豬瘟和偽狂犬活疫苗 幾種免疫方式的免疫效果評價

林德銳 皇培剛 羅文瓊 常晗蕾

摘要：為了評價豬瘟和偽狂犬活疫苗的免疫效果，采用豬瘟活疫苗（傳代細胞源）和偽狂犬活疫苗（Bartha-K61株）對35～40日齡豬瘟和偽狂犬母源抗體陰性的健康仔豬分為4組，分別進行單獨注射、分點同時注射與混合注射，觀察各組注射后的副反應，并對不同時期的抗體用ELISA試驗檢測血清抗體效價來評價其免疫效果。試驗結果表明，兩種疫苗同時分點注射和混合注射，相互間的干擾很小，兩種疫苗同時注射不影響各自免疫抗體的產生，原因可能是兩疫苗共同刺激動物的免疫器官后有提高動物產生免疫抗體的作用[1]。

關鍵詞：豬瘟；偽狂犬；注射；免疫效果；疫苗豬瘟和豬偽狂犬病是目前危害養豬業的主要傳染病，給養豬業帶來巨大的經濟損失[2],特別是近幾年，豬偽狂犬病在國內有擴大流行的勢頭，一旦豬瘟和偽狂犬病同時爆發，將給豬場帶來毀滅性的打擊。本試驗用豬瘟活疫苗（傳代細胞源）、偽狂犬活疫苗（Bartha-K61株）單獨注射、分點同時注射和混合注射健康易感仔豬，了解抗體產生的時間和抗體水平，從而評價幾種免疫方式的免疫效果差異。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1 疫苗及稀釋液

豬瘟活疫苗（傳代細胞源）：云南生物制藥有限公司生產，批號：2013021，病毒效價：18 000 RID/頭份，生產日期：2013年7月15日。

偽狂犬活疫苗（Bartha-K61株）：云南生物制藥有限公司生產，批號：2013001，病毒效價：106.0TCID50/頭份，生產日期：2013年4月19日。

豬用活疫苗專用稀釋液：云南生物制藥有限公司生產，批號：20130516，生產日期：2013年5月16日。

1.1.2試驗地點

昆明市嵩明楊林青石山豬場，豬場疫病預防控制較好，具備試驗條件。

1.1.3試驗動物

從90頭35～40日齡仔豬中用豬瘟抗體ELISA檢測試劑盒（IDEXX）及偽狂犬抗體ELISA檢測試劑盒（IDEXX）檢測，選擇出52頭豬瘟母源抗體、偽狂犬母源抗體均為陰性的健康仔豬。

1.1.4診斷試劑

豬瘟ELISA抗體檢測試劑盒、豬偽狂犬ELISA抗體檢測試劑盒購自北京愛德士生物科技有限公司。

1.2方法

1.2.1試驗分組及接種

隨機分為4個組，每組13頭豬，頸部肌肉注射，分組及免疫劑量如下：

豬瘟活疫苗（傳代細胞源）試驗組：按1頭份/mL濃度稀釋疫苗給每頭仔豬注射豬瘟活疫苗1 mL；

偽狂犬活疫苗（Bartha-K61株）試驗組：按1 頭份/mL濃度稀釋疫苗給每頭仔豬注射偽狂犬活疫苗1 mL；

豬瘟活疫苗（傳代細胞源）+ 偽狂犬活疫苗（Bartha-K61株）分點同時注射試驗組：按1頭份/mL濃度分別稀釋兩種疫苗，在該組每頭仔豬的不同部位分別注射豬瘟活疫苗和偽狂犬活疫苗1 mL；

豬瘟活疫苗（ST）+ 偽狂犬活疫苗（Bartha-K61株）混合注射試驗組：按照0.5頭份/mL濃度混合稀釋豬瘟和偽狂犬活疫苗，給每頭仔豬注射2 mL。

1.2.2二次免疫

首次免疫接種后35 d，以2頭份/mL稀釋疫苗，對每個試驗組的6頭(一半)豬按一免方法進行二免（二免免疫一半主要是想了解豬只在二免的情況下抗體的變化，并與一免進行對比；計算數值時，因二免每組免疫了6只仔豬，一免的豬只按剩下的7只計算，二免按6只計算）。

