尼莫地平緩釋制劑對家兔血管刺激性試驗

阮莉莎　谷勇

摘要[目的]采用家兔耳緣靜脈注射法考察尼莫地平緩釋制劑對家兔血管刺激性試驗。[方法]將家兔分為陰性對照組（生理鹽水組）、尼莫地平注射液組和尼莫地平緩釋制劑組，分別通過耳緣靜脈注射，給藥劑量為0.5 mg/kg。[結果]生理鹽水組和尼莫地平緩釋制劑組沒有出現明顯的血管刺激現象，而尼莫地平注射液組出現強烈的血管刺激現象。[結論]尼莫地平緩釋制劑與原制劑尼莫地平注射液相比，有效降低了家兔血管刺激性，為其臨床上廣泛應用提供了一定基礎。

關鍵詞尼莫地平緩釋制劑；血管刺激性；家兔

中圖分類號S829.1文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）23-07781-01

作者簡介阮莉莎（1981-），女，四川自貢人，講師，從事生理學方面的教學科研工作。

收稿日期20140709 目前，市售尼莫地平注射液由于含有40% 有機溶劑： 23.7% （v/v） 乙醇和17% （v/v） PEG400，在臨床使用過程中容易引起注射疼痛和在注射部位發生局部炎癥，進而導致患者順應性低，甚至導致靜脈炎[1]。

筆者在血管刺激性研究中主要參照文獻以及《化學藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術指導原則》等評價了血管刺激性的癥狀，同時觀察了動物注射部位耳緣靜脈的病理切片，綜合評價并比較了尼莫地平緩釋制劑與市售尼莫地平注射液的血管刺激性。

1材料與方法

1.1試驗儀器戴安高效液相色譜儀P680A四元低壓梯度泵、PDA-100二極管陣列檢測器、TCC-100柱溫箱、Chromeleon色譜工作站；瑞士Precisa電子天平（XR 205SM-DR）；Rota vapor R-114旋轉蒸發儀（Büchi， Switzerland）；Water bath B-480 （Büchi， Switzerland）；pH計 （HSP0113R， Heroways）；RM2235型石蠟切片機（Leica， German）；Axiovert200型顯微鏡（Zeiss， German）。微量輸液泵 （成都豪乙生物科技有限公司）；一次性使用靜脈輸液針（成都市新津事豐醫療器械有限公司，國食藥監械準字2010第3150406號）。

1.2主要試劑與藥物 尼莫地平對照品（中國藥品生物制品檢定所，100270-200002）；尼莫地平注射液（山西亞寶藥業集團股份有限公司，國藥準字H20034057）；氯化鈉注射液（太極西南藥業股份有限公司，國藥準字H50021611，產品批號1191022）； 甲醇和乙腈均為色譜純，其余試劑均為分析純；水為超純水。

1.3實驗動物12只新西蘭大耳家兔，體重（2.0±0.5）kg，雄性由宜賓衛生學校動物中心提供。

1.4試驗方法

1.4.1尼莫地平緩釋制劑的制備。參照文獻和預試驗，采用共沉淀法制備尼莫地平混合膠束，具體制備方法為：稱取處方量的尼莫地平原料藥、蛋黃卵磷脂（EPC）、甘氨膽酸（SGC），置于圓底燒瓶（25 ml）中，加入一定體積的無水乙醇充分溶解，超聲分散均勻。60 ℃旋轉蒸發除去有機溶劑，形成1層透明薄膜。再用含一定濃度的NaOH的生理鹽水溶解，調節pH。12 000 r/min離心5 min，除去不溶解的藥物，上清液即為尼莫地平緩釋制劑的分散體溶液[2]。

1.4.2血管刺激性試驗。設定生理鹽水為陰性對照，選用耳緣靜脈作為用藥部位。12只家兔（體重2.5～3.0 kg）隨機分為2組：Ⅰ組注射氯化鈉注射液；Ⅱ組注射尼莫地平注射液；Ⅲ組注射尼莫地平緩釋制劑。每只家兔按0.5 mg/kg給藥，按臨床上給藥方式，連續靜脈滴注7 d。尼莫地平注射劑和生理鹽水的體積一致。

每天給藥前以及最后1次給藥后48 h對家兔進行肉眼觀察[2]。48 h后處死動物，并進行組織病理學檢查。2周后繼續觀察剩余動物，并進行組織病理學檢查。

處死動物后，剪取距注射部位1 cm處兔耳。用生理鹽水清洗血跡，固定于福爾馬林溶液中約48 h。用石蠟包埋，HE染色后光鏡下觀察注射后對兔耳血管的刺激性反應。家兔血管過敏性評價標準為：0級，給藥部位無明顯反應；1級，給藥部位靜脈血管輕度瘀血、紅腫；2級，給藥部位靜脈血管中度瘀血、紅腫；3級，給藥部位靜脈血管重度瘀血，周圍組織嚴重紅腫。

2結果與分析

2.1肉眼觀察結果在尼莫地平輸注過程中動物出現深度呼吸，且極度掙扎；氯化鈉注射和尼莫地平緩釋制劑過程中呼吸平緩，均未出現此現象。