藍莓葉片兒茶素類茶多酚含量分析

王連潤等

摘要[目的] 分析藍莓幼嫩芽葉中的兒茶素類茶多酚成分含量。[方法] 應用高效液相色譜（HPLC） 技術，對南高叢藍莓“夏普藍”葉片兒茶素類茶多酚含量進行了分析。[結果]試驗表明，藍莓幼嫩芽葉含有5種主要兒茶素類茶多酚，分別為兒茶素（C）、表兒茶素（EC）、表兒茶素沒食子酸酯（ECG）、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）、沒食子酸（GA），此外還含有咖啡因（CAF）。[結論]研究可為藍莓作為一種理想的茶用資源植物提供科學依據及植物化學方面的證據。

關鍵詞藍莓；茶多酚；兒茶素

中圖分類號S663.2文獻標識碼

A文章編號0517-6611（2014）28-09918-02

Analysis on the Catechins of Tea Polyphenols in Leaves of Blueberry

WANG Lianrun， LIU Jiaxun*， LIANG Mingtai et al（Institute of Horticultural Crops， Yunnan Academy of Agricultural Sciences， Kunming， Yunnan 650205）

Abstract [Objective] To analyze catechin of tea polyphenols in leaves of blueberry. [Method] The catechins of tea polyphenols in leaves of highbush blueberry “sharplbue” were analyzed with HPLC. [Result] The results showed that， 5 kinds of catechins of tea polyphenols were found in leaves. There are C， EC， ECG， EGCG， GA， in addition， it also contains CAF. [Conclusion] The study can provide scientific basis and phytochemical evidence that bluberry can be as an ideal resources plant used as tea.

Key words Blueberry； Tea polyphenol； Catechin

藍莓（bluberry），又稱為越桔或藍漿果，為杜鵑花科（Ericaeae）越桔屬（vaccinium L）植物。由于對藍莓果實保健意義的科學論證， 尤其是色素在保護視力上的作用， 使藍莓受到越來越廣泛的重視，聯合國糧農組織將其列為人類五大健康食品之一[1]。

茶多酚（TP）是茶葉中一類主要的化學成分，也是茶葉的主要活性成分，占茶葉干重的20%～35%，其主要組分為兒茶素，占其總量的80%左右。茶葉中兒茶素主要為表兒茶素（EC）、表兒茶素沒食子酸酯（ECG）、表沒食子兒茶素（EGC）、表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）等。近年來，大量研究證實TP具有消除自由基、抗氧化等生物活性，在抑菌、抗病毒、抑制腫瘤、防治心血管疾病等方面具有良好功效[2]。筆者通過對藍莓幼嫩芽葉中的兒茶素類茶多酚成分分析，旨在為藍莓作為一種理想的茶用植物提供科學依據及植物化學方面的證據，對進一步挖掘藍莓樹種的潛在價值具有重要意義。

1材料與方法

1.1材料

測試樣品采集于云南省農業科學院園藝作物研究所藍莓試驗基地3年生南高叢藍莓“夏普藍”植株，采集帶2～3片嫩葉的芽，樣品采集后及時送至檢測中心進行檢測前處理。

1.2兒茶素類茶多酚含量測定

1.2.1儀器及分析條件。樣品檢測在中國科學院昆明植物研究所檢測中心進行。分析儀器采用Agilent1100 高效液相色譜儀，色譜柱為ZORBAX SBC18 （250×4.6 mm，5 μm，Agilent公司生產），柱溫為40 ℃。

1.2.2洗脫條件。用乙腈-甲酸緩沖液梯度洗脫，0→5 min為8%乙腈∶92%水（含5%甲酸）；從5～23 min 洗脫液濃度過渡到25%乙腈∶75%水（含5%甲酸）；23～25 min 洗脫液為8%乙腈∶92%水（含5%甲酸）；流速為1 ml/min，檢測波長為280 nm。

1.2.3分析樣品溶液的制備。樣品于60 ℃烘箱干燥，粉碎，從粉碎樣品中準確稱取2.291 g于15 ml容量瓶中，加入甲醇10 ml，搖勻，室溫浸提2 h，超聲提取30 min，加入甲醇定容至15 ml，搖勻，靜置，取上清液經0.45 μm 微孔濾膜過濾，4 ℃條件下保存待測。

