豬變形桿菌病的研究進展

劉澤文　袁芳艷　田永祥等

摘要豬變形桿菌病是由奇異變形桿菌引起的豬的一種細菌性人畜共患傳染病。對奇異變形桿菌的特性、豬奇異變形桿菌的臨床癥狀、病理變化、實驗室診斷和豬奇異變形桿菌病的綜合防治措施等方面進行了綜述，以期為規模化豬場對該病的防治提供借鑒。

關鍵詞豬；奇異變形桿菌；診斷；防治

中圖分類號S828文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）12-03578-02

基金項目湖北省農業科技創新中心資助項目（2011620001003）；動物胚胎工程及分子育種湖北省重點實驗室開放課題（2012ZD156）。

作者簡介劉澤文（1969-），男，湖北赤壁人，副研究員，從事畜禽疾病診斷與預防研究。*通訊作者，研究員，從事畜禽傳染病研究。

變形桿菌（Proteus vulgaris）是人和動物的寄生菌和病原菌。變形桿菌屬于腸桿菌科，包括普通變形桿菌、奇異變形桿菌、莫根變形桿菌、雷極變形桿菌和無恒變形桿菌，其中奇異變形桿菌（Proteus mirabilis，PM）是致病性較為嚴重的致病菌，廣泛分布于人和動物的體表、黏膜及消化道，其產生的毒素可引起中毒，是一種常見的條件性致病菌[1]。當機體免疫力下降時，PM可以感染人和動物，引起發病。我國也有豬[2]、雞[3]和犢牛[4]發生奇異變形桿菌發病的報道。近年來，奇異變形桿菌病已成為危害我國養豬業的一種新的細菌性傳染病[5-6]，由于其還可以引起人類的原發性或繼發性感染，造成人類食物中毒。因此，對這種人畜共患新傳染病應引起高度重視。

1 奇異變形桿菌的特性

豬奇異變形桿菌屬于腸桿菌科、變形桿菌屬，是革蘭氏陰性細菌，有鞭毛，變形桿菌呈明顯的多形性，有球形和絲狀形，大小約（0.4～0.6）μm×（1～3）μm，為周身鞭毛菌，運動活潑。該菌對營養要求不高，在固體培養基上呈擴散生長，形成以菌種部位為中心的厚薄交替、同心圓形的層層波狀菌苔。在培養基中添加0.1%石碳酸或0.4%硼酸，可以抑制其擴散生長，形成一般的單個菌落。在SS平板上可以形成圓形、扁薄、半透明的菌落[7]。培養物有特殊臭味，在血瓊脂平板上有溶血現象。

奇異變形桿菌氧化酶、賴氨酸脫羧酶、吲哚、枸櫞酸、麥芽糖、甘露醇、蔗糖、賴氨酸、鳥氨酸均呈陰性；苯丙氨酸脫氨酶、脲酶、鳥氨酸脫羧酶呈陽性；能發酵葡萄糖，產酸產少量氣；不能發酵乳糖和衛矛醇；不能產生靛基質；有動力；能產生H2S；不能分解枸櫞酸鹽[8]。

2 豬奇異變形桿菌病的臨床診斷

2.1 臨床癥狀發病豬食欲廢絕，皮膚蒼白，被毛粗亂，體溫升高，達42 ℃以上，咳嗽，呼吸加快。當體溫升高至41 ℃以上時，病豬氣喘，呼吸急促，腹式呼吸，犬坐，張口伸舌，肺部聽診，濕性羅音明顯。病初偶有嘔吐，繼而腹瀉。水樣糞便中有黏液，具有腐敗臭味。大多數病豬四肢乏力，步態不穩，腹部皮膚潮紅，眼結膜充血，頸下與腹下發紺。重癥者鼻孔流出泡沫樣黏液。

2.2病理變化病死豬的肺明顯腫脹，呈紅色肝變，觸之堅實，肺的尖葉與心葉彌漫性出血，隔葉有出血斑塊，氣管和支氣管內充以大量白色泡沫樣黏液，肺與心包有的與胸膜粘連。肺門淋巴結腫脹，充、出血，橫切面濕潤，呈大理石樣變。胃黏膜潰瘍，易脫落，胃底部充、出血。空腸與回腸黏膜有微量出血和潰瘍，腸壁增生、腫脹，腸內容物呈灰黃色或黃綠色，附有黏液，且具有特殊氣味，小腸黏膜彌慢性出血。 腸系膜淋巴結水腫， 回盲口無出血。

