EDTA—K₂抗凝劑導(dǎo)致血小板假性減少

劉忠芳

【摘要】 目的 針對(duì)EDTA-K2抗凝劑導(dǎo)致血小板減少現(xiàn)象進(jìn)行分析及探究。方法 從過去一年間在我院接受檢測(cè)體檢和住院的患者中，發(fā)現(xiàn)血小板聚集導(dǎo)致血小板假性減少并最終確認(rèn)為PTCP者共82例，設(shè)為本次研究的試驗(yàn)組。另在體檢者中選擇20名健康者，設(shè)為本次研究的對(duì)照組。對(duì)試驗(yàn)組82例PTCP者使用EDTA-K2、枸櫞酸鈉因此抗凝重新抽血送檢；對(duì)對(duì)照組20名健康者依次使用EDTA-K2、枸櫞酸鈉抗凝采靜脈血，分析兩組的血小板計(jì)數(shù)變化情況。結(jié)果 試驗(yàn)組82名患者EDTA-K2抗凝血15min血小板計(jì)數(shù)結(jié)果明顯低于枸櫞酸鈉抗凝和顯微鏡計(jì)數(shù)結(jié)果（P<0.001）；1h及以后更低；對(duì)照組EDTA-K2抗凝結(jié)果和枸櫞酸鈉抗凝15min以內(nèi)計(jì)數(shù)結(jié)果比較差異。結(jié)論 EDTA-K2對(duì)血小板可產(chǎn)生聚集作用，引起PTCP。在一定條件下，用枸櫞酸鈉替代EDTA-K2抗凝靜脈血做血小板計(jì)數(shù)或采末梢血用草酸胺稀釋液顯微鏡人工計(jì)數(shù)，可以糾正PTCP。

【關(guān)鍵詞】 血小板假性減少；EDTA-K2；枸櫞酸鈉

文章編號(hào)：1004-7484（2014）-06-3101-02

血小板不僅在機(jī)體止血和凝血方面發(fā)揮重要作用，近年來研究表明，其相關(guān)參數(shù)的變化還和某些疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，對(duì)疾病診療及預(yù)后評(píng)估意義重大。本文我們將選擇本院所收治的82例PTCP者作為研究對(duì)象，以探討選擇科學(xué)的方法排除干擾，保證血小板計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 試驗(yàn)組 從過去一年間在我院接受檢測(cè)體檢和住院的患者中，發(fā)現(xiàn)血小板聚集導(dǎo)致血小板假性減少并最終確認(rèn)為PTCP者共82例。包括男性35例，女性47例，年齡15-76歲，平均（45.5±18.3）歲。

1.1.2 對(duì)照組 在體檢者中選擇20名健康者，排除心、肝、肺、腎、腦等重要臟器及免疫性疾病，血小板直方圖正常。年齡20-68歲，平均（42.5±16.2）歲。

1.2 儀器與材料 Sysmex-XT1800i血細(xì)胞分析儀及配套試劑；Olympus雙目顯微鏡；抗凝劑為EDTA-K2、109mmol/L枸櫞酸鈉；草酸胺血小板稀釋液；瑞-姬染色液。

1.3 檢測(cè)與分析 參照國(guó)際自動(dòng)CBC和DC復(fù)檢規(guī)則與血小板直方圖，對(duì)血小板低于70×109/L可疑樣本推片，發(fā)現(xiàn)血小板聚集者，確定為假性血小板減少。排除采血因素及其他原因干擾，對(duì)試驗(yàn)組82例PTCP用EDTA-K2、枸櫞酸鈉分別抗凝重新抽血送檢，EDTA-K2抗凝管在15min、1h及2h，枸櫞酸鈉抗管凝在15min以內(nèi)分別用血細(xì)胞分析儀檢測(cè)；并同時(shí)采末梢血加入草酸胺稀釋液顯微鏡人工計(jì)數(shù)。EDTA-K2、枸櫞酸鈉抗凝血每份標(biāo)本涂血片經(jīng)瑞-姬染色觀察血小板分布情況。對(duì)照組分別用枸櫞酸鈉、EDTA-K2抗凝抽血，在即刻（0min）、5min、15min、30min、60min上機(jī)血小板計(jì)數(shù)。所有數(shù)據(jù)為兩次計(jì)數(shù)均值。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.0軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（χ±s）表示，組間比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 試驗(yàn)組EDTA-K2、枸櫞酸鈉抗凝及顯微鏡計(jì)數(shù)結(jié)果比較 EDTA-K2抗凝15min血小板計(jì)數(shù)結(jié)果明顯低于枸櫞酸鈉抗凝和顯微鏡計(jì)數(shù)結(jié)果（EDTA-K2管與枸櫞酸鈉管比較：t=7.142，P<0.01；EDTA-K2管與顯微鏡計(jì)數(shù)結(jié)果比較：t=7.190，P<0.01）；1h及以后結(jié)果更低。枸櫞酸鈉抗凝和顯微鏡計(jì)數(shù)結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=1.646，P=0.103）。

