不同色譜柱對麥白霉素片A系列組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果比較

吳群，劉映倩，沈丹丹，林昀

(重慶市食品藥品檢驗所、重慶市藥物過程與質(zhì)量控制工程技術(shù)研究中心，重慶 401121)

不同色譜柱對麥白霉素片A系列組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果比較

吳群，劉映倩，沈丹丹，林昀

(重慶市食品藥品檢驗所、重慶市藥物過程與質(zhì)量控制工程技術(shù)研究中心，重慶 401121)

目的 比較不同色譜柱對麥白霉素片組分及有關(guān)物質(zhì)的測定結(jié)果。方法色譜柱為C18柱,以0.2 mol·L-1甲酸銨溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH至7.6)-乙腈(62∶38)為流動相,柱溫30℃,檢測波長為232 nm,流速為1.5mL·min-1。結(jié)果采用不同色譜柱測定各廠家麥白霉素片組分及有關(guān)物質(zhì)含量有很大差異。結(jié)論色譜柱對麥白霉素片組分及有關(guān)物質(zhì)的質(zhì)量控制有很大影響。

麥白霉素片；色譜柱；組分；有關(guān)物質(zhì)

麥白霉素系大環(huán)內(nèi)酯類抗生素,《中華人民共和國藥典》2005年版首次將其收載,但由于缺乏必要的組分分析數(shù)據(jù),僅采用高效液相色譜(HPLC)法控制其中麥迪霉素A1的含量不得低于35.0%［1］,但國產(chǎn)麥白霉素是以麥迪霉素A1和吉他霉素A6組分為主組分的多組分混合物,為了促進生產(chǎn)廠家改進工藝,提高活性組分的含量［2］,2010年版《中華人民共和國藥典》增加了麥白霉素A1、A2與吉他霉素A4、A6、A8組分和有關(guān)物質(zhì)的測定。由于不同色譜柱對各組分的分離情況不同,而影響了對組分和有關(guān)物質(zhì)的測定結(jié)果。為此,筆者通過不同色譜柱對麥白霉素片組分和有關(guān)物質(zhì)進行考察,篩選出適用于麥白霉素片分析的色譜柱。

1 儀器與試藥

Agilent1100高效液相色譜儀和WatersE2695高效液相色譜儀,紫外檢測器,麥白霉素標準品(中國食品藥品檢定研究院,批號:0341-9402,麥迪霉素A1含量49.0%)。5個廠家麥白霉素片分別用A、B、C、D、E表示。乙腈為色譜純,其他試劑為分析純。

2 色譜條件

色譜柱:①Agilent柱ZORBAX SB-C18,4.6 mm× 150 mm,5μm；②Agilent柱ZORBAX SB-C18,4.6 mm× 250 mm,5μm；③Agilent柱ZORBAX SB-C18,3 mm× 100 mm,3.5μm；④Thermo柱ODS HYPERSIL,4.6 mm× 250mm 5μm；⑤GRACE柱Alltima C18,4.6mm×150mm, 5μm；⑥D(zhuǎn)iamonsil C18,4.6 mm×150 mm,5μm；⑦Waters柱Sun Fire,4.6 mm×250 mm 5μm；⑧Phenomenex Luna 5u C18,4.6 mm×150 mm,5μm。

流動相:以0.2mol·L-1甲酸銨溶液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH至7.6)-乙腈(62∶38),柱溫30℃,檢測波長為232 nm,流速為1.5 mL·min-1。麥白霉素色圖譜見圖1。

3 實驗方法與結(jié)果

3.1 溶液的制備 對照品溶液:取麥白霉素對照品約20 mg,精密稱定,置10 m L量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。

供試品溶液:取供試品10片,精密稱定,研細,精密稱定適量(相當于麥白霉素20 mg),置10 mL量瓶中,加流動相溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。

3.2 Agilent1100 高效液相色譜儀的實驗結(jié)果 Agilent1100高效液相色譜儀采用色譜柱1,2,3,4,5,其他色譜條件不變,對照品圖譜見圖2,結(jié)果見表1～5。

圖1 《中華人民共和國藥典》2010年版HPLC方法分析麥白霉素的典型色譜圖2.吉他霉素A8;4.吉他霉素A6;5.麥迪霉素A1;6.吉他霉素A4;8.麥迪霉素A2(1,3,7號峰未考察)

色譜柱1,2,5的色譜圖峰形及分離情況較好,所測5個廠家麥白霉素片組分和有關(guān)物質(zhì)的結(jié)果相差不大,能反映藥品的真實質(zhì)量。色譜柱3的色譜圖中各組分不能得到有效分離,色譜柱4麥白霉素A1峰峰形不佳,色譜柱3,4所測5個廠家麥白霉素片組分和有關(guān)物質(zhì)的結(jié)果相差較大。

3.3 WatersE2695 高效液相色譜儀的實驗結(jié)果 WatersE2695高效液相色譜儀采用色譜柱6,7,8,其他色譜條件不變,對照品圖譜見圖3及結(jié)果見表6～8。

色譜柱6,8的色譜圖峰形及分離情況較好,所測5個廠家麥白霉素片組分和有關(guān)物質(zhì)的結(jié)果與色譜柱1,2,5測定結(jié)果相似,能反映藥品的真實質(zhì)量。色譜柱7的色譜圖中由于A6峰完全不能分離,導致其A6組分含量偏高。

4 討論

圖2 5種色譜柱分析所得的對照品色譜圖a.色譜柱1;b.色譜柱2;c.色譜柱3;d.色譜柱4;e.色譜柱5

表1 色譜柱1組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果 %

表2 色譜柱2組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果 %

表3 色譜柱3組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果 %

表4 色譜柱4組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果 %

表5 色譜柱5組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果 %

2010年版《中華人民共和國藥典》的麥白霉素及其制劑均已增加了組分及有關(guān)物質(zhì)檢查。但由于其標準中沒有規(guī)定色譜柱種類,在系統(tǒng)適應性實驗中也沒有規(guī)定各組分峰的分離度,使得有些生產(chǎn)廠家在質(zhì)量控制的時候,選用峰形或分離效果不好的色譜柱進行實驗,使得組分結(jié)果虛高,在生產(chǎn)過程中降低主藥的投料,從而影響藥品的質(zhì)量。為此筆者才考察了不同色譜柱對麥白霉素片組分及有關(guān)物質(zhì)的測定情況,結(jié)果顯示色譜柱1,2,5,6,8對麥白霉素各組分均能較好的分離且峰形較好,所測5個廠家麥白霉素片各組分和有關(guān)物質(zhì)的結(jié)果基本一致,適用于麥白霉素片的質(zhì)量控制。

圖3 3種色譜柱分析所得的對照品色譜圖a.色譜柱6;b.色譜柱7;c.色譜柱8

表6 色譜柱6組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果 %

表7 色譜柱7組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果 %

表8 色譜柱8組分及有關(guān)物質(zhì)測定結(jié)果 %

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(二部)[M].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010:303.

［2］楊亞莉,李婭萍,文玉輝,等.麥白霉素的組分分析與質(zhì)量控制[J].藥物分析雜志,2008,28(3):341-344.

DOI 10.3870/yydb.2014.01.030

R978;R927.2

A

1004-0781(2014)01-0102-04

2013-01-15

2013-05-23

吳群(1979-),女,重慶人,主管藥師,學士,研究方向:抗菌藥物質(zhì)量標準。電話：023-86072730,E-mail：920817428@qq.com。