規模化豬場豬瘟免疫效果評估及綜合防治措施

張 棟 李云崗 蘭鄒然 胡麗萍 馬慧玲 楚遵鋒（山東省動物疫病預防與控制中心 山東 濟南 250022）

規模化豬場豬瘟免疫效果評估及綜合防治措施

張 棟 李云崗 蘭鄒然 胡麗萍 馬慧玲 楚遵鋒（山東省動物疫病預防與控制中心 山東 濟南 250022）

為摸清部分規模養豬場的健康情況和豬瘟抗體水平，利用IDEXX公司的豬瘟抗體檢測試劑盒，對2014年1～6月份山東省8個規模化豬場2580份免疫血清進行了抗體水平檢測，結果顯示抗體陽性率為39.2%～94.7%不等，說明所監測的山東部分地區豬瘟免疫水平參差不齊，部分豬場免疫效果較差，未達到良好的保護率。結合豬瘟免疫效果評估結果，探討豬瘟綜合防治措施。

規模化豬場 豬瘟 抗體 防治措施

豬瘟是由豬瘟病毒引起的一種急性或慢性、熱性和高度接觸性傳染病，臨床主要以高熱稽留、皮膚和黏膜出現大量出血點為特征[1]，是嚴重危害全球養豬業的重要傳染病，且是我國中長期動物疫病控制規劃中計劃要消滅的重大動物疫病之一[2]，該病流行廣泛，發病率和死亡率高。但是隨著我國強制免疫政策的持續推進，近年來，豬瘟在我國的流行規律已經發生了較大變化，由過去的大規模流行逐漸轉變為無規律性的散發和小規模的地方性流行，且持續性感染病例報道較常見。

豬瘟抗體水平的高低直接反映了豬群免疫接種效果，同時也反映出豬群免疫系統的健康程度以及飼養管理情況，是豬群抵抗豬瘟病毒入侵的關鍵因素。而目前豬瘟危害又嚴重制約著規模化豬場的發展，因此豬瘟免疫效果評估在規模化豬場的應用具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清 2014年1月～6月來自山東省不同地區8個豬場的共2580份血清，這些豬群臨床上均表現正常，無明顯發病癥狀。

1.1.2 試劑 豬瘟抗體檢測ELISA試劑盒，購自IDEXX公司。

1.2 方法

1.2.1 豬瘟抗體的檢測 在使用前，所有的試劑盒組分都必須平衡到室溫(18～25℃)。試劑應通過輕輕漩渦，旋轉混合均勻。（1）分別將50μl樣品稀釋液加入每個檢測孔和對照孔中。（2）分別將50μl的陽性對照加入到相應的對照孔中，注意不同對照的吸頭需要更換。（3）分別將50μl的被檢樣品加入到剩下的檢測孔中，注意每個樣本都使用不同吸頭。（4）輕彈微量反應板或用振蕩器震蕩，將反應板中的溶液混勻。（5）在室溫下(18～25℃)孵育2h或過夜孵育12～18h。無論選擇哪種孵育方式，都要將微量反應板用封條封閉或于濕箱中室溫孵育，避免液體揮發。（6）用300μl左右的洗滌液洗滌每個板孔3次。在每1次洗滌后，甩去每個板孔中的液體，在最后一次甩掉后，在吸水材料上用力扣板，吸去剩余的液體。在加入下一個試劑前，避免孔壁變干。（7）加入100μl辣根過氧化物酶標記(HRPO)的抗豬瘟病毒的酶標抗體(即取即用)加入反應孔中，用封條封閉或濕盒中室溫下孵育30min。（8）重復步驟6。（9）每個反應空中加入100μl的底物溶液到反應孔中，并于避光、室溫條件下放置10min。加完第一孔后即可計時。（10）在每個反應孔中加入100μl的終止液終止反應。加終止液的順序同步驟9，與底物的加入順序相同。（11）在450nm處測定樣本以及對照的吸光度值，也可用雙波長(450nm和650nm)測定樣本以及對照的吸光度值，空氣調零。

1.2.2 計算與判斷 計算樣本和對照的平均吸光度值(計算方法如下）。陰性對照平均值：NCX=(NC1 A450+NC2 A450)/2；陽性對照平均值：PCX=(PC1 A450 +PC2 A450)/2；樣本的計算：Blocking%=(NCX-sample A450)/ NCX×100%。只有陰性對照的平均OD450大于0.500，陽性對照的阻斷率大于50%，該檢測結果才能有效。若實驗不成立，有可能是實驗操作失誤造成，應重讀說明書，再操作一次。如果被檢樣品的阻斷率大于或等于40%，該樣品可判為陽性(有CSFV抗體存在)；如果被檢樣本的阻斷率小于或等于30%，該樣本可判為陰性(無CSFV抗體存在)；如果被檢樣本的阻斷率在30%～40%之間，該樣本可判為可疑，應在數日后再對該動物進行重測。