2.2 對(duì)照組血小板計(jì)數(shù)結(jié)果 20例健康體檢者EDTA-K2抗凝和枸櫞酸鈉抗凝血小板在15min以內(nèi)計(jì)數(shù)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），30min及以后結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。EDTA-K2抗凝標(biāo)本0min與60min檢測(cè)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)意義（t=0.857，P=0.402），說明枸櫞酸鈉抗凝血血小板在15min以后不穩(wěn)定逐漸降低，EDTA-K2抗凝標(biāo)本血小板穩(wěn)定。

2.3 血涂片鏡檢情況 PTCP組EDTA-K2抗凝標(biāo)本血涂片在鏡下可見大量血小聚集或衛(wèi)星現(xiàn)象，隨時(shí)間延長(zhǎng)聚集加劇，部分成團(tuán)狀。對(duì)照組EDTA-K2抗凝標(biāo)本和15min以內(nèi)枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本血小板散在均勻分布，30min時(shí)枸櫞酸鈉抗凝標(biāo)本有微聚集表現(xiàn)，60min時(shí)可見聚集明顯增加。

3 討 論

在實(shí)際工作中，由于血細(xì)胞分析國(guó)內(nèi)普遍使用EDTA-K2抗凝靜脈血上機(jī)檢測(cè)，如未對(duì)PTCP引起足夠重視，對(duì)血小板減低病例，如顯微鏡人工計(jì)數(shù)復(fù)查仍用原標(biāo)本稀釋，對(duì)PTCP患者會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤報(bào)告。血液分析儀中非白細(xì)胞域異常散點(diǎn)圖對(duì)檢出PTCP敏感性為100%，特異性為95.9%，出現(xiàn)血小板聚集警示信息對(duì)檢出PTCP敏感性為92.6%，特異性為97.6%。但由于血細(xì)胞分析儀型號(hào)差異，檢測(cè)血小板原理各不相同，實(shí)際工作中可能提示信息的反應(yīng)也不一致。張偉紅等研究表明抽血后放置1h內(nèi)加入6.5mg/ml丁胺卡那霉素，能抑制患者血小板膜表面CD62p、PAC-1和IgG的表達(dá)，有效解離EDTA抗凝劑依賴性血小板凝集，且不影響其他血細(xì)胞的計(jì)數(shù)，有助于解決EDTA所致的血小板計(jì)數(shù)的假性減少。也有文獻(xiàn)報(bào)道用肝素鈉抗凝對(duì)PTCP患者在抽血后15min以內(nèi)進(jìn)行復(fù)查，也可獲得準(zhǔn)確結(jié)果。

我們的實(shí)驗(yàn)表明，雖然枸櫞酸鈉抗凝血血小板在15min以后其穩(wěn)定性逐漸降低，但在15min內(nèi)檢測(cè)結(jié)果是可靠的，只要掌握好時(shí)間可以消除血小板聚集的影響，該方法適用于住院病例的復(fù)查。對(duì)于門診患者，采用末梢血草酸胺稀釋液顯微鏡計(jì)數(shù)，雖然精密度不如血細(xì)胞分析儀，但對(duì)于異常結(jié)果的復(fù)檢仍不失為一種簡(jiǎn)單有效的方法。

參考文獻(xiàn)

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