6—BA濃度對桔梗胚珠愈傷組織分化率的影響

徐芳芳　趙麗莉　荀洋等

摘要[目的]研究6BA濃度對桔梗胚珠愈傷組織分化率的影響。[方法]以桔梗未受精胚珠為外植體，利用N6+1.0 mg/L 2，4D+01 mg/L KT培養基誘導出的愈傷組織作為接種材料，分別接在0.5 mg/L NAA與不同6BA濃度的分化培養基上，對其愈傷組織分化率進行研究。[結果]6BA濃度在0.25、1.25和1.00 mg/L（即3種分化培養基為N6+0.5 mg/L NAA+0.25 mg/L 6BA、N6+0.5 mg/L NAA+1.25 mg/L 6BA、N6 +0.5 mg/L NAA + 1.00 mg/L 6BA）時的分化率高，分別為88.3%、85.0%和80.0%。[結論]6BA濃度為0.25 mg/L 時有利于桔梗未受精胚珠愈傷組織的分化。

關鍵詞桔梗；胚珠；愈傷組織；分化率； 6BA

中圖分類號S682.1+9文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）09-02552-02

作者簡介徐芳芳（1989- ），女，吉林白城人，碩士研究生，研究方向：作物遺傳育種。*通訊作者，副教授，博士，從事中藥材桔梗的栽培和育種方面的研究。

桔梗[Platycodon grandiflorum（Jacq.） A.DC.]為桔梗科桔梗屬（Platycodon）多年生直立草本植物，別名道拉基、綠花根、鈴鐺花、四葉菜等。桔梗既是一種資源植物又是一種藥、食、觀賞兼用的經濟植物[1]。近年來，國內外市場對桔梗的需求量急增，導致價格上漲，由此也推動了桔梗生產的發展。但是目前，桔梗生產中存在的主要問題是質量上不去，造成上等品緊缺，次等品積壓。造成這種局面的主要原因是品種混亂和種子質量低劣等。

桔梗是異花授粉植物，主要進行有性繁殖，自然界中和生產上推廣的桔梗是混雜的群體，到目前為止還沒有純系，這嚴重影響著桔梗遺傳規律的研究和雜種優勢的利用。而通過花藥培養和胚珠培養獲得單倍體，采用秋水仙素進行染色體加倍的途徑可以培育出桔梗純系，可為今后桔梗自交系的培育提供理論依據和試驗材料。

以桔梗種子萌發的無菌苗葉片、莖段和莖尖為外植體進行組織培養已有報道[2-3]，但以桔梗未受精胚珠作為外植體誘導組培苗的研究報道卻很少見。筆者以未受精桔梗胚珠為試驗材料，N6作為基本培養基，以1.0 mg/L 2，4D + 0.1 mg/L KT為誘導培養基誘導出的愈傷組織作為分化培養的接種材料，將其分別接在添加0.5 mg/L NAA與不同6BA濃度組合的分化培養基中，以篩選出適于桔梗胚珠愈傷組織的分化培養基，從而為今后桔梗未受精胚珠組織培養研究提供依據。

1材料與方法

1.1材料誘導培養基是以N6作為基本培養基，添加1.0 mg/L 2，4D + 0.1 mg/L KT；瓊脂為7 g/L，蔗糖為50 g/L，pH值為5.8。取單核胚囊期[4]（1.7 cm左右的花蕾）的胚珠消毒，將消毒好的花蕾用解剖刀剖離，取出胚珠接到誘導培養基上，在溫度為25 ℃，12～14 h光照條件下培養40 d，以此愈傷組織作為分化培養的接種材料。

1.2分化培養基的配方分化培養基以N6為基本培養基，生長素為0.5 mg/L NAA，細胞分裂素為不同濃度的6BA，8種組合如表1所示。各組培養基加入瓊脂為7 g/L，蔗糖為50 g/L，pH值為5.8。

1.3接種方法將誘導出的愈傷組織分別接在添加0.5 mg/L NAA與不同6BA濃度組合的8種培養基上，每種處理設置3次重復，每次重復接種10塊愈傷組織，50 d后統計分化出苗的愈傷組織塊數，并計算分化率。分化率（%）= 長出幼苗的愈傷組織塊數/接種愈傷組織塊數×100。

2結果與分析

2.1不同6BA濃度處理下的愈傷組織分化率對8組處理數據進行方差分析，結果表明重復間F值是0.095，差異不顯著（P>0.05）。處理間F值為31.638，大于F0.05和F0.01，說明各個處理間存在極顯著差異（P<0.01）。

為比較不同6BA濃度對桔梗胚珠愈傷組織分化率的影響，采用新復極差法（LSR）進行多重比較，結果見表3。無論在5%和1%顯著水平上，處理1、5、4之間差異不顯著（P>0.05）。它們的分化率分別為88.3%、85.0%和80.0%。處理6除了與處理3、7之間差異不顯著外（P>0.05），與其他處理均差異顯著（P<0.05），其分化率為65.0%。最低的是處理8，其分化率僅為35.0%，且顯著小于其他所有處理（P<0.05）。

參考文獻

[1] 高文遠，李志亮，肖培根.桔梗現代研究進展[J].基層中藥雜志，1996，10（2）：48-50.

[2] 吳京姬，吳基日，嚴一字，等.培養基組成對桔梗組織培養的影響[J].延邊大學農學學報，2006，28（1）：18-23.

[3] 舒孌，高山林.桔梗的組織培養[J].植物資源與環境學報，2001，10（3）：63-64.

[4] 張美萍.桔梗（Platycodon grandiflornm A.DC）胚胎學研究[J].吉林農業大學學報，1992，14（2）：25-30.

[5] 武沖，唐樹梅，張勇，等.植物花粉培養研究進展[J].農業基礎科學，2008，24（11）：146-149.

[6] 王桂梅，賀美忠，楊富.桔梗組織培養技術的研究[J].安徽農學通報，2012，18（7）：70-71.