丹參酮ⅡA衍生物1,6,6-三甲基-10,11-亞甲二氧基-6,7,8,9-四氫-菲并[1,2-b]呋喃的制備

潘自國，張金濤，段隆慧，楊浦生

（浙江九旭藥業有限公司， 浙江 金華 321016）

丹參酮ⅡA（3）來源于為唇形科植物丹參Salvia miltiorrhiza Bge。的干燥根及根莖。它是中藥丹參的主要脂溶性活性成分之一，具有抗菌消炎[1]、抗脂質過氧化[2,3]、抗腫瘤[4,5]、保肝護肝[6,7]以及抑制破骨細胞的分化[8]等多種藥理學活性。由于丹參酮ⅡA化學結構中有活潑的菲醌結構，在溶液中對光極敏感，會發生光化反應，生成多種產物。以丹參酮ⅡA為活性成分的注射用藥，存在一定的安全隱患。對丹參酮ⅡA化學結構進行改造已成為熱門課題。

本研究針對上述問題，制備得到丹參酮ⅡA衍生物（1），因無本品CAS號，根據《中國化學會有機化學命名原則》命名為1，6，6-三甲基-10，11-亞甲二氧基-6，7，8，9-四氫-菲并[1，2-b]呋喃。經穩定性試驗發現本品對光、酸、堿、高溫均較穩定。此制備工藝為丹參酮ⅡA衍生物開發提供了一個新目標化合物。本品由化合物3經鋅粉還原得到中間過渡態（2），進一步在相轉移催化劑作用下與二氯甲烷反應，兩步反應“一鍋法”操作得目標物（1）。其制備工藝操作簡單，反應條件溫和，原料成本低，收率穩定，適合工業化生產。合成路線見圖1。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

儀器：5L高壓反應釜(威海坤昌化工機械有限公司)， R-201旋轉蒸發器(上海申勝生物技術有限公司)，TD20002電子天平（余姚市金諾天平儀器廠），AV-500核磁共振儀（德國Bruker公司），Vario MICRO元素分析儀（德國Elementar公司），YRT-3熔點儀（天津大學精密儀器廠），1100LC/MS質譜儀（美國Agilent 公司），傅里葉變換紅外光譜儀（島津 FTIR-8400S）。

試劑：丹參酮ⅡA (南京朗澤醫藥科技開發有限公司，含量>98%，批號為20100610 )，四丁基硫酸氫銨（上海強順化學試劑廠，AR級，批號為20100311），鋅粉、二氯甲烷、氫氧化鉀（國藥集團化學試劑廠，均為AR級）。

圖1 丹參酮ⅡA衍生物合成路線Fig.1 Synthesis of tanshinone Ⅱ A derivatives

2 試驗方法

2.1 反應

在5L高壓反應釜中加入120 g(0.408 mol)丹參酮ⅡA，1 800 g二氯甲烷，300 g(4.615 mol)鋅粉，攪拌溶解；在3 000 mL燒杯中，加入1 500 g水，144 g(2.571 mol)氫氧化鉀，96 g四丁基硫酸氫銨，攪拌溶解，溶清后加入高壓釜中，密閉高壓反應釜，加熱升溫，于80～90 ℃下攪拌反應5～6 h，每隔1 h點板跟蹤反應進展（展開劑：無水乙醇：石油醚=6∶1），結束后，將反應液冷卻至 35 ℃以下，打開釜蓋，抽出反應液，過濾，濾液靜置分層，分去水層，有機層每次用120 mL水洗滌，直至洗滌水pH值呈中性為止。水層棄去，將有機層蒸干，濃縮物加入500 mL四氫呋喃，加熱回流使之溶解，冷卻析晶、過濾、洗滌得淺黃色濕品，45～50 ℃真空干燥3 h，得灰白色結晶性固體103 g。

