郎德鵝大腸桿菌病的診斷與防治

廖勤豐+李文娟+向幫全+譚素雯

摘要：鵝大腸桿菌?。℅oose E.coli disease， GED）是由鵝致病性大腸埃希氏菌所引起的細(xì)菌性傳染病。2012年2月底，重慶市萬州區(qū)某郎德鵝場有4 300多只鵝發(fā)生了以精神沉郁、拉稀、呈急性發(fā)病死亡為特征的病例。對該病例進(jìn)行了病原分離與鑒定，并對分離株進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)。結(jié)果表明，該分離株在菌落形態(tài)、染色特性及生化特性上與大腸埃希氏菌相符，故將該分離株鑒定為鵝大腸埃希氏菌。對氟苯尼考、頭孢噻肟、慶大霉素等26種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，該分離株對甲氧芐啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物耐藥。

關(guān)鍵詞：鵝大腸桿菌病；分離鑒定；藥敏試驗(yàn)

中圖分類號：S858.33文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2014）03-0020-02

鵝大腸桿菌?。℅oose E.coli disease， GED）是由鵝致病性大腸埃希氏菌所引起的局部或全身性感染的細(xì)菌性疾病，俗稱“蛋子瘟”，臨床上主要表現(xiàn)為敗血癥，腹膜炎，纖維素性氣囊炎，肝周炎，心包炎，腫頭綜合癥及輸卵管炎等類型，各種年齡的鵝均可感染，以雛鵝多發(fā)，感染率達(dá)5%～30%，病死率可達(dá)90%以上，正在成為危害養(yǎng)鵝業(yè)的主要疫病之一[1～3]，近年來，隨著抗菌藥物的大量應(yīng)用，鵝大腸桿菌耐藥菌株不斷出現(xiàn)，使鵝大腸桿菌病的防治難度進(jìn)一步加大[4，5]。本試驗(yàn)對一起郎德鵝大腸桿菌病進(jìn)行病原的分離與鑒定，并對分離株進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果對該起鵝大腸桿菌病進(jìn)行了有效的防治。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)樣品

2012年2月底，重慶市萬州區(qū)某郎德鵝場有4 300多只鵝發(fā)生了以精神沉郁、拉稀、呈急性發(fā)病死亡為特征的病例。該鵝場共飼養(yǎng)4 300多只鵝，從青年鵝至雛鵝分為4批，每群有1 000余只鵝，青年鵝首先發(fā)病，其余3批隨后也發(fā)病，7d內(nèi)共死亡650只。病鵝主要表現(xiàn)精神萎靡不振，羽毛雜亂蓬松，俯臥在地，不愿走動(dòng)，打盹，下痢，糞便稀、呈綠白色，病程短，一般發(fā)病至死亡不超過24 h。剖檢約有70%呈敗血癥狀，廣泛性出血，腹腔有大量黃色干酪樣物質(zhì)；心包炎、肝周炎及氣囊炎；心臟腫大、心包積液及心肌出血；腸道黏膜脫落，出血，壞死。無菌采集發(fā)病鵝的心包積液及典型病變組織。

1.2 材料

麥康凱培養(yǎng)基、普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、肉湯培養(yǎng)基、生化鑒定管及藥敏紙片均購自杭州微生物制劑有限公司。

1.3 方法

1.3.1 細(xì)菌的分離及形態(tài)學(xué)觀察 無菌采集具有典型發(fā)病鵝病變組織及心包積液，接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h，觀察細(xì)菌生長情況。然后挑取單個(gè)菌落接種于麥康凱瓊脂平板，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h，挑取紅色單菌落進(jìn)行涂片、革蘭氏染色及鏡檢[6]。

1.3.2 生化試驗(yàn) 挑取革蘭陰性短桿菌的紅色單菌落于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行純培養(yǎng)后，按說明書接種于糖發(fā)酵試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、檸檬酸鹽試驗(yàn)、靛基質(zhì)MR試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、硫化氫（H2S）試驗(yàn)等生化鑒定管，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h h。

