甲醛溶液對雞大腸桿菌滅活效果的影響

于國營等

摘要：為了優化雞大腸桿菌疫苗制造過程中的滅活工藝，對甲醛溶液的使用濃度、滅活時間進行了比較，同時選用不同生產廠家的甲醛溶液進行了滅活比較試驗。結果表明，對于濃度較高的雞大腸桿菌菌液，采用37 ℃攪拌滅活，甲醛溶液的終濃度越高，滅活時間越短，滅活效果就越明顯；但同時也存在著甲醛溶液的終濃度越高，用滅活徹底的菌液所制備疫苗的副反應就越大。不同生產廠家的甲醛溶液滅活效果無明顯差異。

關鍵詞：甲醛溶液；雞大腸桿菌；滅活工藝

中圖分類號：S858.31 文獻標識碼：A 文章編號：1007-273X（2014）02-0010-03

甲醛溶液是目前滅活疫苗生產中應用最廣泛的滅活劑，成熟的滅活工藝能夠保證研制工作的順利開展和細菌滅活疫苗的生物安全。為了優化雞大腸桿菌疫苗制造過程中的滅活工藝，對甲醛溶液的使用濃度、滅活時間進行了比較，同時也對不同廠家生產的甲醛溶液進行了滅活比較試驗。

1 材料

1.1 大腸桿菌菌種

O1株、O2株、O78株均由青島易邦生物工程有限公司提供。

1.2 培養基

LB液體培養基。

1.3 菌液

分別制備O1株、O2株、O78株菌液各2批（201101批和201102批菌液的活菌含量均不低于1.2×1010CFU/mL）。

1.4 試驗雞

21～28日齡SPF雞均購自北京某SPF雞場。

1.5 滅活劑

上海國藥集團化學試劑有限公司生產的甲醛，批號為2011304。濟南魯康化學工業有限公司生產的甲醛，批號為110713。

2 試驗設計

2.1 甲醛溶液滅活濃度和滅活時間的選擇

分別量取201101批O1株、O2株、O78株菌液3份，分別按終濃度為0.1%、0.2%、0.3%、0.4%分別加入上海國藥生產的化學純甲醛溶液，分別置于37 ℃滅活8、12、16、20、24、36 h。……