Annexin A1表達(dá)水平與骨巨細(xì)胞瘤術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)性

李穎智,金海鴻,楊 彬,秦悅洋,李成鎮(zhèn),胡惠靜,李 敏,季宏波,王 全,毛 鐵

(黑龍江省醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱150036)

骨巨細(xì)胞瘤是一種原發(fā)性、溶骨性骨腫瘤,侵襲性較強(qiáng)。多發(fā)生于青壯年,病灶多位于骨骺端,且多為單發(fā)病灶；多中心發(fā)生率低[1]?；颊咄ǔ８贻p,多見于女性和骨骼未成熟患者[2,3]。骨巨細(xì)胞瘤治療方案選擇存在困難和爭議,本研究對骨巨細(xì)胞瘤復(fù)發(fā)前后Annexin A1表達(dá)水平進(jìn)行檢測,探討Annexin A1與骨巨細(xì)胞瘤術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)性。

1 一般資料

1.1臨床資料2003年9月至2009年9月收治13例復(fù)發(fā)的四肢部位單發(fā)骨巨細(xì)胞瘤。男4 例,女 9例；發(fā)病年齡21-45 歲,平均年齡 27.5 歲；發(fā)病部位：股骨遠(yuǎn)端4例,脛骨近端5例,肱骨遠(yuǎn)端1例,橈骨遠(yuǎn)端3例。

1.2主要試劑鼠抗人Annexin A1單克隆抗體購自臺灣Abnova公司,即用型快捷免疫組化MaxVisionTM試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)有限公司。

1.3免疫組織化學(xué)染色用已知染色陽性的組織切片作為陽性對照,PBS代替一抗作為陰性對照。按試劑盒說明書操作。

1.4結(jié)果判定觀察結(jié)果采用雙盲法,陽性判定以染色強(qiáng)度及陽性細(xì)胞數(shù)綜合判定。按照陽性細(xì)胞比例計分：≤10%為1分,10%-50%為2分,>50%為3分；按染色強(qiáng)弱計分：陰性為0分,淡黃色染色為1分,中度黃色染色為2分,棕褐色染色為3分。以二者之積計總分：總分0-1為陰性,2-3分為弱陽性,4-5為陽性,>5分為強(qiáng)陽性。

2 結(jié)果

Annexin A1在所有骨巨細(xì)胞瘤組織中均有表達(dá),以單核基質(zhì)細(xì)胞表達(dá)為主,均為細(xì)胞漿染色,細(xì)胞染色數(shù)目較多,強(qiáng)度為弱陽性或陽性,多核巨細(xì)胞不表達(dá)或弱表達(dá),復(fù)發(fā)后 Annexin A1表達(dá)8例增強(qiáng),2例減弱,3例無明顯改變。采用秩相關(guān)分析(P=0.0636,無統(tǒng)計學(xué)差異),詳見表1、 圖1、圖2。

圖1AnnexinA1在骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)圖2骨巨細(xì)胞瘤復(fù)發(fā)后Annexin A1的表達(dá)增強(qiáng)

表1 復(fù)發(fā)前后Annexin A1表達(dá)差異

3 討論

研究表明Annexin A1在不同來源腫瘤中作用不盡相同：Annexin A1 抑制低轉(zhuǎn)移胰腺癌細(xì)胞遷移能力,表達(dá)下調(diào)能促進(jìn)低轉(zhuǎn)移細(xì)胞的遷移能力[4]；通過siRNA 阻斷Annexin A1表達(dá),能顯著降低結(jié)、直腸癌細(xì)胞系SKCO-15 細(xì)胞侵襲能力,抗Annexin A1血清也能得到相似的結(jié)果,在系統(tǒng)中加入重組 Annexin A1 和Annexin A1 N末端肽 Ac2-26 時,SKCO-15 細(xì)胞的侵襲能力可增大2倍[5]。 Annexin A1在不同來源腫瘤中表達(dá)水平不盡相同：Annexin A1在肺鱗癌[6]、胰腺癌組織中表達(dá)明顯升高[7]；Annexin-A1在膽管癌中高表達(dá),肝細(xì)胞癌中低表達(dá)[8]。頭頸鱗狀細(xì)胞癌中,Annexin A1表達(dá)存在著高頻率的下調(diào)/缺失[9]；Annexin A1在口腔鱗癌中表達(dá)下降[10]。Annexin A1基因表達(dá)上調(diào)能提高結(jié)、直腸癌細(xì)胞遷移和侵襲能力[11]；Annexin A1高表達(dá)是胃癌病人預(yù)后差的獨立危險因子[12]；Annexin A1與胃癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、患者早期死亡密切相關(guān)[13]。