1.3.3 藥敏試驗(yàn) 取純培養(yǎng)獲得的單菌落接種于肉湯培養(yǎng)基，37 ℃振蕩培養(yǎng)，按照參考文獻(xiàn)[7]方法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。按參考文獻(xiàn)[8]方法判定抗菌藥物敏感程度：抑菌圈最小直徑≥20mm為高度敏感，抑菌圈最小直徑≤10mm為低度敏感，抑菌圈最小直徑在10～20mm者為中度敏感，無菌環(huán)出現(xiàn)者為耐藥。

2 結(jié)果與分析

2.1分離鑒定結(jié)果

在普通瓊脂培養(yǎng)基上呈灰白色、圓形、中間稍隆起、邊緣光滑濕潤；在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上呈磚紅色、圓形隆起、光滑濕潤及邊緣整齊菌落；分離菌株革蘭氏染色鏡檢均為中等大小、兩端鈍圓的革蘭氏陰性桿菌，該分離菌株與大腸桿菌染色特性相符。

2.2生化鑒定結(jié)果

分離菌株能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖、甘露醇、蔗糖。青定基質(zhì)試驗(yàn)陽性、MR試驗(yàn)陽性；H2S試驗(yàn)陰性、VP試驗(yàn)陰性；枸櫞酸鹽試驗(yàn)為陰性；尿素酶試驗(yàn)為陰性。根據(jù)生化鑒定結(jié)果，根據(jù)《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊（第八版）》，該分離菌株符合大腸桿菌特征。

2.3藥敏試驗(yàn)結(jié)果

選取氟苯尼考、頭孢噻肟、慶大霉素、丁胺卡那霉素、菌必治、先鋒霉素、四環(huán)素、氟哌酸等26種抗菌藥物藥敏紙片對郎德鵝大腸桿菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，其中氟苯尼考、頭孢噻肟、菌必治等10種抗菌藥物為高敏；慶大霉素、紅霉素、妥布霉素、恩諾沙星等6種抗菌藥物為中敏；磺胺異惡唑?yàn)榈投让舾?；甲氧芐啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物為耐藥（表1）。

3 防治措施

加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和日常消毒工作，保持鵝舍清潔衛(wèi)生、保證鵝舍通風(fēng)良好；做好鵝飲用水、游泳池水源的消毒及定時(shí)更換；及時(shí)隔離發(fā)病鵝，淘汰久治不愈的鵝只。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用敏感藥物進(jìn)行治療和預(yù)防：發(fā)病鵝群用氟苯尼考飲水，同時(shí)添加維生素C，連用5d，停2d，后用頭孢噻肟飲水，用藥5d。對未發(fā)病鵝群使用多價(jià)大腸桿菌苗進(jìn)行緊急免疫接種。該鵝場按照以上方法進(jìn)行防治后，有效的控制了疫情，在用藥后的第三天鵝群死亡率明顯下降，兩個(gè)療程的用藥后，鵝群無新發(fā)病例和死亡。

4討論

大腸桿菌病是禽類的常見病，一些種鵝場發(fā)生的大腸桿菌病較為嚴(yán)重，近年來，隨著抗菌藥物的大量應(yīng)用，耐藥菌株不斷出現(xiàn)，使鵝大腸桿菌病的防治難度進(jìn)一步加大。

該郎德鵝場最近幾年頻發(fā)以拉稀為主、全身敗血癥狀、急性發(fā)病死亡及高死亡率為特征的病例。此次發(fā)病通過病原分類與鑒定，確診為鵝大腸桿菌病，分析該鵝場常年發(fā)生大腸桿菌病的原因，平時(shí)的飼養(yǎng)管理不合理是主因，鵝飼養(yǎng)密度過大，鵝舍清潔衛(wèi)生不徹底，水池的消毒及定時(shí)更換不到位，促使該場環(huán)境中常年帶菌，故鵝群易因應(yīng)激因素反復(fù)感染大腸桿菌。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明該場大腸桿菌對胺異惡唑?yàn)榈投让舾校患籽跗S啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物為耐藥，該養(yǎng)殖戶存在超劑量用藥、換藥過于頻繁、常年使用同種藥物等濫用抗菌藥物的現(xiàn)象，且對鵝場發(fā)病后的終末消毒及預(yù)防性消毒措施不到位，使鵝群長期帶菌。

