松油烯4醇體內外對人肺癌細胞系A-549增殖抑制作用

， ，b，，，，

(1.重慶醫科大學：a.病理科；b.神經科學研究中心，重慶 400016；2.重慶市日用化學工業研究所，重慶 400065)

松油烯4醇是一種存在于多種植物精油中的單萜類化合物，具有多種生物活性。研究發現含有該種成分的精油具有抗菌、抗炎、除螨、鎮咳、抗氧化、抗腫瘤等活性，已經被用于治療口腔潰瘍、牙齦炎、牙根管炎、手足癬以及皮膚感染等疾病，同時也用作護膚品的原料，可減少痤瘡引起的紅腫等[1-3]。但目前國內外針對松油烯4醇單體的研究還鮮有報道，本實驗希望通過松油烯4醇對肺癌細胞株A-549增殖抑制作用及可能的作用機制的研究為肺癌及其他腫瘤化療提供一個新的選擇。

1 材料與方法

1.1 細胞株及實驗動物

人細支氣管肺泡癌細胞株 A-549由重慶醫科大學病理科惠贈；SPF級BALB/c-nu裸小鼠21只購至重慶醫科大學實驗動物中心，4～5周齡，體質量15～19 g，雌雄不限，動物飼養合格證號:SCXK[渝]2007-0001。

1.2 主要試劑

標準胎牛血清(HyClone公司)；DMEM 培養基(高糖型，HyClone 公司)；0.25%胰蛋白酶(HyClone公司)；MTT(北京鼎國昌盛生物技術有限責任公司)；CCK8(碧云天生物技術研究所)；松油烯4醇(西亞試劑，純度大于或等于98%)。

1.3 細胞培養、動物飼養及藥品配制

將A549細胞培養于含10%胎牛血清的DMEM高糖完全培養基中，培養基中加入青霉素100 U/mL和鏈霉素100 Lg/mL。將細胞置于37 ℃，5%CO2孵箱中在飽和濕度下培養，隔日換液1次，每3天以1∶2正常傳代培養1次，采用0.25%胰蛋白酶消化細胞。裸鼠實驗和飼養均在重慶醫科大學動物實驗中心恒溫、恒濕的 SPF 動物房進行，12 h 晝夜節律，裸鼠可以自由進食和飲水。松油烯4醇以11 ul加入5.5 mL培養液中配成0.2%v/v的母液使用時按比例稀釋成0.02%～0.1% v/v工作液。……