妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過程中相關(guān)指標(biāo)分析

王一承　劉麗琴　石勝友　魏永贊

摘 要 以荔枝品種妃子笑（Litchi chinensis Sonn. cv. Feizixiao）為材料，通過測(cè)定其果實(shí)發(fā)育過程中重量、體積、糖、酸、維生素C（Vc）、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）及過氧化物酶（POD）活性的變化，分析該品種果實(shí)的發(fā)育特性。結(jié)果表明：花后40 d到果實(shí)著色階段為妃子笑果肉發(fā)育與風(fēng)味形成的最重要時(shí)期，此階段果肉開始膨大，糖含量升高，酸含量降低。除此之外，果實(shí)發(fā)育過程中果皮和果肉可能具有不同的清除自由基模式。果皮中膜脂過氧化產(chǎn)物MDA含量相對(duì)穩(wěn)定，但隨著果實(shí)的發(fā)育，果皮內(nèi)3種主要的抗氧化功能組分變化不一，其中Vc含量和SOD活性逐漸下降，POD活性則逐漸上升。與果皮不同，果肉中MDA含量隨果實(shí)的發(fā)育逐漸下降，說明果肉清除自由基的能力隨果實(shí)發(fā)育逐漸提高，而此過程中，果肉Vc含量顯著上升，SOD活性下降，POD活性相對(duì)穩(wěn)定。此結(jié)果表明果實(shí)發(fā)育過程中，果肉抗氧化能力的提高與Vc含量上升直接相關(guān)。

關(guān)鍵詞 妃子笑荔枝；糖酸含量；酶活性；抗氧化

中圖分類號(hào) S667.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A

荔枝品種妃子笑因果大、肉厚、色美、核小、味甜等特性成為廣東等地重要的中早熟品種。目前，關(guān)于妃子笑荔枝栽培、生理方面的研究主要集中于樹體營(yíng)養(yǎng)管理[1-3]、花前催花、花后保果技術(shù)[4-5]、果實(shí)著色機(jī)理[6-7]、果肉營(yíng)養(yǎng)差異等方面[8]，但針對(duì)該品種果實(shí)發(fā)育的基本特征的研究卻較少。因此，本實(shí)驗(yàn)通過分析妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過程中的相關(guān)生理指標(biāo)，進(jìn)而理解其果實(shí)的發(fā)育特征，對(duì)荔枝的生產(chǎn)具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)材料選取南亞熱帶作物研究所基地內(nèi)正常管理?xiàng)l件下的妃子笑果實(shí)。取樣方法如下：隨機(jī)選取園地里長(zhǎng)勢(shì)均勻的6株果樹，按不同方向，選取大小中等的果實(shí)，分花后10、20、30、40、50、60、70 d、果實(shí)未著色及著色9個(gè)時(shí)期取樣。鮮樣取好后，立即用冰盒帶回實(shí)驗(yàn)室，并且進(jìn)行相關(guān)生理指標(biāo)的測(cè)定。

1.2 方法

采用常規(guī)方法測(cè)定果實(shí)與果核的重量、體積及橫縱徑。可溶性糖含量采用蒽酮法測(cè)定，有機(jī)酸含量則用酚酞作為指示劑，NaOH標(biāo)定方法測(cè)定[9]。Vc、MDA含量的測(cè)定參照張志良[10]的方法，取0.2 g果肉，加入10%三氯乙酸5mL研磨至勻漿。6 000 r/min離心10 min 取1.5 mL上清液，加入2.5 mL 0.5% TBA液，沸水浴20 min后，于532、600 nm處測(cè)定吸光度[10]。參考陳建勛[11]的方法測(cè)定SOD及POD活性，取0.5 g樣品，加入5 mL預(yù)冷的提取介質(zhì)中研磨至勻漿，定容至10 mL，在4 ℃條件下10 000 r/min離心15 min，取上清為粗酶液，而后在波長(zhǎng)為560 nm條件下分析SOD活性，470 nm條件下測(cè)定POD的活性[11]。以引起3 mL反應(yīng)體系中抑制NBT光還原50%所需酶量定義1個(gè)SOD酶活單位，POD活性則以每分鐘吸光度變化值表征[12]。

