兩種藏錦雞兒中總黃酮的含量測(cè)定

張幸福

(青海省食品藥品檢驗(yàn)所，西寧 810016)

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兩種藏錦雞兒中總黃酮的含量測(cè)定

張幸福

(青海省食品藥品檢驗(yàn)所，西寧 810016)

目的：建立二種藏錦雞兒(鬼箭錦雞兒和昌都錦雞兒)的定量測(cè)定方法。方法：采用紫外-分光光度法對(duì)其總黃酮進(jìn)行含量測(cè)定。結(jié)果：線(xiàn)性回歸方程為Y=0.014X-0.010 9，相關(guān)系數(shù)r=1.000 0。結(jié)論：所建立的方法可為藏錦雞兒中總黃酮的含量測(cè)定提供參考。

鬼箭錦雞兒；昌都錦雞兒；蘆丁；總黃酮；紫外分光光度法

藏錦雞兒為豆科植物鬼箭錦雞兒Caraganajubata(pall.)Poir.及昌都錦雞兒(Caraganachangduensisfiauf)的木部心材，具破血、化瘀、降壓功效[1-2]。黃酮類(lèi)化合物是藏錦雞兒中的藥效學(xué)成分[3-5]。本研究在文獻(xiàn) [6-8]基礎(chǔ)上減少樣品的取樣量，縮短處理時(shí)間，以蘆丁為對(duì)照品，采用紫外分光光度法測(cè)定了總黃酮的含量。研究結(jié)果可為藏錦雞兒的質(zhì)量控制提供參考。

1 儀器與試藥

島津紫外分光光度計(jì)(UV-2450)，OHAUS AR5120電子天平(奧豪斯公司)，HANGPING FA1004電子天平(上海天平儀器廠(chǎng))，KQ5200B超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

液相用甲醇、乙腈均為色譜純，水為蒸餾水的超純水；其余試劑為分析純(市售)。蘆丁對(duì)照品(批號(hào)100080-200707，供含量測(cè)定，使用前不需干燥處理，供UV法測(cè)定，純度為92.5%，購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定研究院)。收集藏錦雞兒藥材共10批，經(jīng)青海省食品藥品檢驗(yàn)所駱桂法主任鑒定為鬼箭錦雞兒及昌都錦雞兒的木部心材。見(jiàn)表1。

表1 藏錦雞兒樣品來(lái)源

2 方法與結(jié)果

2.1 對(duì)照品溶液的制備

取蘆丁對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加75%乙醇使溶解，制成含蘆丁0.238 9 mg·mL-1的溶液 (必要時(shí)超聲處理或置水浴上微熱使溶解)。

2.2 供試品溶液的制備

取本品粗粉約0.5g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入75%乙醇50mL，密塞，稱(chēng)定重量，放置30分鐘，置水浴上加熱回流1h，放冷，用75%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，即得，備用。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

精密量取蘆丁對(duì)照品溶液1mL、2mL、4mL、6mL、8mL與10mL，分別置50mL 量瓶中，各加75%乙醇至10mL，搖勻，加5%亞硝酸鈉溶液1.0mL，搖勻，放置6min，加10%硝酸鋁溶液1.5mL，搖勻，放置6min，再加10%氫氧化鈉溶液10mL，加75%乙醇溶液稀釋至刻度，搖勻，放置15min，以相應(yīng)的試劑為空白，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法，在510nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。其線(xiàn)性方程為:Y=0.014X- 0.010 9，相關(guān)系數(shù)r=1.000 0。

2.4 精密度試驗(yàn)

取蘆丁對(duì)照品溶液，按“2.3”項(xiàng)條件處理，連續(xù)6次測(cè)定其吸光度A值， 結(jié)果吸光度的RSD為0.1%，表明儀器精密度良好。

2.5 重復(fù)性試驗(yàn)

