中藥補(bǔ)腦止散對(duì)戊四氮致大鼠海馬谷氨酸和氨酪酸含量的影響及抗機(jī)制

龔惠娥

龔惠娥

目的 通過使用中藥補(bǔ)腦止散，研究采用戊四氮致大鼠海馬谷氨酸（Glu）和氨酪酸（GABA）含量的變化，從而探討中藥補(bǔ)腦止散治療癲的作用機(jī)制。方法 將90只正常大鼠隨機(jī)抽取15只作為空白對(duì)照組，剩余75只大鼠腹腔注射戊四氮制作癲點(diǎn)燃模型，從造模成功的大鼠中隨機(jī)選取50只分為模型組、丙戊酸鈉組、中藥補(bǔ)腦止散大劑量組、中劑量組和小劑量組，每組10只。給藥7d和15d后分別處死各組一半實(shí)驗(yàn)大鼠，取其海馬切片，檢測(cè)切片中Glu和GABA含量。結(jié)果 與模型組相比，中、大劑量組和小劑量組海馬神經(jīng)元Glu含量均顯著降低，GABA含量有明顯的升高。結(jié)論 中藥補(bǔ)腦止散能對(duì)戊四氮慢性點(diǎn)燃癲大鼠中海馬中Glu和GABA含量進(jìn)行調(diào)節(jié)，提高GABA含量，降低Clu含量，達(dá)到治療癲的作用。

癲；中藥；補(bǔ)腦止散；谷氨酸；氨酪酸

1 材料與方法

1.1 材料 選取健康成年SD大鼠90只，雄性，質(zhì)量（200±12）g，一般條件飼養(yǎng)。所有大鼠體重、飼養(yǎng)條件等一般狀況無顯著差異，具有可比性。

1.3 方法

1.3.1 建模方法 每天上午給予大鼠腹腔注射戊四氮（PTZ）35mg/kg，注射后觀察大鼠行為變化60min[3]。根據(jù)Racine分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)，其將大鼠行為分為6級(jí)[4]。若大鼠連續(xù)5d出現(xiàn)4級(jí)以上發(fā)作定義為模型點(diǎn)燃成功。將90只大鼠編號(hào)，隨機(jī)抽取15只作為空白對(duì)照組，剩余75只大鼠腹腔注射戊四氮制作癲點(diǎn)燃模型，從造模成功的大鼠中隨機(jī)選取50只分為五組，每組10只，即模型組、丙戊酸鈉組、中藥補(bǔ)腦止散大劑量組（以下稱大劑量組）、中藥補(bǔ)腦止散中劑量組（以下稱中劑量組）和中藥補(bǔ)腦止散小劑量組（以下稱小劑量組），建模選取的50只大鼠病情狀況差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。灌胃治療劑量按體表面積比進(jìn)行折算，折算后中藥補(bǔ)腦止散大、中、小劑量組分別給予1.6g/kg、0.8g/kg和0.4g/kg灌胃治療[5-6]。丙戊酸鈉組大鼠給予丙戊酸鈉等效劑量15.75mg/kg，空白對(duì)照組和模型組大鼠灌服等體積0.9%氯化鈉注射液，每天用藥一次，連續(xù)治療30d。

1.3.2 標(biāo)本采集 灌胃治療7d后，將六組各取一半大鼠給予麻醉，然后開胸暴露心臟，先對(duì)大鼠實(shí)施灌注后開顱取腦，然后將其固定，切取海馬段腦組織，最后進(jìn)行石蠟包埋，切片[7]。封片后在高倍鏡下觀察并拍照進(jìn)行分析，計(jì)算GABA和Glu陽性神經(jīng)元的平均灰度值，并記錄數(shù)據(jù)[8]。同樣方法在灌胃15d后將各組剩余大鼠用上述方法獲取GABA和Glu陽性神經(jīng)元的平均灰度值，并記錄數(shù)據(jù)。

1.4 觀察指標(biāo) 對(duì)大鼠海馬谷氨酸（Glu）和氨酪酸（GABA）含量進(jìn)行觀察計(jì)算。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 選擇SPSS 18.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，數(shù)據(jù)采用±s表示，均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，當(dāng)P＜0.05時(shí)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

表1 第1、7、15天各組發(fā)作等級(jí)及頻率比較

2.2 Glu和GABA含量變化 在鏡下觀察及運(yùn)用圖像分析技術(shù)，對(duì)GABA和Glu陽性神經(jīng)元的平均灰度值進(jìn)行了記錄，分析可知，中、大劑量組與丙戊酸鈉組的Glu和GABA含量比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；大、中、小劑量組海馬神經(jīng)元Glu含量和GABA含量與模型組相比分別顯著降低和明顯升高，且大、中劑量組的變化幅度明顯大于小劑量組的變化幅度，見表2。

表2 第7、15天大鼠海馬Glu陽性細(xì)胞GABA陽性細(xì)胞平均灰度值(±s)

表2 第7、15天大鼠海馬Glu陽性細(xì)胞GABA陽性細(xì)胞平均灰度值(±s)

注：第7天大劑量組與模型組Glu含量相比t=4.9296，P=0.0012；大劑量組與模型組Glu含量相比t=8.3018，P＜0.01。第5天大劑量組與模型組Glu含量相比t=5.4627，P=0.0006；大劑量組與模型組Glu含量相比t=20.5498，P＜0.01

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3 討論

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[3] 張慧敏.經(jīng)皮三叉神經(jīng)電刺激預(yù)處理對(duì)戊四氮致癇大鼠海馬谷氨酸脫羧酶表達(dá)的影響[J].安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2011,46(8):732-736.

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R285.5

A

1673-5846(2014)06-0032-03

長(zhǎng)沙市第一醫(yī)院藥劑科，湖南長(zhǎng)沙 410005

龔惠娥（1975-），本科學(xué)歷，副主任中藥師。研究方向：藥事管理。Tel：15273152098，E-mail：275271941@qq.com