幾種不同產(chǎn)地枸杞中甜菜堿含量的比較

摘要：根據(jù)《農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》中的相應(yīng)方法提取枸杞中的甜菜堿，通過(guò)單因素試驗(yàn)優(yōu)化其主要工藝條件，如料液比、提取時(shí)間、絡(luò)合劑加入量、絡(luò)合時(shí)間等。結(jié)果表明，甜菜堿提取的最佳工藝條件為：料液比1 g ∶60 mL，提取時(shí)間 2 h，提取液與絡(luò)合劑的比為 1 ∶5，絡(luò)合時(shí)間2 h，在此條件下，3種不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量由大到小排序?yàn)椋焊拭C枸杞（9.26%）>青海枸杞（8.73%）>寧夏中寧枸杞（8.71%）。

關(guān)鍵詞：枸杞；甜菜堿；單因素；提取工藝

中圖分類號(hào)： Q946.88；R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2014）07-0330-02

收稿日期：2013-09-24

基金項(xiàng)目：寧夏自然科學(xué)基金（編號(hào)：NZ12122）。

作者簡(jiǎn)介：郝鳳霞（1978—），女，寧夏中寧人，碩士，講師，研究方向?yàn)樘烊划a(chǎn)物有效成分提取與分離及藥物檢測(cè)。Tel：（0951）2062322；E-mail：hao_fx@nxu.edu.cn。枸杞子為茄科植物枸杞（Lycium chinense Mill.）或?qū)幭蔫坭剑↙yciumbarbarum L.）的干燥成熟果實(shí)，在國(guó)內(nèi)外均有分布，其在國(guó)內(nèi)的產(chǎn)區(qū)主要集中在西北地區(qū)，其中寧夏產(chǎn)的枸杞最為著名，是寧夏的“五寶”之一，此外甘肅、青海等地的枸杞品質(zhì)也很高。現(xiàn)在醫(yī)學(xué)研究表明，枸杞具有抗氧化、抗衰老、免疫調(diào)節(jié)、降血糖、降血脂等作用[1-3]。甜菜堿是枸杞果、葉、柄中主要的生物堿之一，具有強(qiáng)烈的吸濕性能，此外還可以抗腫瘤、降血壓、抗消化性潰瘍及胃腸功能障礙，并且可以治療肝臟疾病[4]，2010版《中華人民共和國(guó)藥典》中以甜菜堿和枸杞多糖作為評(píng)價(jià)枸杞質(zhì)量的2個(gè)重要指標(biāo)[5]。本試驗(yàn)首先以寧夏中寧枸杞為研究對(duì)象，對(duì)其中的甜菜堿進(jìn)行提取，并采用不同方法進(jìn)行測(cè)定，采用單因素試驗(yàn)等多種方法優(yōu)化其主要影響因素如料液比、提取時(shí)間、絡(luò)合劑用量、絡(luò)合時(shí)間等，初步建立從中寧枸杞中提取分離甜菜堿的工藝；再對(duì)甘肅和青海的枸杞進(jìn)行測(cè)定，以比較不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量，找出品種、產(chǎn)地對(duì)枸杞質(zhì)量造成的差異性，以期為甜菜堿的進(jìn)一步開發(fā)利用提供一定的參考。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

中寧枸杞采自寧夏中寧縣舟塔鄉(xiāng)，青海枸杞、甘肅枸杞購(gòu)自寧夏中寧枸杞交易市場(chǎng)。將枸杞置于電熱鼓風(fēng)干燥箱中，60 ℃連續(xù)烘干20 h后粉碎，過(guò)40目篩，放于冰箱中保存。

