導致馬立克疫苗免疫失敗的原因分析

田偉 仇錚 姜麗萍 叢秋實

摘 要：雞馬立克氏病是雞的主要傳染病之一，雞馬立克病疫苗的預防接種是控制疾病的主要手段，而在其使用過程中經常出現免疫失敗的現象，本文系統的闡述了導致馬立克疫苗免疫失敗的原因進行分析，為雞馬立克氏疫苗的正確使用提供幫助。

關鍵詞：雞馬立克氏病；雛雞；免疫失敗

雞馬立克氏病（MD）是一種高度接觸性傳染性腫瘤性疾病，主要以內臟、肌肉、皮膚淋巴瘤的形成和周圍神經的淋巴細胞浸潤和增生為其病理特征。馬立克氏病病毒（MDV）屬于B群皰疹病毒，具有很強的細胞結合特性，體內病毒存在于白細胞及腫瘤中，羽毛囊中的成熟病毒是主要傳染源。病雞和隱性感染雞群可長期帶毒并排毒，病毒在羽毛囊上皮細胞可進行復制形成有感染力的完全病毒，其對外界有極強的抵抗力。病毒隨脫落的羽毛或皮屑等污染糞便、墊料、塵埃、空氣、飼養用具、人員服裝、鞋帽等，并可在室溫下存活長達6個月。病毒感染方式主要通過經呼吸道感染，與病雞直接或間接接觸的健康雞群，也能受到感染。馬立克氏病病毒不能經蛋傳遞，種蛋蛋殼表面如沾有攜帶成熟病毒的羽毛，則可造成傳染。

馬立克氏病毒最容易感染育雛期的雛雞，被病毒感染后的雛雞，要經較長的潛伏期才能表現癥狀。自然感染的病例，最早發病的時間在3周齡以后，整個育成期及開產后一個時期內都能夠發生馬立克氏病，但以2～5月齡發病率最高。馬立克氏病有多種病型，根據臨床癥狀和病理變化的不同，馬立克氏病可分為神經型、眼型、皮膚型、急性內臟型和混合型。

1 馬立克疫苗概述

MD分為3個血清型，血清Ⅰ型是致腫瘤的高致病力血清型，血清Ⅱ型為無致病力的自然弱毒，血清Ⅲ型為火雞皰疹病毒。MDV感染雞后，既可產生體液免疫，又可產生細胞免疫，但以細胞免疫為主。

火雞皰疹病毒疫苗可抵抗MDV標準強毒攻擊，但對超強毒株攻擊的保護率低于70%。主要為Fc126株的低代次種毒制苗，如果過度傳代（約70代以后），則失去保護力。

血清Ⅰ型疫苗毒株主要有R2/23（美國超強毒Md11細胞培養致弱株）及來自荷蘭自然弱毒株CVI988。因CVI988克隆株效果于HVT相當，現階段國內主要使用CVI988非克隆株，其效果優于HVT和血清Ⅱ型毒株，CVI988也必須在液氮中保存。

血清Ⅱ型毒株主要用SB- 1株和Z4株病毒制造疫苗。通過接觸性傳播，能從羽毛囊上皮中排毒。通常與HVT疫苗聯合使用抵抗超強毒的感染，這可能對疫苗接種有輔助作用。但值得注意的是，某些品種雞可以被血清Ⅱ型疫苗激發淋巴細胞白血病的發生（普遍認為MDV能夠激活淋巴性白血病病毒在宿主染色體上的前病毒DNA的LTR啟動子）。

疫苗免疫是防控馬立克氏病的關鍵措施。當前，用于制造馬立克疫苗的病毒主要有3種，分別為人工致弱的MDV1（如CVI988）、MDV2和HVT。現階段國內多應用Ⅰ型（CVI988/Rispens）、火雞皰疹病毒（Fc126）與Ⅰ型+Ⅲ型液氮保存疫苗。Ⅰ型雞馬立克氏液氮疫苗（CVI988/Rispens）是一種細胞結合病毒，是將病毒接種于雞胚成纖維細胞后培養，經過消化，收獲離心沉淀細胞。之后，按一定比例混合，加入適量細胞凍存液，最后經程序降溫而制成。為保證細胞活性，只能放在-196℃的液氮中保存，出廠的時候必須放置在液氮罐里，使用的時候，要用38度的溫水迅速解凍，以保證細胞的存活率。經檢測，Ⅰ型雞馬立克氏液氮疫苗具有安全、免疫效力高和無外源病原污染等優點。在疫苗使用過程中，疫苗從液氮中取出過程的時間、融解水溫、稀釋后放置時間、稀釋液溫度和pH值等因素的變化均可能對疫苗的效價產生一定程度的影響。

2 導致馬立克氏病免疫失敗的原因

2.1 雞群雞體方面

2.1.1 雞群的機體素質

雞群接種疫苗或抗原后產生免疫力的能力不同，這直接和疫苗的接種效果有關，例如許多先天弱雛接種馬立克疫苗后并沒有產生足夠的抗體，并未對雞群形成有效的保護，當環境中有馬立克氏病毒的存在，很容易感染并在相應的日齡發病。