對于鵝大腸桿菌病的防治，除使用多價(jià)大腸桿菌疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防接種外；還應(yīng)采取加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理和水源衛(wèi)生，提高飼料品質(zhì)，強(qiáng)化環(huán)境衛(wèi)生消毒，臨床上要做好合理選藥、聯(lián)合用藥、穿梭用藥及輪換用藥；改變不良用藥習(xí)慣，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用高敏藥物進(jìn)行治療。

參考文獻(xiàn)：

[1] CALNEK B W.禽病學(xué)[M].蘇敬良，高 福，索 勛，譯. 第十二版. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2012.

[2] 甘盂候. 中國禽病學(xué)[M]. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 1999.

[3] 陳伯倫， 陳偉斌. 鵝病診斷與策略防治[M]. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2012.

[4] 于守平， 王光輝， 胡桂學(xué)， 等. 吉林白鵝大腸桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào)， 2004（4）： 22 23.

[5] 徐永榮， 陳宏生， 趙寶華. 肉鵝大腸桿菌病的病原分離與鑒定[J]. 中國畜牧獸醫(yī)， 2011， 38（12）： 188 190.

[6] 姚火春. 獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2002.

[7] 嚴(yán)玉霖， 雷 華， 楊尚斌， 等. 鵝大腸桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 中國畜牧獸醫(yī)， 2011， 38（10）： 160 162.

[8] 張 婷， 布日額， 吳金華， 等. 一例鵝大腸桿菌病的診斷[J]. 中國家禽， 2011， 31（10）： 53 54.

摘要：鵝大腸桿菌?。℅oose E.coli disease， GED）是由鵝致病性大腸埃希氏菌所引起的細(xì)菌性傳染病。2012年2月底，重慶市萬州區(qū)某郎德鵝場有4 300多只鵝發(fā)生了以精神沉郁、拉稀、呈急性發(fā)病死亡為特征的病例。對該病例進(jìn)行了病原分離與鑒定，并對分離株進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)。結(jié)果表明，該分離株在菌落形態(tài)、染色特性及生化特性上與大腸埃希氏菌相符，故將該分離株鑒定為鵝大腸埃希氏菌。對氟苯尼考、頭孢噻肟、慶大霉素等26種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，該分離株對甲氧芐啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物耐藥。

關(guān)鍵詞：鵝大腸桿菌??；分離鑒定；藥敏試驗(yàn)

中圖分類號：S858.33文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2014）03-0020-02

鵝大腸桿菌病（Goose E.coli disease， GED）是由鵝致病性大腸埃希氏菌所引起的局部或全身性感染的細(xì)菌性疾病，俗稱“蛋子瘟”，臨床上主要表現(xiàn)為敗血癥，腹膜炎，纖維素性氣囊炎，肝周炎，心包炎，腫頭綜合癥及輸卵管炎等類型，各種年齡的鵝均可感染，以雛鵝多發(fā)，感染率達(dá)5%～30%，病死率可達(dá)90%以上，正在成為危害養(yǎng)鵝業(yè)的主要疫病之一[1～3]，近年來，隨著抗菌藥物的大量應(yīng)用，鵝大腸桿菌耐藥菌株不斷出現(xiàn)，使鵝大腸桿菌病的防治難度進(jìn)一步加大[4，5]。本試驗(yàn)對一起郎德鵝大腸桿菌病進(jìn)行病原的分離與鑒定，并對分離株進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果對該起鵝大腸桿菌病進(jìn)行了有效的防治。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)樣品

2012年2月底，重慶市萬州區(qū)某郎德鵝場有4 300多只鵝發(fā)生了以精神沉郁、拉稀、呈急性發(fā)病死亡為特征的病例。該鵝場共飼養(yǎng)4 300多只鵝，從青年鵝至雛鵝分為4批，每群有1 000余只鵝，青年鵝首先發(fā)病，其余3批隨后也發(fā)病，7d內(nèi)共死亡650只。病鵝主要表現(xiàn)精神萎靡不振，羽毛雜亂蓬松，俯臥在地，不愿走動(dòng)，打盹，下痢，糞便稀、呈綠白色，病程短，一般發(fā)病至死亡不超過24 h。剖檢約有70%呈敗血癥狀，廣泛性出血，腹腔有大量黃色干酪樣物質(zhì)；心包炎、肝周炎及氣囊炎；心臟腫大、心包積液及心肌出血；腸道黏膜脫落，出血，壞死。無菌采集發(fā)病鵝的心包積液及典型病變組織。

