實時熒光PCR用于流感病毒檢測的效果分析

陳燁

【摘 要】 目的 探討和研究實時熒光逆轉錄聚合酶鏈式反應在流感病毒檢測中的應用效果。方法 采用實時熒光PCR對617例流感樣病例患者的咽拭子標本進行流感病毒核酸的測定，對檢測出的陽性標本采用MDCK進行培養并分離，對兩種方法的檢測結果進行分析，對比特異性及靈敏度。結果 本組617例標本中實時熒光PCR共檢測出陽性標本152例，陽性率24.6%；細胞培養法在此152例陽性標本中共分離出流感病毒79例，陽性率12.8%，實時熒光PCR檢測陽性率顯著高于細胞培養法，差異具有統計學意義（P<0.05）。結論 實時熒光PCR能夠快速有效的檢測出流感病毒核酸，是實驗室快速診斷的有效手段。

【關鍵詞】 實時熒光PCR；細胞培養法；；流感病毒

【中圖分類號】 R446.11+3 【文獻標識碼】 B

流行性感冒是臨床上最為常見的急性呼吸道傳染病，主要是由A、B、C三種流感病毒所引起，其中A、B型病毒存在變異大、危害強的特點，對患者的健康造成了很大的威脅[1]。筆者近年來采用實時熒光PCR對A、B型流感病毒進行了檢測，并與細胞培養法進行了對比，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 標本、試劑及器材 標本選取為湖南桃源縣監測哨點醫院在流感爆發時就診的流感樣病例（體溫38℃以上，伴有咳嗽、咽痛等癥狀），共617例患者，取咽拭子標本置于采樣液中，于24h內送至實驗室。選取7500實時熒光定量逆轉錄聚合酶鏈式反應（PCR）檢測系統，RNA提取試劑盒由QIAGEN公司提供，反應試劑盒由北京北瑞達醫藥科技有限公司提供，狗腎傳代細胞（MDCK）由湖南省疾病預防控制中心提供，抗A、抗B系病毒血清均由國家流感中心提供。

1.2 實時熒光PCR檢測 對所采集的617例標……