2.3病理組織學變化取病死豬的肺與腸等組織，用10%甲醛固定，石蠟包埋切片，HE染色，顯微鏡下觀察發現肺細支氣管周圍大量淋巴細胞浸潤，其黏膜上皮壞死、脫落。黏膜下層血管充血，并有多量淋巴細胞和少量單核吞噬細胞浸潤，肺泡壁充血，肺泡內有滲出的細胞，與單核吞噬白細胞形成含鐵血黃素；小腸絨毛上皮壞死、脫落，黏膜層和黏膜下層血管充血，有單核吞噬細胞、嗜酸中性白細胞、酸性白細胞浸潤，腸絨毛和腸腺杯狀細胞明顯擴大；肺門淋巴結、淋巴小結數量增多，明顯擴大，生發中心明顯，淋巴竇內皮活化，有較多的單核吞噬細胞，淋巴結內血管充血；腎小球血管內皮輕度增生，腎小管上皮顆粒變性或壞死，腎小管腔內有尿圓柱；肝淤血，肝細胞變性。

3 實驗室診斷

3.1 細菌分離與鑒定分離細菌可用病豬的胃、小腸、盲腸內容物及結腸黏膜、腸系膜淋巴結、肺臟及肺門淋巴結等。無菌采集病豬病料，分別接種于鮮血瓊脂平板和普通肉湯培養基中，將接種的鮮血瓊脂平板放置于37 ℃下培養24 h后，可見由細菌接種點向周圍遷徙性擴散生長的灰色平鋪菌落，且以接種點為中心形成水波紋狀圓心圈，覆蓋整個平板上；另外，血平板變黑，散發出特殊的腐敗性臭味。普通肉湯培養基于37 ℃下培養24 h后呈均勻混濁樣，并有氣泡產生。培養物經革蘭氏染色，油鏡觀察均可見革蘭氏陰性桿菌，大小不等但較為一致，無芽孢和莢膜。分離的細菌接種于麥康凱平板中，沒有粉紅色菌落形成。

3.2生化鑒定將分離的細菌按照豬奇異變形桿菌的生化特性進行生化試驗，應與該菌的生化特性相符合。

3.3動物致病性試驗取已培養24 h的肉湯培養物按照0.2 ml/只的劑量腹腔注射試驗組小白鼠4 只；對照組4只小白鼠則腹腔注射生理鹽水0.2 ml/只。試驗組小白鼠在接種肉湯培養物后24～48 h期間相繼出現腹瀉癥狀，并陸續全部死亡。對照組小白鼠沒有異常表現。取死亡小白鼠的肝臟接種于鮮血瓊脂平板中，于37 ℃下培養24 h后可見鮮血瓊脂平板上生長有遷徙性擴散的灰色平鋪菌落。取該灰色平鋪菌落進行革蘭氏染色并鏡檢，可見革蘭氏陰性、大小不等的桿菌。對照組的小白鼠的肝臟接種于鮮血瓊脂平板中，37 ℃恒溫箱培養24 h后沒有觀察到任何菌落。

3.4奇異變形桿菌的分子生物學檢測林紅樂等[9]針對編碼奇異變形桿菌脲酶調節子的基因序列設計2條PCR引物，擴增片段長度為225 bp，結果發現PCR檢測PM的結果與傳統培養方法一致，PCR方法較傳統培養方法更加快捷，在4 h內即可完成擴增反應，PCR方法敏感度可達30 cfu/ml。蘇良等[10]也針對奇異變形桿菌脲酶調節子編碼基因特異性序列的6個位點設計4條LAMP引物，建立一種檢測奇異變形桿菌快速且特異的環介導等溫擴增（LAMP）檢測方法，該方法檢測奇異變形桿菌的特異性與普通PCR相同，但其敏感性比普通PCR 高10倍，且檢測速度更快，在 60 min內即可完成擴增反應。

4豬奇異變形桿菌病的防治措施

雖然該病已經成為危害養豬業較為嚴重的一種新的細菌性傳染病，但其重要性還未引起養豬行業的足夠重視，還未研制出有效的疫苗對該病進行預防，因此該病的防治只能從加強飼養管理和進行藥物治療2個方面進行。

4.1飼養管理措施預防該病首先必須加強生物安全管理和改善飼養管理，對環境、飼料、飲水供應等的管理應嚴格加強，改善豬舍的衛生條件，特別注意通風、保持干燥、防寒及降低飼養密度。在各階段都盡量實行全進全出，以便豬舍在全部豬出欄后徹底消毒7 d以上。

4.2藥物治療豬變形桿菌容易對臨床常用的抗生素產生耐藥性。夏修三等[11]對從人體內分離的28株奇異變形桿菌進行了藥敏試驗，結果表明奇異變形桿菌對一代頭孢菌素頭孢唑啉耐藥率為100%，對二代頭孢呋辛的耐藥率為51.9%，對氨芐西林的耐藥率為73.7%，對諾氟沙星的耐藥率為50%。因此在確診該病病原以后應根據細菌的藥敏試驗結果選用敏感的抗菌藥物進行預防和治療。對有嚴重脫水的仔豬則另外加服補液鹽水和電解多維溶液。為了預防該病的再次發生，養殖場也可在飼料中添加適量的敏感抗菌藥物進行預防。

參考文獻

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