北疆地區4個規模化白羽肉雞養殖場H9亞型禽流感血清抗體監測

齊向濤 許 追 歐 都 許丹丹 楊 莉 齊亞銀 （新疆石河子大學動物科技學院 新疆 石河子 832000)

H9亞型屬于低致病性禽流感病毒,主要侵害雞的呼吸系統,如果肉禽飼養場發生本病,易繼發大腸桿菌病等疾病，造成較高的死淘率。目前國內禽流感H9亞型屬于非強制性免疫范圍,為了防止禽流感H9亞型病毒感染帶來嚴重的經濟損失,免疫控制是最經濟、最有效的措施。商品代肉雞飼養周期短,短期內疫苗免疫的次數和種類較多,制定合理有效的免疫程序非常重要。本研究擬檢測本地區規模肉雞場其H9亞型抗體效價，抗體進行跟蹤監測,以期找出免疫抗體的消長規律和確定最佳的免疫時間,為制訂的免疫程序提供試驗依據。

1 材料和方法

1.1 藥品

1%雞紅細胞液，新城疫-H9禽流感二聯苗，H9亞型A I V診斷抗原，阿氏液，PBS液。

1.2 試驗儀器

U型或V型微量反應板、微量移液器、槍頭。

1.3 1%雞紅細胞液的制備

用注射器吸取阿氏液約1mL，取至少2只SPF雞，采血約2～4mL，與阿氏液混合，放入裝10mL阿氏液的離心管中混勻。

將離心管中的血液經1500～1800r/min離心8min，棄上清液，沉淀物加入pH 7.2，0.01mol/LPBS液，輕輕混合，再經1500～1800 r/min離心8分鐘，用吸管移去上清液及沉淀紅細胞上層的白細胞薄膜，第三次洗滌，輕輕混合后，再經1500～1800 r/min離心10分鐘，棄去上清液，準確觀察刻度離心管中紅細胞體積(mL)，加入9倍體積(mL)的PBS，用吸管反復吹吸使PBS與紅細胞混合均勻。取混合均勻的10%雞紅細胞懸液1m L，加入9m LPBS，混合均勻即可。

1.4 血樣的采集和血清的制備

從4個實驗基地，隨機各選取一棟雞舍，分別對7、14、21、28日齡及出欄的商品雞群采取翅下靜脈采血，每棟抽血樣30份，共采血樣600份，對血樣分離血清共480份，分離的血清置-20℃保存待檢。……