全自動生化分析儀測量方法探討

無論是當今運行速度最快的模塊式全自動生化分析儀，還是手工操作用于比色的半自動生化分析儀，其原理都是根據物質在紫外、可見光區產生的特征吸收光譜和朗伯—比爾（Lambert—Beer）定理的原理，用未知濃度的樣品與已知濃度標準物質比較或根據摩爾吸光系數方法進行定量分析的儀器，因此全自動生化分析儀相關的計量性能要求可采用半自動生化分析儀計量性能要求。

1 探討測量方法應在儀器正常工作條件下進行

全自動生化分析儀是大型精密檢驗設備，操作復雜。設備經廠家技術工程師調試好后，醫生就不再對設備硬件與軟件方面進行實質性的改動，所以實際測量全自動生化分析儀必須考慮上述情況，在儀器正常工作條件下進行測量。

2 使用的標準物質

探討測量方法測量全自動生化分析儀使用中國計量院研制生產的二種標準物質：第一種是生化分析儀檢定用溶液標準物質（BW2025）、第二種是用于檢定全自動生化分析儀的標準物質。

3 測量項目

3.1示值誤差與重復性

此項測量用第二種標準物質。在儀器正常工作條件下，分別選擇340nm和505nm波長，用1號或2號健康人血清標準物質（用1.0ml二次水溶解）作為樣本測量丙氨酸氨基轉移酶和葡萄糖各6次，計算測量結果的示值誤差（[ΔC]）和重復性（以相對標準偏差RSD表示）。

[RSD][=1Ii=1nIi-I2n-1×100%]

式中：[Ii]——單次測量值；[I]——測量平均值；[n]——測量次數。

技術要求參照全自動生化分析儀標準物質使用說明進行。

3.2線性誤差

測量用第一種標準物質。在儀器正常工作條件下，選擇505nm波長，將設備原有試劑倉中的試劑盒取出，將質量濃度為2.0g/L的標準物質放入干凈的試劑盒中作為測量用試劑（雙試劑用雙試劑盒），樣本盒中同樣加入2.0g/L的標準物質，采用全自動生化分析儀分析樣本時的工作程序測量標準物質的吸光度值，重復測量3次。由于全自動生化分析儀的反應原理是樣本與試劑充分反應后在比色池中進行比色，與相應的標準值進行比較。試劑與樣本是同一標準物質，因此顯示的測量結果濃度值很小或負值。但我們不看濃度值，需要的是標準物質的吸光度值。全自動生化分析儀選擇505nm波長采用的是終點法，讀取吸光度值需要在相應的菜單里找尋，以AU640型全自動生化分析儀為例：

點擊[[Reaction]→[Monitor]→[Normal]→[Routine]→date]，[date]為標準物質的樣本號，讀取反應結束（終點）時的吸光度值。

測量結束后，按上述方法依次測量質量濃度為4.0g/L、6.0g/L、8.0g/L、10.0g/L的標準物質的吸光度值，測量結果見表1。

[Δi=Ki-KK×100%]其中：[K=15i=15Aici=0.0754A]

一般進口全自動生化分析儀讀取吸光度值參照上述方法，國產全自動生化分析儀讀取吸光度值在【反應曲線】菜單中。時間——吸光度曲線如下圖所示：

[t1]時刻加入試劑，[t2]時刻加入樣本，然后攪拌并反應，之后測量反應液的吸光度，在[t3]時刻反應達到終點，讀取[t3]時刻的吸光度值（注：有些全自動生化分析儀的吸光度值是列表顯示）。

技術要求參照JJG464—2011《半自動生化分析儀》檢定規程中的線性誤差項進行。

3.3樣品交叉污染率[C0]

按照全自動生化分析儀標準物質使用說明進行樣品交叉污染率[C0]的測量，筆者認為是不可行的：因為按照全自動生化分析儀標準物質使用說明：選擇340nm波長測量葡萄糖濃度，按照葡萄糖己糖激酶法要求進行。而醫院現不用葡萄糖己糖激酶法測量葡萄糖濃度，且不配備葡萄糖己糖激酶法的試劑。現在醫院測量葡萄糖濃度選擇505nm波長，按照氧化酶法要求進行，因此此項按全自動生化分析儀標準物質使用說明無法進行測量。

測量方法：

此項測量用第二種標準物質。在儀器正常工作條件下，選擇505nm波長，分別用二次水和3號健康人血清標準物質（用1.0ml二次水溶解）作為樣本，交替測量二次水和葡萄糖濃度，先對二次水連續測量四次，接著對3號健康人血清標準物質溶液連續測量四次，最后再對二次水連續測量四次，得到2組低值與1組高值共計3組測量值，按照全自動生化分析儀標準物質使用說明中的公式計算樣品交叉污染率[C0]。技術要求參照全自動生化分析儀標準物質使用說明進行。

按照全自動生化分析儀標準物質使用說明，選擇340nm波長進行摩爾吸光系數[ε]示值誤差的測量，筆者認為是不可行的，原因與第3、3項樣品交叉污染率[C0]的測量相同。