嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)肉雞消化道酶活性影響的研究

王愛(ài)娜 ，楊在賓

（1.濰坊工商職業(yè)學(xué)院，山東 諸城 262234；2.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，山東 泰安 271018）

隨著畜牧業(yè)快速發(fā)展，我國(guó)飼料資源嚴(yán)重不足，同時(shí)家禽飼料中含有非淀粉多糖等抗?fàn)I養(yǎng)因子也影響動(dòng)物的生產(chǎn)性能。解決該問(wèn)題的有效方法是在飼糧中添加酶制劑。雖然酶制劑在畜牧生產(chǎn)中的應(yīng)用取得了很大的成果，但其作用機(jī)理還不明了。因此，本試驗(yàn)通過(guò)研究在飼料中添加嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)肉雞消化酶活性影響來(lái)闡釋酶制劑對(duì)肉雞的促生長(zhǎng)機(jī)理。

1 材料與方法

1.1 酶制劑

嗜熱毛殼菌纖維酶（其中纖維素酶、木聚糖酶和β-葡聚糖酶活性分別為2 231.64、794.31和3 480.07U · g-1）。

1.2 日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參考NRC肉雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)（1994）配制，飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)選用1日齡健康A(chǔ)A肉仔雞120只，隨機(jī)分為4組，分別為對(duì)照組和試驗(yàn)1、2、3組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10只。各組飼喂基礎(chǔ)日糧，同時(shí)分別添加嗜熱毛殼菌纖維酶0、0.05%、0.15%和0.25%。試驗(yàn)雞網(wǎng)上飼養(yǎng)，自由采食和飲水。

1.4 試驗(yàn)方法

分別在14、35和49日齡，每個(gè)重復(fù)選取體重接近的試驗(yàn)雞2只，空腹稱重，頸靜脈放血、扭斷頸椎，致其快速死亡。屠宰前禁食12 h。試驗(yàn)雞屠宰后，迅速剖開(kāi)腹腔，取胃、十二指腸和空腸食糜及胰臟，然后置液氮中保存。

1.5 測(cè)定指標(biāo)和方法

1.5.1 酶活性測(cè)定前的預(yù)處理

先將樣品在室溫下解凍，稱取0.2 g，加入0.15mol·L-1的生理鹽水5mL，在冰水浴中勻漿2min，然后4℃，12 000 rpm，離心10min，取上清液用于酶活性的測(cè)定。

1.5.2 消化酶活性的測(cè)定

胰蛋白酶和α-淀粉酶活性測(cè)定按照孫洪新的方法完成[1]。脂肪酶和胃蛋白酶活性的測(cè)定采用試劑盒法，試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程公司。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS軟件進(jìn)行單因素方差分析，Duncan's法進(jìn)行多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 對(duì)肉雞淀粉酶活性的影響

嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)其胃腸道淀粉酶活性的影響見(jiàn)表2。

表2 嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)其胃腸道淀粉酶活性的影響U·g-1

由表2可見(jiàn)，添加嗜熱毛殼菌纖維酶可以提高肉雞十二指腸、空腸、胰臟淀粉酶的活性，但差異不顯著（P＞0.05）。

程志斌等試驗(yàn)結(jié)果表明，日糧中添加非淀粉多糖酶制劑（含木聚糖酶、葡聚糖酶和纖維素酶），可使21日齡羅斯肉雞空腸內(nèi)容物的淀粉酶活性顯著提高（P＜0.05）[2]。Ritz等研究表明，在玉米-豆粕型日糧中添加淀粉酶對(duì)小火雞胰腺組織生長(zhǎng)無(wú)顯著影響（P＞0.05），對(duì)胰腺淀粉酶活性也無(wú)顯著影響（P＞0.05），但外源淀粉酶的添加對(duì)腸道淀粉酶活性影響效果不一致[3]。由此可見(jiàn)，外源酶對(duì)淀粉酶活性影響的報(bào)道差異較大，這是由于酶活測(cè)定方法無(wú)統(tǒng)一的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)所造成的。

2.2 對(duì)肉雞胰蛋白酶活性的影響

嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)肉雞胰蛋白酶活性的影響見(jiàn)表3。

表3 嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)肉雞胰蛋白酶活性的影響U·g-1

由表3可見(jiàn)，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%顯著和極顯著提高了14日齡肉雞十二指腸和空腸胰蛋白酶活性（P＜0.05和P＜0.01），胰臟中胰蛋白酶活性雖也有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）；對(duì)于35日齡肉雞，與對(duì)照組相比，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%可顯著提高十二指腸胰蛋白酶的活性（P＜0.05），但添加嗜熱毛殼菌纖維酶的3組間無(wú)顯著差異（P＞0.05），且對(duì)空腸胰蛋白酶活性的影響不顯著（P＞0.05）；添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%可極顯著提高胰臟胰蛋白酶的活性（P＜0.01）；49日齡時(shí)，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%可顯著提高十二指腸和胰臟的胰蛋白酶活性（P＜0.05），但與其他兩個(gè)試驗(yàn)組相比，差異不顯著（P＞0.05）。

