【摘 要】 目的 探討膿毒血癥過程中心肌Caspase-3蛋白表達與心肌細胞凋亡的關系。方法 酵母多糖懸濁液建立膿毒血癥模型,檢測心肌細胞凋亡和Caspase-3蛋白表達。結果 第三天和第六天對照組大鼠心肌凋亡指數和Caspase-3蛋白明顯低于750mg/kg和1000mg/kg組,組內比較顯示,各組大鼠第六天心肌凋亡指數較第三天明顯增加(P<0.05)。結論 酵母多糖懸濁液所致的膿毒血癥伴有凋亡蛋白的高表達,造成心肌細胞嚴重損害,應注意心肌營養。
【關鍵詞】 膿毒血癥;Caspase-3蛋白;心肌細胞凋亡
【中圖分類號】 R631+.1 【文獻標識碼】 B
膿毒血癥與感染相關,發病率和病死率高。革蘭陰性菌感染引起的內毒素釋放及腸源性內毒素易位是導致膿毒癥的重要因素。內毒素通過與單核巨噬細胞膜上的受體CDl4結合,進而與受體TLR4結合將信號轉入胞內,導致細胞活化、釋放各種炎癥介質(如TNF-a、IL-1和IL-6等),出現心肌細胞凋亡,可以說心肌細胞的凋亡在膿毒血癥發生過程中起著一定的促進作用[1]。本文重點討論膿毒血癥過程中心肌Caspase-3蛋白表達與心肌細胞凋亡的關系。
1 材料與方法
1.1 藥物和試劑 小鼠抗大鼠Caspase-3單克隆抗體購自武漢博士的生物工程有限公司。細胞凋亡原位檢測試劑盒購自德國B.M公司。
1.2 動物模型的建立 將酵母多糖和液體石蠟混合,磁力攪拌器攪拌15min混勻制成懸濁液,100℃水浴80min滅菌,制成濃度為100mg/ml的酵母多糖-石蠟懸液(ZPS),冷卻后放入4℃冰箱備用,臨用前40℃水浴及高頻攪拌15min后注射。Wistar大鼠實驗前12h開始禁食不禁水,實驗前1-2h稱重并測肛溫。模型判斷標準:注射ZPS后較注射前肛溫升高或降低1℃、WBC增加1倍或減少50%、呼吸頻率超過正常值2倍或動脈血PaCO2較正常降低25%、心率較對照值增加50%。……