1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)運(yùn)用SAS數(shù)理統(tǒng)計(jì)分析軟件（8.1版本）ANOVA過程進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)LSD，p<0.05，不同類型數(shù)據(jù)用大小寫字母區(qū)分，同一數(shù)據(jù)內(nèi)不同字母間表示差異顯著。

2 結(jié)果與分析

2.1 妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過程中重量、體積、果實(shí)與果核橫縱徑的變化

由圖1可知，妃子笑果實(shí)發(fā)育過程中其重量與體積的發(fā)育幾乎同步且其發(fā)育過程大體可分為3個(gè)時(shí)期。第1個(gè)時(shí)期為花后10～30 d，此時(shí)果實(shí)與體積發(fā)育速度相對(duì)最緩慢；第2個(gè)時(shí)期為花后30～60 d，此時(shí)果實(shí)與體積發(fā)育速度加快；第3個(gè)時(shí)期為花后60～70 d，該時(shí)期果實(shí)重量與體積快速增加為果實(shí)膨大期。果實(shí)橫縱徑發(fā)育趨勢(shì)相一致，果核橫縱徑發(fā)育規(guī)律也相對(duì)一致，但果實(shí)與果核的橫縱徑發(fā)育規(guī)律存在細(xì)微的差異。即果實(shí)的橫縱徑從花后10 d到花后70 d發(fā)育相對(duì)較快，而果核在花后20～40 d與花后60～70 d發(fā)育較快，花后40～60 d后則發(fā)育較為緩慢（見圖2和圖3）。

2.2 妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過程中糖酸含量的變化

在果實(shí)發(fā)育過程中，果皮糖含量一直低于4 mg/g，且隨果實(shí)發(fā)育略有差異。果肉中糖含量隨著果實(shí)發(fā)育顯著增加，其由花后50 d的4.51 mg/g遞增到果實(shí)著色后的18.85 mg/g（圖4）。果實(shí)酸含量則隨著果實(shí)發(fā)育逐漸降低。果皮酸含量由花后10 d的 1.29 g/hg遞減到果實(shí)著色后0.41 g/hg，果肉酸含量下降得更為顯著，由花后50 d的5.58 g/hg降低到果實(shí)著色后0.57 g/hg的水平（圖5）。

2.3 妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過程中Vc及MDA含量的變化

由圖6可知，妃子笑果實(shí)發(fā)育過程中，果皮與果肉Vc含量的變化趨勢(shì)存在差異。果皮中Vc的含量相對(duì)較低，且其含量隨著果實(shí)的發(fā)育變化略有差異。果肉中Vc含量相對(duì)較高，且隨著果實(shí)的發(fā)育顯著增加。花后40～50 d與花后70 d到果實(shí)著色為果肉Vc含量的2個(gè)快速增長(zhǎng)期。在40～50 d果肉Vc含量的快速增長(zhǎng)期，Vc含量由 2.95 mg/hg FW增加至22.66 mg/hg FW；在花后70 d到果實(shí)著色期，Vc含量由 25.91 mg/hg FW增加至44.36 mg/hg FW；而介于2個(gè)快速增長(zhǎng)期之間即花后50～70 d為果肉Vc含量的幾無差異。同時(shí)，果皮與果肉中氧化產(chǎn)物MDA含量的變化趨勢(shì)同樣存在差異。果皮中MDA含量維持在0.03 ～0.05 μmol/g FW的較低水平，且其含量同樣在果實(shí)發(fā)育過程中略有差異。果肉中MDA含量變化則隨果實(shí)的發(fā)育顯著降低，其含量從花后40 d的0.22 μmol/g FW逐漸降低到著色后0.02 μmol/g FW（圖7）。