1.2 材料

麥康凱培養(yǎng)基、普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、肉湯培養(yǎng)基、生化鑒定管及藥敏紙片均購自杭州微生物制劑有限公司。

1.3 方法

1.3.1 細(xì)菌的分離及形態(tài)學(xué)觀察 無菌采集具有典型發(fā)病鵝病變組織及心包積液，接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h，觀察細(xì)菌生長情況。然后挑取單個(gè)菌落接種于麥康凱瓊脂平板，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h，挑取紅色單菌落進(jìn)行涂片、革蘭氏染色及鏡檢[6]。

1.3.2 生化試驗(yàn) 挑取革蘭陰性短桿菌的紅色單菌落于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行純培養(yǎng)后，按說明書接種于糖發(fā)酵試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、檸檬酸鹽試驗(yàn)、靛基質(zhì)MR試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、硫化氫（H2S）試驗(yàn)等生化鑒定管，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h h。

1.3.3 藥敏試驗(yàn) 取純培養(yǎng)獲得的單菌落接種于肉湯培養(yǎng)基，37 ℃振蕩培養(yǎng)，按照參考文獻(xiàn)[7]方法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。按參考文獻(xiàn)[8]方法判定抗菌藥物敏感程度：抑菌圈最小直徑≥20mm為高度敏感，抑菌圈最小直徑≤10mm為低度敏感，抑菌圈最小直徑在10～20mm者為中度敏感，無菌環(huán)出現(xiàn)者為耐藥。

2 結(jié)果與分析

2.1分離鑒定結(jié)果

在普通瓊脂培養(yǎng)基上呈灰白色、圓形、中間稍隆起、邊緣光滑濕潤；在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上呈磚紅色、圓形隆起、光滑濕潤及邊緣整齊菌落；分離菌株革蘭氏染色鏡檢均為中等大小、兩端鈍圓的革蘭氏陰性桿菌，該分離菌株與大腸桿菌染色特性相符。

2.2生化鑒定結(jié)果

分離菌株能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖、甘露醇、蔗糖。青定基質(zhì)試驗(yàn)陽性、MR試驗(yàn)陽性；H2S試驗(yàn)陰性、VP試驗(yàn)陰性；枸櫞酸鹽試驗(yàn)為陰性；尿素酶試驗(yàn)為陰性。根據(jù)生化鑒定結(jié)果，根據(jù)《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊（第八版）》，該分離菌株符合大腸桿菌特征。

2.3藥敏試驗(yàn)結(jié)果

選取氟苯尼考、頭孢噻肟、慶大霉素、丁胺卡那霉素、菌必治、先鋒霉素、四環(huán)素、氟哌酸等26種抗菌藥物藥敏紙片對郎德鵝大腸桿菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，其中氟苯尼考、頭孢噻肟、菌必治等10種抗菌藥物為高敏；慶大霉素、紅霉素、妥布霉素、恩諾沙星等6種抗菌藥物為中敏；磺胺異惡唑?yàn)榈投让舾校患籽跗S啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物為耐藥（表1）。

3 防治措施

加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和日常消毒工作，保持鵝舍清潔衛(wèi)生、保證鵝舍通風(fēng)良好；做好鵝飲用水、游泳池水源的消毒及定時(shí)更換；及時(shí)隔離發(fā)病鵝，淘汰久治不愈的鵝只。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用敏感藥物進(jìn)行治療和預(yù)防：發(fā)病鵝群用氟苯尼考飲水，同時(shí)添加維生素C，連用5d，停2d，后用頭孢噻肟飲水，用藥5d。對未發(fā)病鵝群使用多價(jià)大腸桿菌苗進(jìn)行緊急免疫接種。該鵝場按照以上方法進(jìn)行防治后，有效的控制了疫情，在用藥后的第三天鵝群死亡率明顯下降，兩個(gè)療程的用藥后，鵝群無新發(fā)病例和死亡。