2.1.2 品種因素

MDV易于感染雞群，但是火雞、山雞和鵪鶉等較少感染，每個品種雞群對馬立克氏病毒的易感性均不同，這就導致了易感的雞群由于有較低的抵抗力而易于發病。

2.1.3 免疫抑制作用

免疫系統是指參與免疫反應的各種細胞、組織和器官，對于禽類的免疫系統主要包括法氏囊、胸腺與淋巴結。以上組分作為機體免疫功能的基本保證，其任何一部分的缺陷都將引起免疫功能障礙，喪失抵抗感染能力，而形成免疫抑制性性疾病。而當雞群出現了免疫抑制病的存在，T細胞與B細胞等相關的免疫細胞受到抑制作用而失去免疫功能，導致疫苗免疫后不能產生相應的抗體。

2.1.4 母源抗體的干擾

眾所周知，母源抗體可對活疫苗免疫產生干擾，同樣，母源抗體對同源MD疫苗有干擾作用，能夠影響MD疫苗的效果。此外，對于弱毒株，母源抗體有中和作用。

2.2 環境因素

2.2.1 孵化場環境因素

雛雞出殼后應立即注射MD疫苗，盡早注射MD疫苗，有利于疫苗的表達。孵化場作為雛雞的第一個生活環境，若孵化場中含有馬立克氏病毒，雛雞出殼后馬上就會感染病毒。因此必須做好孵化場的環境消毒與人員消毒。

2.2.2 免疫空白期間感染

1日齡雛雞接種馬立克氏疫苗后，需要1～2周時間才能產生保護作用，而在這1～2周期間視為免疫空白期，一旦環境中有馬立克氏病毒的存在，易感雞群感染疾病的概率相應加大。

2.2.3 飼養環境

良好的飼養環境是控制疾病的必要途徑，加強飼養管理等綜合措施可以保證雞群生長發育的正常，并能維持良好的體況，減少疾病發生的概率，減少死淘率。嚴格生產區和非生產區的消毒制度，嚴格出入人員的消毒，嚴格按照免疫程序免疫雞群，減少應激，提高飼養管理水平等綜合措施是有效地防制馬立克氏病的重要手段。

2.3 疫苗使用方面

2.3.1 疫苗的選購

目前，在部分地區市面上沒有正規批文的疫苗仍在廣泛的流行。這些疫苗往往因為價格低廉而受到了很多養殖戶的青睞。但這些疫苗往往在抗原種類、含量、佐劑、是否SPF與微生物污染程度等存在嚴重的質量問題，養殖戶使用后常造成應激大、抗體水平整齊度差等而易發病或直接導致發病情況，造成重大經濟損失，因此選擇合格廠家的疫苗產品尤其重要。

2.3.2 疫苗的保存與運輸

雞馬立克凍干疫苗沒有按使用說明書中要求溫度保存，直接影響免疫效果。雞馬立克液氮疫苗保存不善，液氮罐中液氮不足或保存中液氮罐傾斜，導致液氮水平面處在疫苗以下，在用稀釋液稀釋疫苗后顏色與正常顏色不符，均會導致免疫的失效。同時，對疫苗的稀釋后長時間未用疫苗，運輸時間過長，中途周轉次數過多，使活毒疫苗抗原失活，使疫苗的效價下降，影響疫苗的免疫效果。

2.3.3 免疫操作不規范

對于液氮疫苗，在應用過程中應嚴格按照廠家說明使用。從液氮罐中小心取出疫苗安瓿應確保所有安瓿瓶均在液氮面以下。立即放入37℃的溫水中解凍，此過程最好在10 s內完成。然后把安瓿放在37℃的溫水中輕搖，并應在90 s內使安瓿中疫苗完全解凍。從取出疫苗安瓿至疫苗溶液配制完畢不應超過2 min。配好后立即使用，皮下或肌肉注射，每羽0.2 mL。應在1 h內用完，使用過程中每10～15 min輕搖瓶子一次，保持疫苗溶液混合均勻。

2.3.4 疫苗的免疫效力

CVI988馬立克氏病疫苗的蝕斑數要求在2 000（DFU）以上，Fc126株的蝕斑數要求在1 000（DFU）以上。大劑量的疫苗有利于早期建立免疫力。HVT疫苗只能防治馬立克氏病發生，卻不能阻止MDV感染，也不能阻止馬立克氏病病毒的傳播和對環境的污染。因而最好是選擇由SPF蛋生產的疫苗。

2.3.5 亂加藥物

在應用過程中，人們往往在馬立克氏病稀釋液中加入其它藥物，例如抗生素和維生素等，這破壞了稀釋液中的pH值而影響馬立克氏病苗的活力。

3 總結

目前，該病仍然嚴重威脅著養禽業的發展，疫苗雖然可以預防馬立克氏病的發生，但免疫失敗時有發生，常常導致本病的局部暴發。雞馬立克氏病疫苗使用是否正確，直接決定疫苗的使用效果。為此，本文闡述常見的馬立克氏疫苗，后在疫苗應用過程中易于造成免疫失敗的原因進行了綜述。因本病無特效治療方法，加強對本病的預防工作具有十分重要的意義。

（編輯：狄慧）