尼莫地平納米混懸劑在大鼠體內藥代動力學研究

曾瀧彪，張軍東，唐文燕，吳君蓮

(1.中國藥科大學 藥劑學教研室，江蘇 南京 210009；2.上海信誼藥廠有限公司 藥物研究所，上海 201206；3.安徽職業技術學院 化工系分析教研室，安徽 合肥 230011)

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尼莫地平納米混懸劑在大鼠體內藥代動力學研究

曾瀧彪1,2，張軍東2*，唐文燕2，吳君蓮3

(1.中國藥科大學 藥劑學教研室，江蘇 南京 210009；2.上海信誼藥廠有限公司 藥物研究所，上海 201206；3.安徽職業技術學院 化工系分析教研室，安徽 合肥 230011)

目的：研究尼莫地平納米混懸劑在大鼠體內的藥代動力學情況。方法：以尼膜同為參比，研究自制尼莫地平納米混懸劑在SD大鼠體內的生物利用度。結果：尼莫地平納米混懸劑在口服灌胃后禁食與進食大鼠體內的Cmax分別為(242.96±47.50)μg/mL 和(236.33±7.80)μg/mL，AUC(0-t)分別為(409.01±89.34)μg·h/mL和(415.42±42.76)μg·h/mL；以尼膜同為參比，尼莫地平納米混懸劑在禁食與進食條件下大鼠體內的相對生物利用度分別為657%和522%。結論：在比較食物效應對口服尼莫地平制劑的影響時，尼膜同在進食狀態下大鼠體內的生物利用度是禁食組的1.28倍，而納米結晶進食組大鼠的生物利用度僅為禁食組的1.02倍。

尼莫地平；納米混懸劑；生物利用度

尼莫地平(Nimodipine)是第二代鈣離子拮抗劑，其可選擇性地作用于腦血管平滑肌，擴張腦血管，增加腦血流量，臨床用于治療急性高血壓、腦出血后腦血管痙攣引起的缺血性神經損傷[1]。尼莫地平是一種溶于乙醇、乙醚等有機溶媒但不溶于水的藥物，且其存在嚴重的肝臟首過效應，口服絕對生物利用度僅為3%～28%[2]。

納米混懸劑是以表面活性劑或聚合物為穩定劑，將納米尺度的藥物粒子分散在水中形成的穩定膠體分散體系[3]。因其粒徑極小，能顯著提高藥物的飽和溶解度，增加藥物溶出速率，提高其生物利用度。

1 儀器與材料

1.1 儀器

液相色譜儀(美國Waters公司， Empower系統和2487檢測器)；TGL-16G高速離心機 (上海安亭科學儀器廠)。

1.2 材料

尼莫地平納米凍干粉(自制)； 尼膜同(尼莫地平片，拜爾醫藥保健有限公司，批號： BJ08192)；甲醇(merck公司， 色譜純 )；乙腈(merck公司，色譜純)；健康SD大鼠，體重 230～270g (合格證號：2007000559729 )。

2 方法

2.1 尼莫地平體內分析方法建立

2.1.1 色譜條件 色譜柱：Phenomenex C18柱(250mm×4.6mm，5μm)；流動相為乙腈∶水=70∶30(v/v)；檢測波長：358nm；流速：1.2mL/min；柱溫：35℃；內標：尼群地平；進樣體積：20μL。

2.1.2 血漿處理 取大鼠空白血漿0.2mL，加入10μg/mL尼莫地平標準液20μL，其中內標濃度均為5.0μg/mL，加乙醚∶正己烷(1∶1，v/v)1mL，渦旋2min后，4 000rpm離心5min，取上清液0.7mL于離心管中，常溫避光，氮氣吹干，避光保存。2.1.3 血漿干擾試驗 分別取大鼠空白血漿、尼莫地平對照品(含內標)溶液、空白血漿加尼莫地平對照品(含內標)溶液和給藥后大鼠血漿樣品，按“2.1.2”項方法處理、進樣。

2.1.4 標準曲線建立 吸取6份大鼠空白血漿各0.2mL，分別加入0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16μg/mL尼莫地平標準溶液20μL(其中內標濃度均為5.0μg/mL)，加入乙醚∶正己烷(1∶1，v/v)1mL，渦旋2min，4 000rpm離心5min，取上清液0.7mL于離心管中，常溫避光，氮氣吹干，試管中的殘留物加入甲醇60μL，渦旋振蕩2min，取20μL注入高效液相色譜儀，分別記錄色譜圖中尼莫地平的峰面積(Anim)與尼群地平的峰面積(Anit)，并以峰面積比值A(Anim/Anit)對尼莫地平濃度C(μg/mL)進行線性回歸，得回歸方程 Y =0.183 7X+0.017 3，R2=0.999 8(n=6)，表明尼莫地平在0.508～16.256μg·mL-1濃度范圍內與其峰面積積分線性關系良好。

