溫膽湯減輕肥胖大鼠體重及對血清脂聯素水平的影響*

★ 楊海燕 王萍

(江西中醫藥大學 江西 南昌 330004)

溫膽湯是臨床常用的名方，中醫主要用于與“痰證”有關的病證。由飲食導致的脂質代謝紊亂是導致肥胖的重要因素。溫膽湯治療因脂質代謝異常所致的“痰證”卓有成效。已有許多研究對溫膽湯化痰的作用機制進行了探討，本研究在此基礎上觀察了溫膽湯對脂聯素水平的影響。脂聯素是脂肪細胞分泌的一種分子，與調整脂質代謝，抑制肥胖等有關。

1 材料與方法

1.1 動物 SPF級SD大鼠，60只，雄性，60g±10g，購自湖南斯萊克景達實驗動物有限公司，許可證號：SCXK(湘)2013-0004。

1.2 飼料 高脂飼料，由100g基礎飼料中加入豬油15g，蛋黃粉10g，全脂奶粉15g，豬膽鹽0.5g及濃縮魚肝油適量等組成[1]。基礎飼料由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司制作成顆粒狀，B級,許可證號：SCXK(湘)2009-0009。

1.3 藥品與試劑 溫膽湯(陳皮10g、法夏10g、茯苓10g、竹茹10g、炒枳實6g、炙甘草3g、生姜3g、大棗5g)各組成藥物以中藥配方顆粒劑進行配置，由廣東一方制藥有限公司生產。臨用時把各顆粒劑放入容器中，加熱水溶解，制成1g/mL生藥濃度。

大鼠脂聯素ELISA試劑盒，購于上海西唐生物科技有限公司。

1.4 方法

1.4.1 肥胖動物模型造模 SD大鼠60只，分為高脂飼料組48只、正常對照組12只。按核定量給予每組大鼠相同飼料量，高脂飼料組喂養高脂飼料，正常對照組喂養普通基礎飼料。共喂養21d，稱量體重，高脂飼料組體重大鼠與正常對照組比較，體重≧20%者為肥胖模型造模成功。

1.4.2 分組與用藥 肥胖大鼠隨機分為4組，每組6只，即溫膽湯高、中、低劑量組和模型對照組，另設立正常對照組6只。溫膽湯中劑量為人臨床生藥折算劑量5.5g/kg，高劑量為11g/kg，低劑量為2.75g/kg。大鼠每日灌胃1次，干預30d。

1.4.3 肥胖指標觀察 每一周稱取體重一次。至藥物干預結束后，用3%的戊巴比妥鈉藥液麻醉，解剖后完整分離大鼠腎周邊、睪丸周邊脂肪組織進行稱重。

1.4.4 血清脂聯素檢測 大鼠麻醉后暴露心臟，用無菌5mL注射器從左心室采血約4mL，注入無菌采血管中室溫靜置6h，分離血清。采用ELISA法檢測血清脂聯素水平，具體方法依據說明書進行。

1.4.5 統計學分析 采用IBM SPSS 19.0分析軟件，多組均數比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)的LSD檢驗，兩組均數比較采用T進行檢驗。

2 結果

2.1 造模評估 SD大鼠喂養高脂飼料21d后，高脂飼料組體型明顯大于正常對照組。從高脂飼料組和正常對照組中隨機各選擇6只，分別稱取體重進行模型評價，兩組大鼠的體重如表1。

表1 兩組大鼠的體重比較(n=6，g)

經統計分析，兩組大鼠體重存在著極顯著性差異。高脂飼料組平均體重與正常對照組平均體重比較重約20%(實際重19.7%)，可以認為喂飼高脂飼料21d后肥胖模型造模基本成功[2]。

表2 溫膽湯對各組大鼠體重的影響(n=6)

2.2 溫膽湯減輕肥胖的效果觀察 造模后(0周)，模型大鼠隨機分為溫膽湯高、中、低及模型對照組，各組體重與正常對照組比較均有統計學差異。隨著時間的推移，各組體重均在增加，見表2。至第4周末，溫膽湯高、中、低三組的大鼠體重與模型對照組比較更輕，有統計學差異；與正常對照組比較，無統計學差異。溫膽湯不同劑量組間體重無統計學差異。模型對照組與正常對照組比較，其體重仍偏重約7%，且有統計學差異。可見，溫膽湯可以促進超重大鼠體重的減輕。但其劑量依賴性不明顯。