4討論

大腸桿菌病是禽類的常見病，一些種鵝場發(fā)生的大腸桿菌病較為嚴(yán)重，近年來，隨著抗菌藥物的大量應(yīng)用，耐藥菌株不斷出現(xiàn)，使鵝大腸桿菌病的防治難度進(jìn)一步加大。

該郎德鵝場最近幾年頻發(fā)以拉稀為主、全身敗血癥狀、急性發(fā)病死亡及高死亡率為特征的病例。此次發(fā)病通過病原分類與鑒定，確診為鵝大腸桿菌病，分析該鵝場常年發(fā)生大腸桿菌病的原因，平時(shí)的飼養(yǎng)管理不合理是主因，鵝飼養(yǎng)密度過大，鵝舍清潔衛(wèi)生不徹底，水池的消毒及定時(shí)更換不到位，促使該場環(huán)境中常年帶菌，故鵝群易因應(yīng)激因素反復(fù)感染大腸桿菌。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明該場大腸桿菌對胺異惡唑?yàn)榈投让舾?；甲氧芐啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物為耐藥，該養(yǎng)殖戶存在超劑量用藥、換藥過于頻繁、常年使用同種藥物等濫用抗菌藥物的現(xiàn)象，且對鵝場發(fā)病后的終末消毒及預(yù)防性消毒措施不到位，使鵝群長期帶菌。

對于鵝大腸桿菌病的防治，除使用多價(jià)大腸桿菌疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防接種外；還應(yīng)采取加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理和水源衛(wèi)生，提高飼料品質(zhì)，強(qiáng)化環(huán)境衛(wèi)生消毒，臨床上要做好合理選藥、聯(lián)合用藥、穿梭用藥及輪換用藥；改變不良用藥習(xí)慣，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用高敏藥物進(jìn)行治療。

參考文獻(xiàn)：

[1] CALNEK B W.禽病學(xué)[M].蘇敬良，高 福，索 勛，譯. 第十二版. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2012.

[2] 甘盂候. 中國禽病學(xué)[M]. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 1999.

[3] 陳伯倫， 陳偉斌. 鵝病診斷與策略防治[M]. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2012.

[4] 于守平， 王光輝， 胡桂學(xué)， 等. 吉林白鵝大腸桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào)， 2004（4）： 22 23.

[5] 徐永榮， 陳宏生， 趙寶華. 肉鵝大腸桿菌病的病原分離與鑒定[J]. 中國畜牧獸醫(yī)， 2011， 38（12）： 188 190.

[6] 姚火春. 獸醫(yī)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M]. 北京： 中國農(nóng)業(yè)出版社， 2002.

[7] 嚴(yán)玉霖， 雷 華， 楊尚斌， 等. 鵝大腸桿菌的分離鑒定及藥敏試驗(yàn)[J]. 中國畜牧獸醫(yī)， 2011， 38（10）： 160 162.

[8] 張 婷， 布日額， 吳金華， 等. 一例鵝大腸桿菌病的診斷[J]. 中國家禽， 2011， 31（10）： 53 54.

摘要：鵝大腸桿菌?。℅oose E.coli disease， GED）是由鵝致病性大腸埃希氏菌所引起的細(xì)菌性傳染病。2012年2月底，重慶市萬州區(qū)某郎德鵝場有4 300多只鵝發(fā)生了以精神沉郁、拉稀、呈急性發(fā)病死亡為特征的病例。對該病例進(jìn)行了病原分離與鑒定，并對分離株進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)。結(jié)果表明，該分離株在菌落形態(tài)、染色特性及生化特性上與大腸埃希氏菌相符，故將該分離株鑒定為鵝大腸埃希氏菌。對氟苯尼考、頭孢噻肟、慶大霉素等26種抗菌藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，該分離株對甲氧芐啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物耐藥。

關(guān)鍵詞：鵝大腸桿菌病；分離鑒定；藥敏試驗(yàn)