2.1.5 回收率試驗 在大鼠空白血漿中加入尼莫地平標準液適量，使其濃度分別為0.5μg/mL、2μg/mL、8μg/mL，其中內標濃度均為5.0μg/mL。按“2.1.2”項方法處理并進樣分析，按“2.1.4”項標準曲線計算測定值，測定值與實際加入值的比值即為回收率。低、中、高三個濃度的回收率分別為(102.14±0.11)%、(102.68±1.91)%、(102.32±1.93)%，表明方法準確度較好。

2.1.6 精密度試驗 在大鼠空白血漿中加入尼莫地平標準液適量，使其濃度分別為0.5μg/mL、2μg/mL、8μg/mL，其中內標濃度均為5.0μg/mL，按大鼠血漿中尼莫地平工作曲線制備法測定，1天內進樣3次，記錄峰面積，計算得日內RSD為1.47%；每日測定峰面積，連續測定3天，計算得日間RSD為2.43%。

2.2 大鼠體內藥動學研究

2.2.1 給藥方法與血樣處理 取SD大鼠12只，于實驗前禁食12h，自由飲水，分成兩組，分別灌胃給予尼莫同混懸液和尼莫地平納米結晶片混懸液，給藥劑量為40.0mg/kg[4]。

取進食的SD大鼠12只，分成兩組，分別灌胃給予尼莫同混懸液和尼莫地平納米結晶片混懸液，給藥劑量為40.0mg/kg。

2.2.2 血樣采集與測定 上述動物給藥后，分別于給藥前(0h)和給藥后0.25h、0.5h、1.0h、1.5h、2.0h、3.0h、4.0h、8.0h、12.0h、24.0h于大鼠眼底靜脈叢毛細管取血0.4mL于肝素化的離心管中，10 000rpm離心5min，取上層血漿-20℃保存備用。

按照“2.1.2”項方法提取藥物，采用高效液相色譜法測定，計算各時間點尼莫地平的血藥濃度。

2.2.3 大鼠體內尼莫地平血藥濃度 禁食組大鼠口服給藥后平均血藥濃度和進食組大鼠口服給藥后平均血藥濃度分別見表1和表2。

2.2.4 數據處理 采用非房室模型法計算SD大鼠口服給藥后的各項藥動學參數，其中Cmax和Tmax為實測值，AUC(0-t)為通過梯形法計算所得，結果見表3。

以尼膜同為參比制劑，根據血藥濃度-時間曲線下面積AUC(0-t)分別計算禁食與進食組納米結晶的相對生物利用度F，計算公式如下：

表1 禁食組大鼠口服給藥后平均血藥濃度

注：- 表示未檢出

表2 進食組大鼠口服給藥后平均血藥濃度

3 結論

在相同狀態下，以尼膜同為參比制劑，經計算，禁食組大鼠尼莫地平納米結晶的相對生物利用度為657%；進食組大鼠尼莫地平納米結晶的相對生物利用度為522%。

在比較食物效應對口服尼莫地平制劑的影響時，尼膜同在進食狀態下大鼠體內的生物利用度是禁食組的1.28倍；而納米結晶進食組大鼠的生物利用度僅為禁食組的1.02倍，這也說明納米結晶可消除食物效應對口服制劑吸收的影響。

表3 口服給藥后大鼠藥代動力學參數

[1] 楊力,趙德化.尼莫地平的藥理和臨床應用[J].陜西醫學雜志,1993,22(2):98-101.

[2] 李帥,王偉姣,李昌亮,等.國產尼莫地平及其制劑質量的研究進展[J].中南藥學,2012,10(9):689-691.

[3] RABINOW BE. Nanosuspensions in drug delivery[J].Nat Rev Drug Discov,2004,3(9):785-796.

[4] 賀浪沖,王嗣岑.非手性與手性色譜法研究尼莫地平及其對映體在大鼠體內的藥代動力學及組織分布[J].藥學學報,2003,38(8):603-608.

(責任編輯：尹晨茹)

2014-03-12

曾瀧彪(1988-)，男，中國藥科大學藥劑學教研室碩士研究生，研究方向為藥物新劑型與新技術。

張軍東(1974-)，男，上海信誼藥廠有限公司藥物研究所高級工程師，研究方向為藥物新劑型與新技術。

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1673-2197(2014)16-0009-02