外源酶對(duì)肉仔雞內(nèi)源性胰蛋白酶活性影響的報(bào)道較多。本試驗(yàn)結(jié)果表明，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%顯著提高了各階段肉雞十二指腸胰蛋白酶的活性（P＜0.05），極顯著提高空腸胰蛋白酶的活性（P＜0.01），但對(duì)其他階段空腸的胰蛋白酶活性無(wú)顯著影響（P＞0.05）。王明海等研究發(fā)現(xiàn)，在玉米-豆粕型日糧中添加復(fù)合酶能提高20日齡肉雞蛋白酶的活性[4]。但徐昌領(lǐng)等研究結(jié)果表明，日糧中添加酶制劑降低21日齡肉雞胰蛋白酶分泌水平[5]。外源酶的添加對(duì)胰蛋白酶活性影響報(bào)道不盡相同，主要由日糧和試驗(yàn)雞影響所致。日糧不同，所含的抗?fàn)I養(yǎng)因子（酶作用的底物）不同，如果日糧中可溶性非淀粉多糖（SNSP）的含量過(guò)高，那么外源酶就會(huì)對(duì)內(nèi)源酶的分泌產(chǎn)生抑制效應(yīng)。從本試驗(yàn)的結(jié)果可以看出，添加酶制劑0.15%能顯著提高肉中雞和肉大雞胰蛋白酶的活性（P＜0.05），對(duì)于肉仔雞，雖然胰蛋白酶的活性有所提高，但差異不顯著（P＞0.05）。

2.3 對(duì)肉雞胃蛋白酶活性的影響

嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)肉雞胃蛋白酶活性的影響見(jiàn)表4。

表4 嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)肉雞胃蛋白酶活性的影響U·g-1

由表4可知，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.05%和0.15%可極顯著提高胃蛋白酶活性（P＜0.01），且試驗(yàn)2組胃蛋白酶的活性最高。張芹等報(bào)道，玉米-豆粕型日糧中添加木聚糖酶，可提高42日齡肉雞胃蛋白酶的活性[6]。對(duì)于肉雞來(lái)講，胃蛋白酶在蛋白質(zhì)的消化過(guò)程中意義不大，相關(guān)報(bào)道也不多，有限報(bào)道表明，外源酶可促進(jìn)家禽腺胃胃蛋白酶分泌。但是通過(guò)直接水解底物而表現(xiàn)出胃蛋白酶活性增強(qiáng)，還是真正起到促進(jìn)雞自身內(nèi)源性胃蛋白酶的分泌尚不明確。因此，胃蛋白酶活性測(cè)定值的升高并不等同于促進(jìn)內(nèi)源酶的分泌。

2.4 對(duì)肉雞脂肪酶活性的影響

嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)肉雞脂肪酶活性的影響見(jiàn)表5。

表5 嗜熱毛殼菌纖維酶對(duì)肉雞胰脂肪酶活性的影響U·g-1

由表5可知，與對(duì)照組相比，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%可顯著提高14日齡肉雞十二指腸和胰臟脂肪酶活性（P＜0.05）；但與試驗(yàn)3組相比，差異不顯著（P＞0.05）；添加酶制劑對(duì)空腸脂肪酶活性無(wú)顯著影響（P＞0.05）。35日齡時(shí)，與對(duì)照組相比，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%顯著提高十二指腸、空腸和胰臟脂肪酶活性（P＜0.05）。49日齡時(shí)，與對(duì)照組相比，添加嗜熱毛殼菌纖維酶0.15%顯著提高胰臟脂肪酶活性（P＜0.05）；但與其他各組相比差異不顯著（P＞0.05）。Engberg等試驗(yàn)表明，在整粒大麥日糧中添加木聚糖酶，可顯著提高糜蛋白酶和脂肪酶活性[7]。王鵬宇等試驗(yàn)表明，在日糧中添加木聚糖酶500、1 000、1 500 U·kg-1能顯著提高十二指腸和空腸脂肪酶活性[8]。本試驗(yàn)結(jié)果同上述報(bào)道基本一致。

3 結(jié) 論

在本試驗(yàn)條件下，添加嗜熱毛殼菌纖維復(fù)合酶能顯著提高小腸和胰臟中蛋白酶和脂肪酶活性，對(duì)淀粉酶活性幾乎無(wú)影響。

[1]孫洪新.羔羊小腸消化酶活性變化規(guī)律研究[D].保定:河北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2003.

[2]程志斌，張紅兵，黃遵錫，等.幾種商業(yè)非淀粉多糖酶制劑對(duì)肉雞腸道及內(nèi)容物消化酶的影響[J].家畜生態(tài)學(xué)報(bào)，2011，32（2）:64-68.

[3]Ritz CW，Hulet RM，Self B B，etal.Endogenous amylase levels and response to supplemental feed enzymes in male turkeys from hatch to eightweeds of age[J].Poultry Sci，1995，74（8）:1 317-1 322.

[4]王明海，高峰.復(fù)合酶制劑對(duì)肉仔雞消化酶活性和代謝的影響[J].中國(guó)家禽，2008，30（11）:23-26.

[5]徐昌領(lǐng)，左建軍，馮定遠(yuǎn).組合型木聚糖酶對(duì)21日齡黃羽肉雞器官指數(shù)、內(nèi)源消化酶活性以及腸道吸收功能的影響[J].飼料工業(yè)，2011（1）:49-53.

[6]張芹，毛勝勇，朱偉云，等.玉米-豆粕型日糧中添加木聚糖酶對(duì)肉雞生產(chǎn)性能和內(nèi)源酶活性的影響[J].畜牧與獸醫(yī)，2007，39（8）:5-7.

[7]Engberg R M，Hedemann M S，Jensen B B，et al.Influence of whole wheat and xylanase on broiler performance and microbial composition and activity in the digestive tract[J].Poultry Sci，2004，83:925-938.

[8]王鵬宇，龔月生，張磊，等.木聚糖酶對(duì)肉雞生產(chǎn)性能和腸道內(nèi)源酶活性的影響[J].中國(guó)家禽，2010（9）:11-14.