中圖分類號：S858.33文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B 文章編號：1007-273X（2014）03-0020-02

鵝大腸桿菌?。℅oose E.coli disease， GED）是由鵝致病性大腸埃希氏菌所引起的局部或全身性感染的細(xì)菌性疾病，俗稱“蛋子瘟”，臨床上主要表現(xiàn)為敗血癥，腹膜炎，纖維素性氣囊炎，肝周炎，心包炎，腫頭綜合癥及輸卵管炎等類型，各種年齡的鵝均可感染，以雛鵝多發(fā)，感染率達(dá)5%～30%，病死率可達(dá)90%以上，正在成為危害養(yǎng)鵝業(yè)的主要疫病之一[1～3]，近年來，隨著抗菌藥物的大量應(yīng)用，鵝大腸桿菌耐藥菌株不斷出現(xiàn)，使鵝大腸桿菌病的防治難度進(jìn)一步加大[4，5]。本試驗(yàn)對一起郎德鵝大腸桿菌病進(jìn)行病原的分離與鑒定，并對分離株進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，依據(jù)試驗(yàn)結(jié)果對該起鵝大腸桿菌病進(jìn)行了有效的防治。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)樣品

2012年2月底，重慶市萬州區(qū)某郎德鵝場有4 300多只鵝發(fā)生了以精神沉郁、拉稀、呈急性發(fā)病死亡為特征的病例。該鵝場共飼養(yǎng)4 300多只鵝，從青年鵝至雛鵝分為4批，每群有1 000余只鵝，青年鵝首先發(fā)病，其余3批隨后也發(fā)病，7d內(nèi)共死亡650只。病鵝主要表現(xiàn)精神萎靡不振，羽毛雜亂蓬松，俯臥在地，不愿走動(dòng)，打盹，下痢，糞便稀、呈綠白色，病程短，一般發(fā)病至死亡不超過24 h。剖檢約有70%呈敗血癥狀，廣泛性出血，腹腔有大量黃色干酪樣物質(zhì)；心包炎、肝周炎及氣囊炎；心臟腫大、心包積液及心肌出血；腸道黏膜脫落，出血，壞死。無菌采集發(fā)病鵝的心包積液及典型病變組織。

1.2 材料

麥康凱培養(yǎng)基、普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、肉湯培養(yǎng)基、生化鑒定管及藥敏紙片均購自杭州微生物制劑有限公司。

1.3 方法

1.3.1 細(xì)菌的分離及形態(tài)學(xué)觀察 無菌采集具有典型發(fā)病鵝病變組織及心包積液，接種于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h，觀察細(xì)菌生長情況。然后挑取單個(gè)菌落接種于麥康凱瓊脂平板，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h，挑取紅色單菌落進(jìn)行涂片、革蘭氏染色及鏡檢[6]。

1.3.2 生化試驗(yàn) 挑取革蘭陰性短桿菌的紅色單菌落于普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行純培養(yǎng)后，按說明書接種于糖發(fā)酵試驗(yàn)、尿素酶試驗(yàn)、檸檬酸鹽試驗(yàn)、靛基質(zhì)MR試驗(yàn)、VP試驗(yàn)、硫化氫（H2S）試驗(yàn)等生化鑒定管，37℃恒溫培養(yǎng)18 ～ 24 h h。

1.3.3 藥敏試驗(yàn) 取純培養(yǎng)獲得的單菌落接種于肉湯培養(yǎng)基，37 ℃振蕩培養(yǎng)，按照參考文獻(xiàn)[7]方法進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。按參考文獻(xiàn)[8]方法判定抗菌藥物敏感程度：抑菌圈最小直徑≥20mm為高度敏感，抑菌圈最小直徑≤10mm為低度敏感，抑菌圈最小直徑在10～20mm者為中度敏感，無菌環(huán)出現(xiàn)者為耐藥。

2 結(jié)果與分析

2.1分離鑒定結(jié)果

在普通瓊脂培養(yǎng)基上呈灰白色、圓形、中間稍隆起、邊緣光滑濕潤；在麥康凱瓊脂培養(yǎng)基上呈磚紅色、圓形隆起、光滑濕潤及邊緣整齊菌落；分離菌株革蘭氏染色鏡檢均為中等大小、兩端鈍圓的革蘭氏陰性桿菌，該分離菌株與大腸桿菌染色特性相符。