本研究采用秩相關(guān)分析(P=0.0636),13例骨巨細(xì)胞瘤復(fù)發(fā)前后病理組織Annexin A1表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義。本文不足之處：(1)實驗方法相對簡單,尚需其他技術(shù)方法進(jìn)一步驗證；(2)樣本數(shù)量小,尚需多中心、大樣本研究；(3)以下因素有可能干擾實驗結(jié)論：①腫瘤復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移不僅僅取于與腫瘤自身性質(zhì),手術(shù)水平存在一定的干擾,不充分的術(shù)前計劃、不良的外科技術(shù)導(dǎo)致取骨區(qū)腫瘤移植[14]；②手術(shù)越徹底復(fù)發(fā)可能性越小,腫瘤實際范圍大于肉眼及影像學(xué)檢查所見,術(shù)后復(fù)發(fā)可能與腫瘤組織殘留有關(guān)； ③局部軟組織侵潤影響刮除術(shù)后局部復(fù)發(fā)[15]。④骨水泥聚合熱是否對腫瘤活性有影響,以往認(rèn)為骨水泥聚合熱對腫瘤細(xì)胞有直接的細(xì)胞毒作用,啟動程序化死亡即細(xì)胞凋亡并減弱腫瘤活性,筆者認(rèn)為這一觀點或需進(jìn)一步研究證實,而高溫?fù)p傷局部血管影響腫瘤血供可能是導(dǎo)致腫瘤壞死重要原因之一。如本實驗觀察到2例采用病灶擴(kuò)大刮除骨水泥填充病例復(fù)發(fā)后Annexin A表達(dá)增強(qiáng),1例采用骨水泥固定人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后復(fù)發(fā)病例Annexin A表達(dá)減弱。總之,Annexin A1表達(dá)水平是否與骨巨細(xì)胞瘤術(shù)后復(fù)發(fā)相關(guān)有必要進(jìn)一步深入研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]Hoch B,Inwards C,Sundaram M,et al. Multicentric giant cell tumor of bone:clinicopathologic analysis of thirty cases[J]. Journal of Bone and Joint Surgery,2006,88(9):1998.

[2]Park IH,Jeon IH. Multicentric giant cell tumor of bone:ten lesions at presentation[J]. Skeletal Radiology,2003,32(9):526.

[3]Zahid M,Asif N,Bin Sabir A,et al. Metachronous multicentric giant cell tumour of the upper extremity in a skeletally immature girl:a rare presentation[J]. Acta Orthopaedica Belgica,2010,76(5):694.

[4]湯曉東,周家華. Annexin A1 調(diào)控胰腺癌細(xì)胞遷移[J]. 東南大學(xué)學(xué)報 ( 醫(yī)學(xué)版),2013,32( 1) :10.

[5]Babbin BA,Lee WY,Parkos CA,et al. Annexin I regulates SKCO-15 cell invasion by signaling through formyl peptide receptors [J]. J Biol Chem,2006,281:19588.

[6]燕 貞,劉桂芝,王建設(shè),等. 蛋白質(zhì)組學(xué)方法篩選早期肺鱗癌相關(guān)蛋白[J]. 腫瘤,2010,30(2):130.

[7]倪曉光,白曉楓,王貴奇,等. 膜聯(lián)蛋白A1和Ki67抗原在胰腺癌組織中的表達(dá)及其相互關(guān)系[J]. 中國腫瘤,2010,19(8):549.

[8]Hongsrichan N,Rucksaken R,Chamgramol Y,et,al. Annexin A1:A new immunohistological marker of cholangiocarcinoma[J]. World J Gastroenterol,2013,19 (16):2456.

[9]Garcia Pedrero JM,Fernandez MP,Morgan RO,et al. Annexin A1 down-regulation in head and neck cancer is associated with epithelial differentiation status [J]. Am J Pathol,2004,164:73.

[10]張 雷,楊 筱,鐘來平,等. 膜聯(lián)蛋白A1表達(dá)下降在口腔癌中的意義[J].中國口腔頜面外科雜志,2008,6(1):22.

[11]楊曉群,葛慧娟,汪佳祺. pcDNA3.1-Annexin A1真核表達(dá)載體對結(jié)直腸癌細(xì)胞遷移、侵襲的影響[J]. 第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報,2010,31(3):264.

[12]Cheng TY,Wu MS,Lin JT,et al. Annexin A1 is associated with gastric cancer survival and promotes gastric cancer cell invasiveness through the formyl peptide receptor/extracellular signal-regulated kinase/integrin beta-1-binding protein 1 pathway[J]. Cancer,2012,118(23):5757.

[13]張瓏涓,李 斌,謝 至,等. Annexin A1在胃癌中的表達(dá)及其與胃癌預(yù)后的關(guān)系[J]. 中山大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版),2011,32(2):237.

[14]Zile S Kundu,Vinay Gupta,Sukhbir S Sangwan,et al. Iatrogenic giant cell tumor at bone graft harvesting site[J]. Indian J Orthop,2013,47(1):107.

[15]L van der Heijden,MA van de Sande,PD Dijkstra. Soft tissue extension increases the risk of local recurrence after curettage with adjuvants for giant-cell tumor of the long bones:A retrospective study of 93 patients[J]. Acta Orthop,2012,83(4):401.