若按大鼠增加的體重計算，每周與藥物干預起始體重(0周)比較，如表3所示，在第4周末，高、中、低、模型對照、正常對照五組增加體重呈現依次增加的趨勢。其中肥胖模型各組的增加體重與正常對照組比較均少，具有統計學差異；另外，高中藥物劑量兩組的增加體重與模型對照組(未用藥)比較更少，具有統計學差異。

表3 溫膽湯對各組大鼠增加體重的影響(n=6)

2.3 溫膽湯對脂肪重的影響 分別剝離腎臟周邊和睪丸周邊的脂肪，合并稱重。結果如表4所示，模型對照組的脂肪最重；溫膽湯高、中劑量組的脂肪重量明顯低于模型對照組，有統計學差異；與正常對照組無明顯差異。

表4 各組大鼠脂肪重量的比較(n=6)

2.4 溫膽湯對血清脂聯素水平的影響 ELISA檢測后，建立標準品濃度與OD值間的曲線關系(二次多項式擬合，r=0.99963065)。根據曲線及所測OD值計算血清脂聯素的濃度，如表5所示。溫膽湯高劑量組的血清脂聯素水平明顯高于模型對照組和正常對照組，有統計學差異。

表5 各組血清脂聯素水平(n=6)

3 討論

溫膽湯源于南北朝名醫姚僧垣的《集驗方》，轉載于唐代孫思邈的《備急千金要方》及王燾的《外臺秘要》，由半夏、陳皮、竹茹、枳實、甘草、生姜組成。古今醫家在臨床應用中靈活變通，在溫膽湯基礎上加減化裁出許多類方，廣泛用于膽郁痰擾所致的各科疾病，臨床療效確鑿[3]。中醫認為，許多與脂質代謝異常有關的疾病，如高血脂癥、糖尿病、代謝綜合征、冠心病等[4-7]均與“痰”有關，“痰”在這些疾病發生、發展過程中有重要作用。本研究采用高脂飼料喂養的肥胖大鼠為模型，結果表明溫膽湯可以減輕肥胖大鼠的體重，對體內脂肪的代謝有促進作用，其觀察結果與臨床應用效果相一致。

脂聯素是一種具有多種生物學效應的細胞因子，由脂肪細胞分泌，并在脂肪組織中大量表達。脂聯素通過與其受體結合，調節糖代謝、脂代謝、炎性反應、胰島素抵抗及動脈粥樣硬化等，具有降血糖、降血脂、抗炎、增加胰島素敏感性和抗動脈粥樣硬化等生理功能，在許多生活方式疾病的發生、發展中發揮重要作用[8]。Kern等[9]研究結果顯示，在不同程度的肥胖及胰島素抵抗非糖尿病患者中，血漿脂聯素水平與脂肪組織脂聯素mRNA水平高度相關，肥胖患者脂聯素水平明顯降低。Cnop等[10]研究顯示，脂聯素血漿濃度取決于腹部脂肪含量，脂聯素可能為聯系腹型肥胖、胰島素抵抗及致動脈粥樣硬化血脂譜的內在因素。何紅等[11]對肥胖者研究發現，肥胖癥兒童血清脂聯素水平降低，與血脂異常及胰島素抵抗相關。本研究結果顯示，溫膽湯高劑量組可以提高血清脂聯素的水平。這一作用可能與溫膽湯減輕肥胖程度有關聯。

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[4]陳建昊，徐凱.加味溫膽湯治療中青年高脂血癥30例療效觀察[J].湖南中醫雜志,2012,28(4):7-8.

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[10]Cnop M，Havel PJ，Utzschneider KM，et al.Relationship of adiponecton to body fat distribution，insulin sensitivity and plasma lipoproteins:evidence for independent roles of age and sex[J].Diabetologia，2005，46(4):459-469.

[11]何紅，張雪姣，林惠林，等.肥胖兒童血清脂聯素水平及代謝相關研究[J].實用預防醫學，2011(7):1 296-1 297.