2.2生化鑒定結(jié)果

分離菌株能發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、乳糖、甘露醇、蔗糖。青定基質(zhì)試驗(yàn)陽性、MR試驗(yàn)陽性；H2S試驗(yàn)陰性、VP試驗(yàn)陰性；枸櫞酸鹽試驗(yàn)為陰性；尿素酶試驗(yàn)為陰性。根據(jù)生化鑒定結(jié)果，根據(jù)《伯杰氏細(xì)菌鑒定手冊（第八版）》，該分離菌株符合大腸桿菌特征。

2.3藥敏試驗(yàn)結(jié)果

選取氟苯尼考、頭孢噻肟、慶大霉素、丁胺卡那霉素、菌必治、先鋒霉素、四環(huán)素、氟哌酸等26種抗菌藥物藥敏紙片對郎德鵝大腸桿菌進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)，其中氟苯尼考、頭孢噻肟、菌必治等10種抗菌藥物為高敏；慶大霉素、紅霉素、妥布霉素、恩諾沙星等6種抗菌藥物為中敏；磺胺異惡唑?yàn)榈投让舾?；甲氧芐啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物為耐藥（表1）。

3 防治措施

加強(qiáng)飼養(yǎng)管理和日常消毒工作，保持鵝舍清潔衛(wèi)生、保證鵝舍通風(fēng)良好；做好鵝飲用水、游泳池水源的消毒及定時(shí)更換；及時(shí)隔離發(fā)病鵝，淘汰久治不愈的鵝只。根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用敏感藥物進(jìn)行治療和預(yù)防：發(fā)病鵝群用氟苯尼考飲水，同時(shí)添加維生素C，連用5d，停2d，后用頭孢噻肟飲水，用藥5d。對未發(fā)病鵝群使用多價(jià)大腸桿菌苗進(jìn)行緊急免疫接種。該鵝場按照以上方法進(jìn)行防治后，有效的控制了疫情，在用藥后的第三天鵝群死亡率明顯下降，兩個(gè)療程的用藥后，鵝群無新發(fā)病例和死亡。

4討論

大腸桿菌病是禽類的常見病，一些種鵝場發(fā)生的大腸桿菌病較為嚴(yán)重，近年來，隨著抗菌藥物的大量應(yīng)用，耐藥菌株不斷出現(xiàn)，使鵝大腸桿菌病的防治難度進(jìn)一步加大。

該郎德鵝場最近幾年頻發(fā)以拉稀為主、全身敗血癥狀、急性發(fā)病死亡及高死亡率為特征的病例。此次發(fā)病通過病原分類與鑒定，確診為鵝大腸桿菌病，分析該鵝場常年發(fā)生大腸桿菌病的原因，平時(shí)的飼養(yǎng)管理不合理是主因，鵝飼養(yǎng)密度過大，鵝舍清潔衛(wèi)生不徹底，水池的消毒及定時(shí)更換不到位，促使該場環(huán)境中常年帶菌，故鵝群易因應(yīng)激因素反復(fù)感染大腸桿菌。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明該場大腸桿菌對胺異惡唑?yàn)榈投让舾?；甲氧芐啶、青霉素、利福平等9種抗菌藥物為耐藥，該養(yǎng)殖戶存在超劑量用藥、換藥過于頻繁、常年使用同種藥物等濫用抗菌藥物的現(xiàn)象，且對鵝場發(fā)病后的終末消毒及預(yù)防性消毒措施不到位，使鵝群長期帶菌。

對于鵝大腸桿菌病的防治，除使用多價(jià)大腸桿菌疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防接種外；還應(yīng)采取加強(qiáng)日常飼養(yǎng)管理和水源衛(wèi)生，提高飼料品質(zhì)，強(qiáng)化環(huán)境衛(wèi)生消毒，臨床上要做好合理選藥、聯(lián)合用藥、穿梭用藥及輪換用藥；改變不良用藥習(xí)慣，根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選用高敏藥物進(jìn)行治療。

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