熊果酸抑制人結(jié)腸癌細(xì)胞HT—29增殖作用的研究

【摘 要】 目的 探討熊果酸在體外對人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29的增殖抑制作用。方法 采用MTT法觀察熊果酸對HT-29細(xì)胞的增殖抑制作用。結(jié)果 熊果酸對HT-29細(xì)胞的增殖抑制作用呈明顯的濃度和時間依賴性。結(jié)論 熊果酸對人結(jié)腸癌細(xì)胞系HT-29有較強(qiáng)的增殖抑制作用，該作用呈濃度和時間依賴性。

【關(guān)鍵詞】 熊果酸；人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29

【中圖分類號】 R735.3+5 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】 A

熊果酸（Ursolic acid，UA），又名烏索酸，烏蘇酸，為三萜酸類化合物，在自然界中分布廣泛，主要存在于熊果、山楂、女貞、白花蛇舌草等多種草藥以及植物中，具有護(hù)肝、抗炎、免疫調(diào)節(jié)等多種生物學(xué)活性[1-3]，近年來熊果酸的抗腫瘤作用越來越受到重視，它可以抑制腫瘤的發(fā)生、生長、侵襲轉(zhuǎn)移以及抗腫瘤血管生成、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化和凋亡[4，5]。本實(shí)驗(yàn)研究了熊果酸在體外對人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29的增殖抑制作用。

1 資料與方法

1.1 材料 人結(jié)腸癌細(xì)胞株HT-29購自北京大學(xué)。UA、四甲基偶氮唑藍(lán)[3-（4、5-dimethylthiazol-2YL）-2，5-diphenyl tetrazolium bromide，MTT]購自Sigma公司。RPMI-1640培養(yǎng)基購自HYCLONE公司。小牛血清購自三利公司。胰酶（1：250）購自Amresco公司。二甲基亞砜（DMSO）為AMRESCO公司產(chǎn)品。PBS粉：中國北京中山生物技術(shù)公司產(chǎn)品。酶標(biāo)儀為澳大利亞TECAN公司產(chǎn)品，型號：GENiOS VA200。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng) 人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29接種于含10%新生小牛血清RPMI-1640培養(yǎng)基中，置37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每2-3天傳代，取對數(shù)生長期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 增殖抑制實(shí)驗(yàn) 將處于對數(shù)生長期的HT-29細(xì)胞調(diào)節(jié)濃度至5×104個/mL，加入96孔培養(yǎng)板中，然后加入熊果酸使其終濃度分別為10 mol/L、20mol/L、30mol/L、40 mol/L和50mol/L，并設(shè)立不含UA（0μmol/L）的對照組，每組設(shè)3個復(fù)孔。將96孔板置于培養(yǎng)箱內(nèi)分別培……