活血補髓湯治療激素性股骨頭壞死的實驗研究*

★ 劉國巖 徐琬梨 張世華

(1.山東中醫藥大學附屬醫院骨科 濟南 250014；2.山東中醫藥大學 濟南 250355)

激素性股骨頭缺血性壞死是指因大劑量應用激素而造成股骨頭骨的活成分死亡所引起的病理過程，其發病率呈逐年增加趨勢，已占非創傷性股骨頭壞死的首位[1]。目前對其治療尚無滿意的方法。中藥活血補髓湯是在中醫藥理論的指導下，結合多年的臨床實踐篩選出來的治療股骨頭缺血性壞死的有效方藥。為進一步揭示其作用機理,從動物實驗加以驗證研究。

1 材料與方法

1.1 實驗用藥

1.1.1 中藥活血補髓湯

主要成分為丹參、黃芪、當歸、水蛭、全蝎、鹿茸、仙靈脾、仙茅、骨碎補、牛膝、肉桂、白芍、白術、茯苓、甘草。

1.1.2 仙靈骨葆膠囊 由貴州同濟堂制藥有限公司生產(國藥準字Z20025337)。

1.1.3 地塞米松注射液 由山東魯抗辰欣藥業有限公司提供(國藥準字H37021969)。

1.2 實驗方法

1.2.1 36只新西蘭大白兔(許可證號：SCXK魯20090001)，雌雄各半，體重2.5-3.0kg，隨機分為3組，模型組、對照組、治療組，每組各12只。

1.2.2 參照賀式造模法[2]給模型組、對照組、治療組家兔臀部肌肉注射地塞米松注射液的方法,每次10mg/kg/只,每周2次,共4周,正常組皮下注射生理鹽水2mL/kg/只,所有動物肌注青霉素8萬U/只,每周1次,以預防感染。

1.2.3 造模成功后，一周后起對照組給予10mL/日仙靈骨葆膠囊水溶液灌胃，治療組給予10mL/日活血補髓湯灌胃，正常組、模型組給以生理鹽水5mL/kg/日體重灌胃飼養，連續給藥8周后取材。

1.3 觀察指標

1.3.1 組織形態學檢查 實驗動物處死后，立即解剖髖關節，取其股骨頭，從冠狀面剖開，固定、脫鈣、切片、HE染色,光學顯微鏡觀察骨組織和骨髓組織的骨小梁，骨細胞、脂肪細胞的病理改變。空骨陷窩計數:對每一標本在高倍視野下隨機計數50個骨陷窩,計算其中空骨陷窩所占的百分比

1.3.2 血清學檢查 分別測定血清骨鈣素(BGP)含量、血清白介素-6(IL-6)含量、血管內皮四項含量。

1.4 統計學處理

實驗數據采用均數±標準差表示，各組間比較采用χ2檢驗,α=0.05,所有統計過程用SPSS 16.0統計軟件處理。

2 實驗結果

2.1 組織形態學變化

模型組：股骨頭軟骨下均有區骨小梁變細、稀疏。骨髓細胞大面積減少，部分骨陷窩內骨細胞消失，空骨陷窩數明顯增多。對照組：部分空骨陷窩，骨髓造血細胞較多，骨小梁表面有少許新骨形成。治療組：骨小梁結構基本完整，排列規則。少許空骨陷窩，骨小梁表面有新骨形成。空骨陷窩計數治療組與模型組、對照組比較差異有統計學意義(P<0.05),模型組與對照組組間比較差異無統計學意義(表1)。

表1 各組空骨陷窩率比較(n=12)

2.2 血清骨鈣素(BGP)及白介素-6(IL-6)含量測定結果(表2)

表2 血清骨鈣素(BGP)及白介素-6(IL-6)含量測定結果

2.3 血管內皮四項含量測定結果(表3)

表3 血管內皮四項含量測定結果

3 討論

在實驗研究中，兔血清中BGP、IL-6和血管內皮四項測定結果表明活血補髓湯可以明顯的升高血清BGP、降低IL-6，降低血漿內皮素、升高血清NO水平、降低血漿血栓素及升高前列環素水平，與對照組比較有顯著性差異(P<0.05)；通過測定以上血液中的各項指標含量變化，及光鏡觀察到的骨小梁變細，萎縮，骨髓細胞減少被脂肪細胞填充，并且脂肪細胞肥大，骨小梁內正常骨細胞數量減少。提示激素性股骨頭壞死的發生、發展與激素導致的上述變化有密切關系。

活血補髓湯是在中醫學的理論指導下，采用活血祛瘀、補腎健骨藥物而組方。標本同治，活血化瘀、補肝益腎健壯筋骨治其本，柔肝緩急止痛治其標。且方中活血化瘀兼補血養血、行氣而不傷正。正本清源，使筋骨得充，肝腎得養，血液周流順暢。根據現代藥理研究，丹參抑制血小板凝聚，促進纖維蛋白原溶解，改善微循環，促進側支循環的建立[3]，可促進蛋白多糖合成促進骨細胞分裂增殖，促進骨的重建，實驗證明丹參還具有抗損傷作用的鈣拮抗作用[4]；鹿茸具有促進創傷愈合及抗炎作用；黃芪能促進抗體形成,對抗強的松龍等免疫抑制劑的影響,對體液免疫有促進作用；牛膝通過提高機體免疫機能、激活巨噬細胞系統對細胞的吞噬作用，以及擴張血管、改善循環促進炎性病變吸收；骨碎補有部分抑制激素引起的骨丟失的作用，還能明顯促進蛋白多糖的合成一蛋白多糖可以結合大量的鈣，即為鈣化儲存更多的鈣[5]。

本實驗研究表明，活血補髓湯能夠提高成骨能力促進骨修復和骨重建，提高骨質量，阻斷激素性股骨頭壞死的病理改變。其作用機理可能是通過以下方面實現的:(1)調節骨細胞代謝，促進血清BGP分泌，減少骨質丟失，提高骨密度。(2)降低血清IL-6的分泌，抑制破骨細胞的功能，減少骨吸收。(3)降低血漿內皮素、升高血清NO水平、降低血漿血栓素及升高前列環素水平，減少血管內皮細胞損害，抑制血管痙攣及血小板聚集，減少微血栓形成及血管淤滯引起的缺血性骨壞死。

[1]李子榮，張念非，岳德波，等.激素性股骨頭壞死動物模型誘導和觀察[J].中華外科雜志，1995,33(8):485.

[2]賀西京,毛履真,王坤正,等.腎上腺糖皮質激素引起股骨頭缺血性壞死的機制實驗研究[J].中華骨科雜志,1992,12(6):440.

[3]劉青云．中藥藥理學[M].第2版.北京：人民衛生出版社，1997,12:165.

[4]袁慶之,盛茂鑫,熊吉信．鈣離子在肝缺血再灌注損傷中的作用及丹參的抗損傷作用[J].江西醫藥,1997,32(3):73.

[5]馬克昌,朱太詠,劉鮮茄，等．骨碎補注射液對培養基中雞胚骨原基鈣化的促進作用[J].中國中藥雜志,1995,20(3):178-180.