2.2 精制

將干燥固體103 g用400 mL四氫呋喃加熱回流溶解，加10 g活性炭回流脫色30 min，過濾，濾液冷卻、析晶、過濾、洗滌得濕品76 g，真空干燥，得類白色固體58 g，總收率46.1%。熔點：180～182℃。FT-IR(KBr)ν(cm-1)：3066.61，2964.39，2921.96，2900.74，2866.02，2842。88，2800.45，1533.30，1434.94，1153.35，1085.85，1039.56.1H-NMR (500 MHz，CDCl3)δ(10-6)：1.388(s，6H，CH3-)，1.731～1.754(m，J=11.5 MHz，2H，- CH2-)，1.89～1.939(m，J=24.5 MHz，2H，- CH2-)，2.387(s， 3H， CH3-)，3.397～3.371(t，J=13.0 MHz，3H， CH3-)，6.078(s，2H， -CH2-)，7.269(s， H， -CH-)，7.451～7.446(t，J=15.5 MHz， H， -CH-)，8.004～8.021(d，J=8.5 MHz， H ， -CH-)， 13C-NMR:(500 MHz，CDCl3)9.322，19.865，29.479，31.942，34.582，38.921，77.270，100.67，1112.126，114.571，115.647，118.316，123.799，130.052，137.386，141.312，142.624，148.718。元素分析檢測值（理論值）,%:C 77.78(77.89)， H 6.49(6.49)， EI+-MS m/s 308.1416。高效液相色譜面積歸一化法純度 99.2%(Agilent XDB-C18 5 μm，4.6 mm×250 mm，流動相：乙腈：水=75∶25，柱溫：30 ℃，流速1.0 mL/min)

3 穩定性試驗

3.1 光照與高溫破壞試驗

分別稱取本方法制備的化合物（1）3 g于稱量瓶中，攤成<10 mm厚的薄層，于60 ℃高溫和(4 500±500)LX條件下放置10 d，與第5 d和第10 d取樣檢測其含量。實驗結果見表1。

表1 光照，高溫與含量的關系Table 1 Relationship between light,temperature and content

3.2 酸堿破壞試驗

分別取3 g化合物（1）溶于50 mL THF中加入10 mL 1N鹽酸，40 ℃攪拌和溶于50 mL THF中加入10 mL 1N氫氧化鈉，40 ℃攪拌4 h。分別于2 h、4 h取樣檢測含量變化。實驗結果見表2。

表2 酸、堿破壞與含量的關系Table 2 Relationship between acid,alkali damage and content

4 結 論

（1）還原劑的選擇

丹參酮ⅡA的還原產物（2），用還原劑VC、異丙醇鋁、四氫鋁鋰、鋅粉、雷尼鎳，經小試研究發現四氫鋁鋰、異丙醇鋁轉化率較低。其他都能得到純度 95%以上還原產物。1H-NMR:(500 MHz ，CDCl3)δ(10-6)1.331 (s，6H，CH3-)，1.729～1.752(m，J=11.5 MHz，2H，- CH2-)，1.891～1.939(m，J=24.5 MHz，2H，- CH2-)，2.012(s， 2H，-OH)，2.396(s，3H， CH3-)，3. 359～3. 385 (t，J=13.0 MHz，3H，CH3-)，4.974～4.981(t，J=3.5 MHz， 2H， -CH-)，7.219(s， H， -CH-)，7. 236～7. 241 (t，J=15.5 MHz，H， -CH-)，7.502～7.559(d，J=8.5 MHz， H， -CH-).但其還原產物在空氣中放置后由淡黃色，逐漸變成紅色，產物不易保存，且投料下一步反應后增加后處理的難度。在兩相中用“一鍋法”制備化合物（1）用鋅粉具有較高的選擇性。

（2）反應溫度和時間的影響

當反應溫度每升高 10～20 ℃，反應速率可增加 2～4倍，在高壓釜中 80～90 ℃條件下，壓力1.2～1.6 MPa時，密閉反應時間由二氯甲烷回流反應18～24 h，縮短至5～6 h。經點板原料點基本消失，雜質斑點較少。

（3）相轉移催化劑

本合成路線是兩相反應，反應過程中有一個平衡點，當原料點剩余約30%～40%時（TLC監控），反應隨時間的延長幾乎不再進行。加入相轉移催化劑四丁基硫酸氫銨，反應更加順利的進行，轉化率達95%以上。

（4）穩定性

由穩定性實驗數據表可見，化合物（1）對酸、堿、高溫和光照較穩定。

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