBsAg試紙條快速篩查合格采集大血后留取的血樣。

1.2 試劑與主要儀器 A試劑為 上海科華ELISA抗-HIV1/HIV2(批號：201201011,201206020) B試劑為試劑為 北京萬泰(批號：H20111211,H20120704 )；檢測儀器TECAN EVO150/8全自動加樣器， 奧斯邦的FAME24/20酶免后處理。

1.3 檢驗(yàn)方法與結(jié)果判定 將標(biāo)本同時(shí)用兩個廠家的ELISA試劑嚴(yán)格按照試劑盒說明書及操作規(guī)程進(jìn)行檢測。在試驗(yàn)環(huán)境，陰陽性對照符合要求，質(zhì)控?cái)?shù)值在控的條件下：S/CO≥1時(shí)判定為陽性，檢測結(jié)果為不合格。1>S/CO≥0.7時(shí)判定為待查，用兩種試劑進(jìn)行雙孔再檢，有一孔S/CO≥1時(shí)再檢結(jié)果為陽性；1>S/CO≥0.7時(shí)按其他項(xiàng)報(bào)廢。 S/CO<0.7時(shí)判定為陰性(本站從血液安全方面考慮設(shè)置了灰區(qū)，灰區(qū)范圍是1>S/CO≥0.7 對抗-HIV檢測處在灰區(qū)的標(biāo)本不報(bào)陽性結(jié)果按其他項(xiàng)報(bào)廢)。

1.4 結(jié)果確認(rèn) 將所有A B試劑檢測出的抗-HIV陽性標(biāo)本送疾控中心進(jìn)行確認(rèn)(WB試驗(yàn))。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 A、B兩種試劑對45463份血樣抗-HIV篩查結(jié)果 A、B兩種試劑共檢出37份抗-HIV不合格樣本，其中A試劑檢出12份，B試劑檢出36份。 篩查結(jié)果顯示A B兩種試劑對抗-HIV篩查有顯著差異。使用B試劑檢測不合格率要明顯高于A試劑(是A試劑的3倍)。見表1、2。

表1 A B兩種ELISA試劑對45463份血樣抗-HIV篩查結(jié)果 份

注：與試劑比較，*P<0.05

表2 A試劑和B試劑共篩出37份抗-HIV陽性標(biāo)本結(jié)果 份

2.2 37份抗-HIV不合格標(biāo)本確認(rèn)結(jié)果 確認(rèn)為HIV-1抗體陽性的標(biāo)本9例A, B均已檢出，有4例HIV抗體不確定標(biāo)本A試劑未能檢出。但從真陽性率看A試劑要高于B 試劑(是B 試劑的3倍)。見表3。

表3 37份抗-HIV不合格標(biāo)本確認(rèn)結(jié)果

注：A 試劑真陽性率75%，B試劑真陽性率25%

3 討論

多年來，我國對獻(xiàn)血者的血液傳染病的篩查方法是采用2個不同生產(chǎn)廠家的ELISA試劑進(jìn)行檢測[1]。這種篩查模式對血液安全起到了一定作用。隨著科技不斷發(fā)展，國民經(jīng)濟(jì)的不斷提高，分子生物學(xué)的時(shí)代已悄然到來，核酸檢測應(yīng)用于血液篩查將引起采供血機(jī)構(gòu)一場跨時(shí)代的革命。

自從[2010]226號《衛(wèi)生部辦公廳關(guān)于開展2010年血站核酸檢測試點(diǎn)工作的通知》以來，血站核酸檢測試點(diǎn)單位已有40余家[2]。2012年新的《血站技術(shù)操作規(guī)程》增加了一種檢測模式即取消一遍ELISA檢測，增加一遍核酸檢測[3]。滄州中心血站就目前使用的兩種ELISA抗-HIV檢測試劑的篩查結(jié)果對輸血安全有無差異進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)字說明A、B兩種試劑在質(zhì)量上有一定差異。A、B試劑雖然未檢出相互漏檢的陽性確認(rèn)標(biāo)本，但B試劑的假陽性遠(yuǎn)大于A試劑，嚴(yán)重的是有4例HIV抗體不確定標(biāo)本A試劑未檢出。因?yàn)閱纹蔚目贵w或抗原的感染者我們都不能排除其傳播該病毒的可能性，所以盲目的去掉一種ELISA檢測方法勢必增加了血液的殘余危險(xiǎn)度。

ELISA檢測對確保用血安全有相當(dāng)重要的意義。ELISA可以檢測到因病原體在外周血中存在有間歇性現(xiàn)象而造成核酸檢測漏檢的陽性標(biāo)本[4，5]。因此，核酸檢測不能完全替代ELISA在血液篩查中的作用。

血液安全的提高，需要科學(xué)的方法和先進(jìn)的技術(shù)，但在檢測模式的轉(zhuǎn)變過程中一定要穩(wěn)步前進(jìn)，用大量的試驗(yàn)來對血液安全的有效性進(jìn)行評估。相關(guān)部門也應(yīng)該掌握基層的工作情況，對目前試劑的檢測水平和質(zhì)量加強(qiáng)管理和監(jiān)控。確保用血安全。

1 中華人民共和國衛(wèi)生部.獻(xiàn)血者健康檢查要求.GB18467-2011.

2 李金明.我國血站核酸檢測及質(zhì)量管理的現(xiàn)狀與展望.中國輸血雜志，2012，25:933-934.

3 中華人民共和國衛(wèi)生部.全血及成分血質(zhì)量要求.GB18469-2012.

4 曾勁峰,鄭欣,許曉絢.ELISA檢測與NAT在血液篩查應(yīng)用中的互補(bǔ)性研究.中國輸血雜志，2012,25：1012-1014.

5 王卓妍，陳立，龔曉燕，等.獻(xiàn)血者血液乙型肝炎病毒核酸及血清學(xué)篩查策略的探討.中國輸血雜志，2012,25：995-998.

10.3969/j.issn.1002-7386.2014.13.055

061000 河北省滄州市中心血站

R 915.5

A

1002-7386(2014)13-2046-02

2013-12-14)