2.4 妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過程中SOD及POD活性的變化

果皮中SOD活性隨著果實(shí)的發(fā)育下降。果皮SOD活性由花后30 d的10 250.59 U/g FW降低到未著色時(shí)期的8 832.15 U/g FW。果肉SOD活性低于果皮，且其活性隨果實(shí)的發(fā)育降低。花后50 d果肉SOD活性為4 973.99 U/g FW而著色前期果肉SOD活性則降到2 628.84 U/g FW（圖8）。與SOD活性相反，果皮與果肉中POD活性的變化趨勢(shì)存在差異。果皮POD活性隨果實(shí)的發(fā)育上升，花后30 d果皮POD活性為56.56 △OD470/（min·g FM）至果實(shí)著色前期果皮POD活性達(dá)329.44 △OD470/（min·g FM）。果肉POD活性隨果實(shí)的發(fā)育變化不顯著，從花后50 d至著色前期果肉POD活性在50 △OD470/（min·g FM）左右波動(dòng)（圖9）。

3 討論與結(jié)論

綜合果實(shí)發(fā)育過程中重量、體積及橫縱徑的變化趨勢(shì)可知，妃子笑果實(shí)發(fā)育大體表現(xiàn)為初期緩慢，中期加快，至果實(shí)著色前后趨于穩(wěn)定。此結(jié)果說明妃子笑果實(shí)的發(fā)育與蘋果、梨、白蘭瓜等果實(shí)發(fā)育特征類似，呈單S曲線。同時(shí)，果核橫縱徑的變化顯示其發(fā)育特征呈雙S曲線，花后20～40 d與花后60～70 d為果核發(fā)育較快，花后40～60 d果核的發(fā)育則相對(duì)較緩。果實(shí)與果核發(fā)育不同步的結(jié)果間接證明了花后40 d為妃子笑果肉物理發(fā)育的關(guān)鍵期。果肉糖酸含量是衡量果實(shí)風(fēng)味品質(zhì)的最重要指標(biāo)[12-14]。妃子笑荔枝果實(shí)發(fā)育過程中糖酸含量的變化趨勢(shì)說明，相對(duì)于花后前40 d、花后50 d到著色期間是果肉風(fēng)味形成的主要時(shí)期，此階段內(nèi)果肉糖含量迅速升高，酸含量則逐漸下降。綜合果肉物理性狀與品質(zhì)性狀結(jié)果，表明花后40 d至果實(shí)著色為妃子笑果肉發(fā)育與品質(zhì)形成的最重要時(shí)期。

MDA是生物體內(nèi)自由基作用于脂質(zhì)發(fā)生過氧化反應(yīng)的產(chǎn)物，Vc、SOD、POD則具有清除植物體內(nèi)自由基的功能[15-17]。因此，果實(shí)發(fā)育過程中，MDA含量的變化間接反映果實(shí)不同發(fā)育階段自生清除氧化自由基的能力；Vc含量、SOD及POD活性的測(cè)定則直接說明3種功能物質(zhì)清除氧化自由基的水平。從花后10 d到果實(shí)著色過程中，果皮MDA的含量相對(duì)穩(wěn)定，但3種清除自由基的功能組分Vc含量、SOD及POD活性則隨著果實(shí)的發(fā)育而變化。從花后10 d到果實(shí)著色過程中，果皮Vc含量和SOD活性逐漸下降，果皮POD活性則逐漸上升。與果皮中MDA含量相對(duì)穩(wěn)定不同，從花后40 d到果實(shí)著色，果肉MDA的含量逐漸下降。同時(shí)，果肉中Vc含量上升顯著，SOD活性下降，POD活性則表現(xiàn)相對(duì)穩(wěn)定。此結(jié)果表明，果實(shí)發(fā)育過程中果皮和果肉具有不同的清除自由基模式，果皮清除自由基的能力相對(duì)均衡，但果實(shí)發(fā)育后期，果皮中POD為主要清除自由基的功能組分，而隨著果實(shí)發(fā)育果肉清除自由基的能力逐漸加強(qiáng)，且此能力與果實(shí)發(fā)育過程中Vc含量的增加相關(guān)。

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