青海省玉樹州羊泰勒蟲感染血清學調查

尕松代

摘 要：為了掌握玉樹州羊群的泰勒蟲感染情況，為羊梨形蟲病的防治提供依據，我們采用ELISA方法對玉樹州五縣一市的養殖場羊群進行了泰勒蟲感染概況的調查。結果顯示768份豬血液樣品中，共檢測到382份血清樣品呈泰勒蟲血清抗體陽性，陽性率為49.74%，處于較高的感染水平，表明羊泰勒蟲病在玉樹州羊群中流行相當嚴重，應采取滅蜱和藥物治療羊體內原蟲相結合方法防治羊泰勒蟲病。

關鍵詞：梨形蟲；感染率；血清學；ELISA

梨形蟲病又稱“焦蟲病”，可導致山羊和綿羊發熱、消瘦、黃疸、貧血及血紅蛋白尿等癥狀，甚至導致羊只的死亡。梨形蟲病是一種傳染病，但是其又不同于某些其他的傳染病，不能直接感染山羊或綿羊，必須通過適宜的蜱宿主作為媒介才能傳播[1]。由于媒介蜱的活動具有明顯的區域性和季節性，因此羊梨形蟲的流行也具有明顯的地區性和季節性[2]。為了掌握玉樹州羊泰勒蟲感染情況及制定有效防治措施，我們采用血清學的方法對玉樹州的羊泰勒蟲感染情況進行了調查。

1 材料與方法

1.1 材料

羊血清泰勒蟲抗體ELISA試劑盒（20111）購自中國農科院蘭州獸醫所，主要用于檢測羊血清或血漿中的泰勒蟲特異性抗體，評估羊養殖場泰勒蟲感染狀況。我們于2012年的6月-2013年9月于玉樹州5縣1市的羊養殖場采集血液，每只羊采集3～5 mL血液，待血液凝固析出血清后，以2 500 r/min離心5 min，分離血清，-20℃保存備檢。

1.2 方法

1.2.1 樣品制備

用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋（如2 μL血清加入198 μL樣品稀釋液中，混勻）。陰、陽性對照不用稀釋。

濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解，然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。

1.2.2 檢驗方法

使用前將試劑盒置室溫30 min，恢復至室溫。取所需用量酶標板條，設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。空白對照孔加樣品稀釋液100 μL；陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100 μL；樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100 μL。 混勻，置37℃反應30 min后洗滌（扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置30 s后棄去，重復洗滌5次，拍干）。每孔加酶標記物100 μL（空白孔除外）。置37℃反應30 min后再次洗滌。每孔依次加底物液A、底物液B各50 μL，混勻，37℃避光反應10 min。每孔加終止液50 μL，混勻，用空白孔調零，于450 nm（可用630 nm作參比波長）測定各孔吸光值（OD值）。

1.2.3 結果判定

試驗有效性：陽性對照孔平均值≥1.00，陰性對照平均值≤0.10，臨界值（CUT OFF）計算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15；陰性判定：樣品OD值<臨界值（CUT OFF）者為羊泰勒蟲血清抗體陰性，陽性判定：樣品OD值≥臨界值（CUT OFF）者為羊泰勒蟲血清抗體陽性。

2 結果

通過本次調查，我們明確了青海玉樹州五縣一市的羊泰勒屬梨形蟲的感染概況，調查結果顯示在玉樹州五縣一市所收集到768份羊血液樣品中，共檢測到382份血清樣品呈羊泰勒蟲血清抗體陽性，羊泰勒蟲血清抗體陽性率為49.74%；玉樹市、雜多縣、稱多縣、治多縣、囊謙縣及曲麻菜的豬弓形蟲血清抗體陽性率分別為47.20%、55.75%、51.66%、44.20%、47.31%及53.57%，經統計學分析不同縣、市間的羊泰勒蟲感染的血清學陽性率無統計學差異（P>0.05）。

3 討論

當前經報道感染羊的泰勒蟲共有6個種，分別為萊氏泰勒蟲、分離泰勒蟲、隱藏泰勒蟲、綿羊泰勒蟲、呂氏泰勒蟲及尤氏泰勒蟲。其中萊氏泰勒蟲、分離泰勒蟲、隱藏泰勒蟲和綿羊泰勒蟲主要經國外學者報道，在我國并沒有羊只感染的報道；呂氏泰勒蟲和尤氏泰勒蟲主要在我國的羊群中分布感染，且已證實是兩個新種[2]。在此為了掌握玉樹州羊泰勒蟲感染情況及制定有效防治措施，我們采用血清學的方法對玉樹州的羊泰勒蟲感染情況進行了調查。結果顯示玉樹州五縣一市所收集到768份羊血液樣品中，共檢測到382份血清樣品呈羊泰勒蟲血清抗體陽性，羊泰勒蟲血清抗體陽性率為49.74%，呈現了較高的感染率。

羊泰勒蟲主要由青海血蜱和長角血蜱傳播，據以往的報道玉樹州優勢蜱種也為青海血蜱和長角血蜱，因此滅蜱是防治泰勒蟲病最有效的措施。然而，當前該病尚無有效的疫苗進行預防，藥物防治效果也差強人意，因此根據蜱傳播羊泰勒蟲病的特征，采取體表及放牧環境滅蜱和藥物治療羊體內病原相結合的方法是從根本上防治羊泰勒蟲病的有效措施，所以我們應每年在蜱活躍季節對羊進行藥浴，殺滅體表蟲體，同時對羊群進行泰勒蟲感染的藥物預防。（編輯：狄慧）

參考文獻：

[1] 羅建勛， 殷宏， 劉光遠， 等.我國牛羊梨形蟲病病原的收集與鑒定[J].中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志， 2006， 12（S1）： 48-53.

[2] 馬米玲， 羅建勛， 關貴全，等.羊泰勒蟲病血清學調查[J].中國獸醫學報， 2009， 29（12）： 1575-1581.