分別精密稱(chēng)取樣品(7號(hào))0.5 g，共6份，按“2. 3”項(xiàng)下方法操作制備供試品備用溶液，然后精密量取1.0～2.0mL，置50mL量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備項(xiàng)下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法測(cè)定吸光度，計(jì)算含量，結(jié)果總黃酮的平均含量為7.83%，RSD為1.8%，表明本方法重復(fù)性好。

2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液(7號(hào))，分別在0、5、10、20、30、40、50min依法測(cè)定吸光度， 結(jié)果表明樣品溶液在50min內(nèi)穩(wěn)定，吸光度的RSD為1.5%。

2.7 回收率試驗(yàn)

取蘆丁對(duì)照品約20～25mg，扣除純度，共6份，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，每瓶中再精密稱(chēng)取已知含量的錦雞兒樣品(7號(hào)樣品，含量為7.823 7%)0.25g， 依次精密加入75%乙醇50mL，密塞，稱(chēng)定重量，放置30min，置水浴上加熱回流1h，放冷，用75%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2.0mL，置50mL量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備項(xiàng)下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出供試品溶液中蘆丁的量，計(jì)算回收率，平均回收率為100.4%，RSD=2.6%。

2.8 樣品測(cè)定

取藏錦雞兒樣品，按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品備用溶液，精密量取1.0～2.0mL，置50mL量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備項(xiàng)下的方法，自“各加75%乙醇至10mL”起，依法測(cè)定吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上讀出供試品溶液中蘆丁的量，計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 樣品中總黃酮含量 (%)

3 討論

取蘆丁對(duì)照品溶液依法顯色并測(cè)定溶液的紫外光譜，結(jié)果該溶液在510nm處有最大吸光度值，故選擇510nm作為紫外-分光光度法的檢測(cè)波長(zhǎng)。經(jīng)考察，10%氫氧化鈉溶液的用量為10mL，10%硝酸鋁溶液用量為1.5mL時(shí)，測(cè)得的吸光度值最佳。分別在室溫、20℃、35℃時(shí)測(cè)定溶液的吸光度值，結(jié)果表明溫度對(duì)測(cè)定無(wú)影響， 所以選擇室溫下進(jìn)行測(cè)定。

該研究所建立的方法取樣方便，處理簡(jiǎn)單，可為藏錦雞兒的質(zhì)量控制提供參考。

[1] 衛(wèi)生部藥典委員會(huì).衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)[S] .藏藥第一冊(cè).1995:136.

[2] 青海省衛(wèi)生廳.青海省藏藥標(biāo)準(zhǔn)[S].1992:42.

[3] 宋萍,李小娟,賈巖巖.鬼箭錦雞兒化學(xué)成分的研究[J].中成藥,2011(11):1934-1936.

[4] 宋萍,楊新洲,于軍.鬼箭錦雞兒中紫檀烷類(lèi)化合物抗真菌活性研究(英文)[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué),2009(9):691-694.

[5] 宋萍,馬歡,田婭.藏藥鬼箭錦雞兒化學(xué)成分及藥理作用的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥物與臨床,2009(12):1149-1151.

[6] 鄭敏燕,魏永生. 藏錦雞兒原藥材中總黃酮含量的初步測(cè)定[J].青海大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版,2001(5):10-11，14.

[7] 宋萍,李存仁,于軍.分光光度法測(cè)定藏藥鬼箭錦雞兒中總黃酮的含量[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥,2008(9):2076-2077.

[8] 魏永生.正交試驗(yàn)法研究藏藥鬼箭錦雞兒總黃酮含量[J]. 咸陽(yáng)師范學(xué)院學(xué)報(bào),2005(2):27-29.

(責(zé)任編輯：宋勇剛)

2014-01-06

國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)提高項(xiàng)目(民族藥N0.427)

張幸福，男，青海省食品藥品檢驗(yàn)所副主任藥師，研究方向?yàn)橹胁厮庂|(zhì)量控制。

R285.2

A

1673-2197(2014)09-0010-01