濃鹽酸、飽和雷氏鹽溶液（15 g/L）、99%乙醚溶液、70%丙酮溶液、甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)品（純度>99.99%）等試劑均為分析純；實(shí)驗(yàn)室用水為蒸餾水。相應(yīng)溶液的配制方法為：（1）99%乙醚溶液：吸取1 mL水，加入到99 mL無(wú)水乙醚中；（2）70%丙酮溶液：量取30 mL水，加入到70 mL丙酮中；（3）1.5 g/L甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱取0.150 0 g甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)品，置于100 mL燒瓶中，再加少量蒸餾水?dāng)嚢枋怪芙猓瑢⑷芤恨D(zhuǎn)移至 100 mL 容量瓶中用蒸餾水定容；（4）15 g/L飽和雷氏鹽溶液：稱取1.500 0 g雷氏鹽，加90 mL蒸餾水?dāng)嚢瑁脻恹}酸調(diào)節(jié)pH值至1.0，于室溫下不斷攪拌45 min后抽濾，定容至100 mL（現(xiàn)配現(xiàn)用）。

1.2試驗(yàn)儀器

UV2450紫外-可見分光光度計(jì)（日本島津公司）；L/L-S 電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）；DZF-6020電熱鼓風(fēng)干燥箱（鞏義市英峪予華儀器廠）；7DL80-2B臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科技儀器廠）；SHB-Ⅱ循環(huán)水式多用真空泵（鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）。

1.3試驗(yàn)方法

稱取2.000 0 g甜菜堿烘干樣品，用80 mL蒸餾水溶解后于室溫放置3 h，不停地?cái)嚢琛⒒靹颉⒊闉V、棄殘?jiān)Ｓ脻恹}酸調(diào)節(jié)pH值為1.0左右，抽濾后定容至100 mL；吸取3.00 mL移入10 mL離心管中，加蓋后在冰箱中存放15 min；加入 5 mL 雷氏鹽溶液，加蓋后再置于冰箱內(nèi)存放1 h；取出在 1 000 r/min 條件下離心15 min，棄去上清液，加入99%的乙醚5 mL搖勻，1 000 r/min條件下離心15 min；棄去上清液，加入5.0 mL 70%的丙酮溶液，測(cè)定吸光度。

2結(jié)果與分析

2.1甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

取6支試管，分別加入0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mL甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)溶液，再分別加入2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0 mL蒸餾水，使最終總體積為3 mL，使其濃度分別為：0.25、0.30、035、0.40、0.45、0.50 mg/mL。在冰箱中存放15 min后分別滴加5 mL雷氏鹽溶液，再置于冰箱中3 h，取出后在 1 000 r/min 離心15 min，棄去上清液，加入99%的乙醚 5 mL，1 000 r/min離心15 min，自然揮發(fā)至干。以70%丙酮溶液作為空白，用紫外-可見分光光度計(jì)測(cè)定吸光度，確定甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收波長(zhǎng)為523 nm，在此波長(zhǎng)處測(cè)定各個(gè)濃度的吸光度值，并繪制甜菜堿的標(biāo)準(zhǔn)曲線。甜菜堿紫外色譜圖及甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)曲線分別見圖1、圖2，甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0500 24x-0.095 02，r2=0.994 5。

2.2甜菜堿提取的單因素試驗(yàn)

3結(jié)論

提取甜菜堿時(shí)采用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》中的《蒸餾水冷浸法》和《中華人民共和國(guó)藥典》中的《80%乙醇熱回流法》這2種方法作為提取甜菜堿的方法，比較這2種方法的甜菜堿得率發(fā)現(xiàn)，采用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》的方法，甜菜堿得率為3.35%，而采用《中華人民共和國(guó)藥典》的方法，甜菜堿得率3.13%，且蒸餾水冷浸法比80%乙醇熱回流法提取方法安全、簡(jiǎn)單易操作，成本低，因此選用《農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)》作為提取甜菜堿的方法。

不同地區(qū)枸杞中的甜菜堿含量不同，可能與枸杞生長(zhǎng)地域、環(huán)境、濕度、日照等生態(tài)環(huán)境因素有關(guān)，如枸杞作為中成藥配伍使用時(shí)，應(yīng)嚴(yán)格控制及規(guī)范枸杞產(chǎn)地、采摘期等，使中成藥中枸杞的甜菜堿和多糖等指標(biāo)符合藥典規(guī)定。

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