224株革蘭陰性桿菌臨床分布及耐藥性分析

馬艷榮等

【摘要】目的：了解新疆焉耆地區(qū)的革蘭陰性（G-）菌的臨床分布及耐藥性分析，為臨床合理應(yīng)用抗菌藥物提供依據(jù).方法 ：采用VITEK2-Compact型全自動(dòng)分析儀，結(jié)合K-B紙片擴(kuò)散法對(duì)分離菌株進(jìn)行鑒定和藥物敏感性測(cè)定；結(jié)果：革蘭氏陰性菌224株；腸桿菌128株；非發(fā)酵菌56株；其他40株；腸桿菌科以大腸埃希菌為主，占30.3%，其次為肺炎克雷伯菌，占9.3%；非發(fā)酵菌以銅綠假單胞菌為主，占21.4%，其次為鮑曼不動(dòng)桿菌，占11.10%；大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌是臨床上主要致病菌。腸桿菌科和非發(fā)酵菌對(duì)亞胺培南最為敏感，對(duì)頭孢他啶、氨曲南、頭孢替坦、頭孢曲松、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明都比較敏感.結(jié)論：革蘭陰性菌對(duì)多種抗生素有獲得性耐藥傾向，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)，防止耐藥菌株播散， 尤其是產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶菌株的蔓延和暴發(fā)流行"

【關(guān)鍵詞】革蘭陰性菌；抗菌藥物；藥物敏感性試驗(yàn)；

【中圖分類號(hào)】R722.12 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2014）01-0121-01

為了解我院臨床分離G-菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥性及其產(chǎn)金屬β-內(nèi)酰胺酶現(xiàn)狀，我們對(duì)本院2011年1月-2012年12月分離的部分G-菌進(jìn)行了耐藥性分析和金屬β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)，現(xiàn)報(bào)告如下。

1材料與方法

1.1 菌株來源 我院2011年1月～2012年12月從臨床分離的224株革蘭陰性菌。

1.1.2 主要儀器與試劑 VITEK2-Compact全自動(dòng)微生物鑒定儀及GN鑒定卡：法國生物梅里埃公司.

1.1.3藥敏紙片及培養(yǎng)基 所用補(bǔ)充藥敏紙片氨芐西林、氨曲南、環(huán)內(nèi)沙星、頭孢替坦、頭孢曲松、頭孢唑林、慶大霉素、亞胺培南、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、頭孢他啶均為英國Oxoid公司產(chǎn)品。

1.1.4質(zhì)控菌株 金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853均購自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2細(xì)菌的分離，培養(yǎng)，鑒定及藥敏試驗(yàn) 按《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》（第2版）進(jìn)行細(xì)菌的分離培養(yǎng)和常規(guī)鑒定， VITEK2-Compact全自動(dòng)微生物鑒定儀鑒定，并結(jié)合K-B紙片擴(kuò)散法檢測(cè)其對(duì)11種抗菌藥物的敏感性。結(jié)果判定及質(zhì)量控制按美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（NCCLS）2004版標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，并統(tǒng)一檢測(cè)金屬β-內(nèi)酰胺酶。

1.2.1 EDTA紙片的制備 稱取1.86gEDTA-Na2-H2O溶于10mL蒸餾水中，用5mmol/L的NaOH調(diào)pH值至8.0，高壓蒸汽滅菌。用打孔器制作6mm濾紙片，滅菌備用。取上述EDTA溶液原菌4uL于濾紙片，置無菌平皿于90溫度烤箱10min烤干，于無菌干燥密閉瓶中-20溫度保存。

1.2.2 金屬β-內(nèi)酰胺酶的檢測(cè) 采用雙紙片協(xié)同法[1]，在直徑9的瓊脂平板上，按K-B法藥敏試驗(yàn)方法接種待測(cè)菌后， 在正中帖上EDTA-Na2紙片， 在紙片周圍，與EDTA-Na2紙片相距20mm處的3個(gè)不同方向分別貼上CAZ 、CTM 、IMP三種藥敏紙片， 35攝氏度溫箱內(nèi)培養(yǎng)18～24h， 若濾紙片與三種藥敏紙片中的任何一種之間出現(xiàn)抑菌環(huán)擴(kuò)大現(xiàn)象則表示待測(cè)菌株產(chǎn)生金屬酶。

2結(jié)果

2.1 病原菌分布及藥物敏感性分析

2.1.2 腸桿菌128株；非發(fā)酵菌56株；其他40株；腸桿菌科以大腸埃希菌為主，占30.3%，其次為肺炎克雷伯菌，占9.3%；非發(fā)酵菌以銅綠假單胞菌為主，占21.4%，其次為鮑曼不動(dòng)桿菌，占11.10%。腸桿菌科和非發(fā)酵菌對(duì)亞胺培南最為敏感。

3討論

本試驗(yàn)結(jié)果顯示， 大腸埃希菌是G-菌中分離率最高的菌種，達(dá)30.30%，其次是銅綠假單胞菌（21.40%），鮑曼不動(dòng)桿菌（11.10%），肺炎克雷伯氏菌（9.30%）。標(biāo)本類型不同，病原菌構(gòu)成也不相同. 大腸埃希菌感染部位主要見于泌尿道、呼吸道、傷口等，而銅綠假單胞菌是呼吸道感染的主要病原菌.從表2被監(jiān)測(cè)的藥物來看，亞胺培南對(duì)革蘭陰性菌的敏感性最高，但因其易致二重感染，同時(shí)又是良好的酶誘導(dǎo)劑，加上價(jià)格昂貴，所以只能作為治療混合感染的二線用藥。臨床上應(yīng)在藥物敏感試驗(yàn)指導(dǎo)的前提下，優(yōu)先選用氟喹諾酮類、氨基糖苷類抗生素。由于廣譜抗生素的濫用以及細(xì)菌間的耐藥基因，細(xì)菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥已經(jīng)發(fā)展成為人類健康面臨的嚴(yán)重問題之一[2] 因此，我們?cè)趹?yīng)用抗生素時(shí)，要嚴(yán)格掌握適應(yīng)證，遵守抗菌藥物合理使用指導(dǎo)原則[3]，抑制金屬酶的產(chǎn)生，阻斷耐藥基因在細(xì)菌間傳播，設(shè)計(jì)有效的抗金屬酶抑制劑，將是今后微生物學(xué)家和醫(yī)療人員工作的重要內(nèi)容。

參考文獻(xiàn)

[1] 蔣曉飛，洪秀華，倪語星.金屬β-內(nèi)酰胺酶—抗感染治療面臨的新挑戰(zhàn)[J].中國抗生素雜志，2002，27（11）：700-704

[2] 王睿， 柴棟. 細(xì)菌耐藥機(jī)制與臨床治療對(duì)策 [J].國外醫(yī)藥抗生素分冊(cè)，2003 ，24（3） ：97-102.

[3]許景峰.《北京軍區(qū)抗菌藥物合理應(yīng)用指導(dǎo)原則》介紹[J]. 解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，200，19（1） ：71