長枝木霉的研究進展及檢疫風險分析

陳文俊 王麗萍

（常州出入境檢驗檢疫局 213022）

木霉菌是自然界中普遍存在的一種真菌，從植物根際、葉片及種子、球莖表面經常可以分離到[1]。木霉菌生長、繁殖速度快，能迅速占領營養空間，具有很強的競爭優勢。有些木霉具有活性很強的纖維素酶、幾丁質霉、木聚糖霉等水解酶類[2]，可用于植物病害的生物防治，也有少數木霉能引發蘑菇等作物病害[3]。長枝木霉（Trichoderma longibrachiatum）作為木霉菌屬中重要的一種，已經引起國內外很多學者的重視。2013年，江蘇出入境檢驗檢疫局在全國口岸首次截獲該類有害生物。本文概述了長枝木霉的研究現狀及進展，并對其進行檢疫風險分析。

1 分類學地位

木霉屬真菌的概念是1974年由Persoon 首先提出的[2]。20 世紀80年代中后期～90年代初，Bissett對木霉屬提出了一個新的分類系統，并在其分類系統中引進了“組”的概念。他將木霉屬分成了5個組：Longibrachiatum 組、Saturnisporum 組、Trichoderma 組、Pachybasium 組和Hypocreaum 組，組下設若干種[4]。其中，Longibrachiatum 組是Bissett 于1984年建立的，共計4個種，包括：T.longibrachiatum Rifai，T，pseudokoningii Rifai，T.citrinoviride Bissett，T.Parceramosum Bissett[5]。Samuels et al.進一步研究了Longibrachiatum 組木霉與其有性型的聯系，并對這個組重新進行了修訂，修訂后的Longibrachiatum 組包括6個全型種和4個無性種[6]。綜上所述，長枝木霉屬于木霉屬半知菌亞門、絲孢綱、絲孢目、木霉菌屬、Longibrachiatum 組。

2 生物學特性

長枝木霉菌落生長速度快，背面無色至黃綠色。產孢菌絲主枝較長，基部有次級分枝，常單生，稀對生或輪生，三級分枝稀少或無。瓶梗細葫蘆形，略呈彎曲狀，基部常略收縮或不收縮，在孢子梗及分枝上部，不規則單生，下部輪生或不規則著生于孢子梗上；瓶梗與孢子梗成直角，分枝末端瓶梗較長。分生孢子灰綠色，倒卵形或橢圓形，長約4.5μm，寬約2.7μm，表面光滑[7]。

王斌等[8]通過對長枝木霉TICC 菌株培養基、光照、溫度、碳源、氮源、微量元素和pH 值等生物學特性進行研究，結果顯示：長枝木霉菌株在多種培養基上都能正常生產并產孢；光照可以促進很多木霉屬真菌的孢子產生，但對菌絲生長促進不顯著；長枝木霉能適應較高的溫度，在40℃時也能保持一定的生長活性，在35℃時菌絲生長最快；不同碳源對菌絲生長和孢子影響差異顯著，果糖能被很好地利用，而乳糖則對其有一定抑制作用；谷氨酸能提供最好的氮源，可促進菌絲生長和產孢；鋅元素則對菌絲生長有抑制作用。這些特性都與其他已報道的木霉屬真菌有所區別[9～10]。

3 拮抗機理的研究

木霉菌是自然界中普遍存在的并有豐富資源的拮抗性真菌，長枝木霉作為木霉菌屬重要的一種，其拮抗作用也越來越受到人們的關注。史鳳玉等[11]篩選到長枝木霉T8 菌株，通過對峙培養實驗，長枝木霉T8 對立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）形成明顯的拮抗帶，界面處病菌菌絲的細胞質變稀薄、消解或菌絲斷裂，病菌菌絲停止生長，同時對立枯絲核菌菌核形成包圍，抑制其萌發。王革等[12]利用誘捕法從土壤中分離得到1 株長枝木霉，采用對峙法測定其對煙草黑脛病菌（Phytophthora nicotiana）的拮抗作用，并通過溫室盆栽、田間試驗驗證了長枝木霉良好的生防效果。可見，長枝木霉對部分植物病原真菌有較強的拮抗作用。

此外，長枝木霉對植物線蟲也有一定的拮抗作用。張樹武等[13]對不同時期長枝木霉分生孢子懸浮液對南方根結線蟲（Meloidogyne incognita）2 齡幼蟲的致死和寄生作用過程進行了顯微觀察和室內測定。結果表明，長枝木霉分生孢子吸附或寄生在蟲體表面，并萌發大量菌絲穿透蟲體體壁，蟲體出現畸形甚至溶解。長枝木霉分生孢子懸浮液對南方根結線蟲的寄生率高達87.33%，使其死亡率高達90%。

4 檢疫風險分析

長枝木霉作為木霉屬的一種，在世界上廣泛分布，因此不列為限定的檢疫性有害生物。目前對長枝木霉的對植物病原微生物的生防作用研究較多，包括生長競爭作用、重寄生作用、拮抗作用等。長枝木霉由于危害程度較小，暫判斷其無檢疫風險。但是，目前相關研究還處于起步階段，長枝木霉對人畜及植物的安全性、寄主范圍等尚需進一步研究。

[1]馬 平，沈崇堯.木霉菌和腐霉菌對棉鈴疫菌的作用研究[J].生物防治通報，1993，9（3）：122-125.

[2]章初龍，徐 同.木霉屬及其有性型分類學與分子系統學研究進展[J].浙江大學學報，2003，29（4）：461-470.

[3]Muthumeenakshi S，Mills P R，Brown A E，et al.Intraspecificmolecular variation among Trichodermaharzianum isolates colonizingmushroom compost in the British Isles[J].Microbiology，1994，140∶769-777.

[4]Bissett J.Trichoderma atroviride[J].Canad.J.Bot.，1992，70：639-641.

[5]Bissett J.A revision of the genus Trichoderma：Ⅰ.Section Longibrachialum，new section [J].Can.J.Bot.，1984，62 ∶924-931.

[6]Samuels G J，Petrini O，Kuhls K，et al.The Hypocreaa schweinitzii complex and Trichoderma sect.Logibrachiatum[J].Stud.Mycol.，1998，41∶1-54.

[7]孫 軍，段玉璽，呂國忠.遼寧木霉菌（Trichoderma）真菌的形態分類研究[J].菌物研究，2006，4（2）：38-44.

[8]王 斌，Ali Khatib Bakar，劉金亮等.長枝木霉TICC鑒定及其生物學特性研究[J].中國農學通報，2011，27（05）：338-345.

[9]紀明山，李博強，許 遠，等.綠色木霉TR-8 菌株的生物學特性研究[J].沈陽農業大學學報，2004，35（3）：195-199.

[10]金海友，呂淑霞，于 冰，等.木霉菌T25 生物學特性的研究[J].微生物學雜志，2007，27（6）：55-59.

[11]史鳳玉，朱英波，楊文蘭.長枝木霉T8 對水稻紋枯病菌拮抗的作用研究[J].中國農學通報，2005，21（2）：264-271.

[12]王 革，李梅云，段玉琪等.木霉菌對煙草黑脛病菌的拮抗機制及其生物防治研究[J].云南大學學報，2001，23（3）：222-226.

[13]張樹武，徐秉良，薛應鈺等.長枝木霉對南方根據線蟲致死和寄生作用的顯微觀察及測定[J].植物保護，2013，39（4）：46-51.