化學檢測實驗室的方法驗證與確認

周科煖

（衢州方圓檢測有限公司，浙江 衢州 324002）

化學檢驗實驗室主要依靠準確掌握檢驗方法和掌控測試結果的有效性兩個方面來保障檢測結果的準確性，通常對檢測方法的控制要求有兩個控制理念，分別為方法驗證和方法確認。一部分實驗室工作人員在進行檢測時，不區分標準方法和非標準方法，直接使用同一種方式和操作方法進行檢測，這就會在實驗室檢測標準技術方面出現很大的不確定度，影響檢測結果的準確性。本文首先介紹了化學檢驗實驗室人員應掌握的方法驗證和方法確認兩個基本概念，然后采用幾種的技術方法手段，滿足檢測結果準確行的要求，達到客戶的檢測目標。

1 方法驗證和方法確認的區別

方法驗證的對象：實驗室應該在引入檢測或校準前，能夠證實并正確應用標準方法。所謂標準方法，是由相關專業機構評價確認后，向社會公開的技術規范文件。方法驗證是指實驗室在進行檢測前所需要證實其自身技術能力是否滿足符合了相關的規定要求。

方法確認的對象：實驗室在使用非標準方法或其它超出、擴充修改后的方法等情形時，要首先進行方法確認，確認這些方法的目標是能夠獲得準確有效的檢測結果。

2 方法驗證和方法確認的步驟

2.1 方法驗證的步驟

在進行新檢測驗證時，實驗室要首先對所對應的新建立的檢測標準進行分析，對實驗室人員、設備、試劑材料和檢測環境等進行評估，判別實驗室是否符合檢測工作的基本標準要求。當評估結果滿足條件后，要驗證實驗室是否具備準確執行檢測標準的技術能力。針對化學檢測實驗室，要經過試驗進行驗證實驗室人員所工作的技術參數是否達到檢測標準要求，具體參數有標準曲線、檢出限、回收率和精密度等。如表1～3。

當檢測標準發生變化后，首先要對新標準進行評估，若發現新標準技術僅僅是名稱、文本格式、技術參數單位等方面變化的話，直接通過技術評審，通過實驗室認證機構更改需要變更項目就可以滿足實驗室審核需求。若發現新標準技術與之前的技術路線有重大變化，需要對實驗室所有資源條件重新進行評審，通過檢測標準的需求后，再通過試驗驗證相關技術參數是否具備能夠執行新檢測標準的技術能力。

2.2 方法確認的步驟

在使用標準方法和制定實驗室方法等情況下，實驗室工作人員要首先進行試驗，確認技術路線和技術參數是否合理，并進行相關不確定度評估；之后通過做比對試驗或與外部實驗室進行對比等方法，完成非標準方法的準確有效性評價，根據相關規定通過技術審批，在使用前告知客戶；在進行技術確認中，還要完成方法特異性、抗干擾性、不確定度等評估。

非標準方法投入使用后，也要對方法進行變更，除了通過上述步驟方法外，還要對新的非標準文本中的技術路線及參數做出評估與修正，并要通過相關部門的技術審核。

3 化學檢測方法與參數的確認

化學檢測的對象包括禁用物質、限制使用的物質和無限制物質三類，考慮到這三類物質的不同特性，在進行化學檢測和確認過程中要充分考慮到對試驗方案和結果評價的相關影響。從方法驗證和確認參數角度看，化學檢測方法制表為校準曲線、回收率、精密度、準確度；非標準方法確認技術指標出上述條件外，還要進行方法的特異性、耐用性、不確定度評估等。

3.1 方法的校準曲線

在進行化學檢測實驗室方法校準曲線過程中，校準曲線包含的工作范圍至少要包含5個檢測點，對于篩選方法，相關系數不應低于0.98，對于確證方法，線性回歸方程相關系數不得低于0.99。

3.2 方法的回收率

回收率主要表示在檢測過程中所獲得測試結果的準確性程度。

影響回收率試驗結果的主要因素之一是被測物濃度的變化，因此，在進行實驗驗證過程中，對于禁用物質，回收率應在方法測定低限、兩倍方法測定低限和十倍方法測定低限進行試驗；對已制定的最大化學殘留量，回收率應在方法測定低限、最大化學殘留量、隨機選點進行試驗；對于未明文規定的化學殘留量標準，應在方法測定低限、常見限量指標、隨機選點進行試驗。可參考表1數據進行評價。

表1 回收率接受范圍

表2 實驗室精密度變異系數

表3 實驗室內變異系數偏差范圍

3.3 方法的精密度

精密度主要表示操作檢測過程所獲得測試結果的穩定水平。精密度試驗在對于禁用物質進行檢測時，應在測定低限、兩倍測定低限和十倍測定低限進行；對于已制定和未指定最大化學殘留量的情況，參照回收率方法進行試驗。所選取的濃度范圍需最少重復測量六次，測試結果通過實驗室內變異系數表達，標準偏差通過Bessel公式計算，系數如表2所示。

3.4 方法的準確度

準確度是指重復分析標準物質，測定的含量經過回收率校準后，得到測定值與真實值之間的偏差范圍，如表3所示。

3.5 方法的特異性

實驗室在使用非標方法、實驗室設計等方法時，僅依靠色譜分析的技術手段不能夠準確的區分同一種分子量物質，因此需要使用方法特異性來進行確認。對于能夠準確定量檢測的方法要保證檢測結果的準確性，避免對異構體結果出現誤判。根據待測物的化學結構，使用分子光譜等其它檢測技術，最終可以達到方法的特異性檢測需求。

3.6 方法的抗干擾性和耐用性

實驗室采用的非標準方法應具有一定的抗干擾性，即對外界環境及其它影響因素對檢測的影響具有一定得抗干擾性能；在測試條件在一定條件及范圍內發生變動時，檢測方法應具有一定的容錯功能，保證測試結果不出現大的波動改變。檢測方法的技術設備、操作過程等應在多數環境條件下具有適用性和耐用性，不宜具有苛刻的使用要求。

結語

在實驗室檢測工作中，方法驗證和方法確認是能夠做到檢測準確的重要環節之一，只有做好這兩項才能夠用數據來證實實驗室使用標準方法的操作能力，證實非標準方法的準確有效性，最終能夠保證實驗室檢測結果的科學性、適用性及準確無誤。

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