2 結果與分析

2.1 結果

8個規模豬場的豬瘟抗體檢測結果和2014年1～6月份每月所檢測的豬瘟抗體結果見表1和表2。

2.2 分析

從表1、表2可以看出，山東省不同地區的8個免疫豬場中在豬瘟弱毒苗免疫之后的抗體水平參差不齊，其中抗體陽性率最高的為94.7%，最低的僅為39.2%；同時，從每個月份所檢測的豬瘟抗體結果來看，陽性率最高的為80.5%，最低的為50.1%，說明山東地區豬瘟免疫抗體水平不一致，部分免疫豬群免疫效果較差，豬群存在免疫失敗現象，需要引起重視，做好豬場豬瘟免疫程序的調整和豬瘟疫苗的補免工作。

表1 8個規模豬場的豬瘟抗體檢測結果

表2 2014年1～6月份每月所檢豬瘟抗體結果

通過本次豬瘟監測，可以看出山東部分地區豬群豬瘟免疫狀況參差不齊，部分豬場豬瘟免疫水平較低，存在豬瘟免疫失敗現象，因此，豬瘟仍然是當前需要重點防范的豬傳染病，加強種豬場監管和監測力度[3]尤為重要，在種豬調運時應重視豬瘟的檢疫監測，防止豬瘟帶毒豬和免疫水平低下的豬只外調，有效控制豬瘟病毒的傳播和豬瘟疫情的發生，養豬場應對豬瘟免疫效果定期進行評估，根據免疫抗體的實際水平，確定免疫時間，以實現科學免疫[4]。

3 綜合防治措施

3.1 加強豬場飼養管理

豬場管理要盡量做到科學化、規范化，及時清糞，搞好豬舍環境衛生，定期消毒，最大限度地減少病原微生物對豬場的污染，防止疫病的擴大傳播。同時應降低各種應激因素對豬群的影響，以避免應激給豬瘟的發生帶來有利條件。

3.2 實行“全進全出”的飼養制度

豬場要堅持采用“自繁自養、全進全出”的原則，同時要避免不同日齡和不同生長階段的豬只混群飼養，以減少交叉感染和持續性感染的發生[5]。

3.3 做好免疫程序，加強疫病監測

制定科學、合理的免疫程序，是豬場預防疾病最基本也是最重要的手段。同時要加強對豬瘟抗原抗體的監測，以了解豬瘟群體的免疫水平高低和抗體水平的整齊度，進而評估疫苗的免疫效果和輔助診斷。檢出CSFV陽性豬(帶豬瘟病毒豬)，應立即淘汰，清圈消毒，最大限度地降低環境中的豬瘟病毒對豬群的潛在威脅。

3.4 保健預防性投藥

有選擇性地使用對免疫有促進作用的藥物或添加劑(黃芪多糖粉劑、荊防敗毒散等)，提高豬群的非特異性抗病力。

3.5 豬場疫病凈化

加強以種公、母豬及后備種豬為主的凈化措施，及時淘汰帶毒種豬，鏟除持續感染的根源，建立健康種群，繁育健康后代[6]。

3.6 疾病要早發現，早防治

加強對其他疫病的協同防制，如確診有其他疫病存在，則還需同時采取其他疫病的綜合防制措施。

3.7 建立健全生物安全體系

建立獸醫衛生防疫與消毒制度，嚴格控制傳染源，病死豬及產出的死胎、胎衣等，應深埋做無害化處理[7]。

[1] 陳溥言, 王川慶. 獸醫傳染病學(第5版)[M]. 北京∶ 中國農業出版社, 2006∶ 210-216.

[2] Barbara E. straw. 豬病學(第9版)[M]. 趙德明等, 譯. 北京∶ 中國農業大學出版社, 2008∶ 325-331.

[3] 謝移權, 李進鋒. 規模化豬場豬瘟抗體水平監測的應用[J]. 中國畜禽種業[J]. 2011(4)∶ 21-22.

[4] 蘇晨, 李香, 趙仙苗等. 陜西省重大動物疫病秋防免疫抗體的檢測與分析[J]. 畜禽業. 2011(4)∶ 24-25.

[5] 萬遂如. 對豬瘟危害的再認識與防控對策[J]. 養豬. 2008(1)∶ 41-44.

[6] 張宗軍, 楊瑛, 孫偉. 慢型及非典型豬瘟污染豬場的凈化方法[J].畜牧與獸醫, 2003(3)∶ 30-31.

[7] 侯明權. 完善防治措施, 有效控制豬瘟[J]. 生豬產銷信息. 2011(2)∶58.

S851.33

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1007-1733(2014)11-0011-02

2014–08–04）