2試驗結果

2.1免疫副反應

免疫后的仔豬進行免疫接種副反應觀察，觀察注射2 d內均無過敏反應、嘔吐、抽搐、休克等癥狀。

2.2 免疫效果檢測

在首次免疫接種后28 d、42 d、56 d、70 d，進行采血分離血清，分別采用IDEXX公司抗體檢測試劑盒及相應方法分別檢測豬瘟免疫抗體及偽狂犬病免疫抗體滴度，進行抗體陽性率、抗體滴度平均值，綜合判斷免疫效果。檢測方法按試劑盒操作方法進行并判定，結果如下：

2.2.1單獨注射豬瘟活疫苗（傳代細胞源）豬瘟注射抗體檢測結果（豬瘟抗體阻斷率%）

2.2.2單獨注射偽狂犬病活疫苗免疫抗體檢測結果

2.2.3 豬瘟活疫苗（傳代細胞源）+ 偽狂犬病活疫苗分點同時注射試驗組檢測結果

2.2.3.1豬瘟免疫抗體檢測結果（豬瘟抗體阻斷率%）

2.3.3.2偽狂犬病免疫抗體檢測結果

2.3.4豬瘟活疫苗（傳達細胞源）+偽狂犬病活疫苗混合注射試驗組檢測結果

2.3.4.1豬瘟免疫抗體檢測結果（豬瘟抗體阻斷率%）

2.3.4.2偽狂犬病免疫抗體檢測結果

3分析與討論

3.1對豬瘟免疫抗體的分析與討論

3.1.1單獨注射

由表1可以看出：一免28 d后抗體阻斷率平均值為62.0%以上，陽性率為100%；

一免后35 d取其中一半（6頭）進行二免。一免后42 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為72.6%，陽性率為100%；二免后7 d抗體阻斷率平均值為82.3%，陽性率為100%。一免后56 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為76.2%，陽性率為100%；二免后21 d抗體阻斷率平均值為84.50%，陽性率為100%。一免后70 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為54.2%，陽性率為85.7%；二免后35 d抗體阻斷率平均值為73.50%，陽性率為100%。

一免后42 d前抗體陽性率均為100%，但一免后56 d及一免后70 d測抗體時，一免陽性率僅為85.7%，而二免后7 d、21 d、35 d陽性率仍為100%。

由此看出，單獨注射瘟活疫苗（傳代細胞源）時，二免抗體明顯好于一免，但到56 d時，一免抗體已開始下降，需進行二免。

3.1.2分點同時注射

由表3可以看出：

一免后28 d，抗體阻斷率平均值為65.3%以上，陽性率為83.3%；

一免后35 d取其中一半（6頭）進行二免。一免后42 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為78.5%，陽性率為100%；二免后7 d抗體阻斷率平均值為78.9%，陽性率為100%。一免后56 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為80.5%，陽性率為100%；二免后21 d抗體阻斷率平均值為82.1%，陽性率為100%。一免后70 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為73.7%，陽性率為100%；二免后35 d抗體阻斷率平均值為75.9%，陽性率為100%。

一免后42 d后抗體陽性率均為100%，一免和二免抗體阻斷率差別不大。

3.1.3豬瘟活疫苗（傳代細胞源）+偽狂犬病活疫苗混合注射

由表5可以看出：

一免后28 d后抗體阻斷率平均值為58.6%以上，陽性率為100%；

一免后35 d取其中一半（6頭）進行二免。一免后42 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為77.1%，陽性率為100%；二免后7 d抗體阻斷率平均值為79.4%，陽性率為100%。一免后56 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為85.1%，陽性率為100%；二免后21 d抗體阻斷率平均值為85.3%，陽性率為100%。一免后70 d采血測抗體，一免抗體阻斷率平均值為71.7%，陽性率為100%；二免后35 d抗體阻斷率平均值為73.2%，陽性率為100%。