2結果與分析

采用高效液相色譜法對南高叢藍莓“夏普藍”的幼嫩芽葉中兒茶素類茶多酚含量進行定量分析，結果表明（圖1），除表沒食子兒茶素（EGC）未能檢測出外，其余5種兒茶素類茶多酚能清晰地相互分開并能準確定量，表明高效液相色譜法用于藍莓幼嫩芽葉中兒茶素類茶多酚含量的定量分析檢測可行、可靠、靈敏。

從表1可以看出，表沒食子兒茶素沒食子酸（EGCG）的含量最高，達1.28%；其次為表兒茶素沒食子酸酯（ECG），含量為0.37%；兒茶素（C）含量較低，僅為0.11%；表兒茶素（EC）、咖啡因（CAF）和沒食子酸（GA）三者的含量均非常低，表沒食子兒茶素（EGC）可能由于含量太低在藍莓幼嫩鮮芽葉中未能檢測出。

3討論

從檢測結果來看，藍莓幼嫩鮮葉中的表兒茶（EC）、沒食子酸（GA）和咖啡因（CAF）3種成分含量較低，這可能與檢測樣品的性狀有關。茶多酚受內外因素的影響變化大 [3]，而茶葉在加工制作過程中要經過高溫殺青（以綠茶為例）、揉捻、烘干等工序而發生復雜的生理生化變化，從而導致兒茶素類茶多酚含量發生變化，兒茶素類茶多酚含量檢測一般采用經過加工制作的成品茶葉[4-6]，故該研究中選用鮮葉進行檢測可能是分析結果含量偏低的原因之一。

茶葉作為一種天然健康的飲料日益受到人們的青睞，咖啡堿是茶葉中一種含量很高的生物堿，一般含量為2%～5%，咖啡堿具有興奮神經、祛除疲勞、增強心血管系統活動等多種保健功效，然而，高劑量攝入咖啡堿會刺激中樞神經，引起人體焦躁不安、心悸失眠、頭痛等癥狀。因此，目前國內外市場對茶葉新的消費需求趨向于飲用不含或少含咖啡堿的茶飲料[5]。該研究結果表明，藍莓幼嫩芽葉中咖啡堿的含量極低，遠低于唐一春等低咖啡堿茶樹種質資源中咖啡堿的含量研究結果[5]。對藍莓莖葉進行化學成分提取、分離及結構鑒定結果表明，藍莓莖葉中含有槲皮素、胡蘿卜苷等大量對人體有益的成分[7]。此外，筆者通過多年的研究發現，在半促成栽培中，南高叢藍莓具有很強的新梢萌芽力，完全可以作為茶用植物進行開發利用。因此，結合該研究對藍莓幼嫩芽葉中的兒茶素類茶多酚成分含量進行定量分析結果，為藍莓作物一種理想的茶用植物資源加以開發利用提供了科學依據及植物化學方面的證據，為藍莓樹種提值增效以及進一步挖掘潛在的利用價值奠定了基礎。

參考文獻

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[2] 劉本英，王平盛.茶多酚生物學活性的研究進展[J].熱帶農業科技，2006，29（2）：28-33.

[3] 金瑩，孫愛東.植物多酚的結構及生物學活性的研究[J].中國食物與營養，2005（9）：27-29.

[4] 郭桂義，嚴佩峰，文宏，等. 安吉白茶與信陽群體種信陽毛尖茶化學成分和品質的比較[J].食品科技，2010，35（6）：118-121.

[5] 唐一春，宋維希，矣兵，等.低咖啡堿茶樹種質資源的鑒定及評價[J].西南農業學報，2010，23（4）：1051-1054.

[6] 張穎君，楊崇仁，曾恕芬，等.白鶯山古茶的化學成分分析與栽培茶樹的起源[J].云南植物研究，2010，32（1） ：77-82.

[7] 王喜軍，范玉玲，閆雪瑩.越桔莖葉化學成分提取、分離及結構鑒定[J].中草藥，2002，33（7）：595-596.