TCT與傳統涂片在尿脫落細胞學檢測中的對比研究

李紅全 唐顓

膀胱癌是常見惡性腫瘤之一，膀胱鏡和尿脫落細胞學檢查是膀胱癌早期診斷或(和)隨訪監測的“金標準”;但膀胱鏡檢查的創傷性和傳統尿脫落細胞學的低敏感度對診斷的作用受到限制;人們對非創傷性或高敏感性的診斷方法越來越感興趣;液基薄層細胞學檢測(thin-layer cytologital test，TCT)在婦科腫瘤篩查中廣泛應用，大大提高婦科腫瘤細胞的檢出率和診斷的準確性，但在尿液的應用的相關文獻極少。本文就尿TCT制片與傳統涂片對腫瘤細胞的診斷價值進行探討分析，總結如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2008年4月至2013年4月我院門診和住院膀胱癌疑似患者268例，其中男176例，女92例;平均年齡60.2歲;所有病例均有不同程度血尿和(或)尿頻、尿痛等與膀胱腫瘤相關的癥狀;經膀胱鏡和組織病理學證實為膀胱惡性腫瘤68例。

1.2 儀器與試劑 Cytoprep-1離心機(長沙英泰儀器有限公司)，液基薄層細胞制片試劑(廣州江元醫療科技有限公司)。

1.3 方法

1.3.1 囑患者收集早晨第二次新鮮中段尿液100 ml以上，立即送檢，連續3 d;采用配對設計方法，將每次尿液標本分為兩份，隨機進入TCT組和傳統涂片組。

1.3.2 TCT方法:將標本置于4℃的冰箱內10 min，輕輕倒去一部分，保留50 ml，分別置于等量的兩個離心管中，加入適量50%乙醇和冰醋酸混合溶液(1∶1)，離心5 min(2 000 r/min)，棄上清液，用吸管吸取尿沉渣，按1∶4的體積比例加入保存液，震蕩混勻后靜置10 min以上，棄清液，震蕩離心管，行TCT制片，蘇木精伊紅染色，鏡檢。

1.3.3 傳統涂片方法:將標本放置于4℃的冰箱內10 min，輕輕倒去一部分，保留50 ml，分別等量置于兩個離心管中，離心5 min(2 000 r/min)，棄上清液，用吸管吸取尿沉渣均勻涂片，潮干后置于95%乙醇固定15 min，蘇木精伊紅染色，鏡檢。

1.4 質量評估與細胞學診斷 兩者制片質量評估分滿意和不滿意;參照Ordon等［1］報道的標準，每張涂片以保存完好和形態清晰、上皮數量＞50個做為滿意標準;診斷標準參照《診斷細胞病理學》［2］，采用4級分類法，診斷結果分為無異常細胞、非典型細胞、可疑惡性細胞和惡性細胞;統計分析時把前兩種結果歸為陰性診斷，后兩種為陽性診斷;連續3次標本見1次及以上陽性即為陽性;所有標本均由同一位病理醫師診斷。

1.5 統計學分析 應用SPSS 17.0統計軟件，計數資料采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計意義。

2 結果

2.1 標本滿意率 TCT標本滿意768例次，不滿意36例次，滿意率95.5%(768/804);傳統涂片滿意693例次，不滿意111例次，滿意率86.2%(693/804);TCT滿意率明顯高于傳統涂片，差異有統計學意義(P＜0.01)。見表1。

表1 TCT與傳統涂片標本滿意率結果對比 例次(%)

2.2 TCT和傳統涂片檢查細胞學診斷結果對比

TCT檢出:惡性細胞37例，可疑惡性細胞29例，非典型細胞25例，無異常細胞177例，陽性檢出率24.6%;傳統涂片檢出:惡性細胞33例，可疑惡性細胞24例，非典型細胞27例，無異常細胞184例，陽性檢出率22.0%;TCT陽性檢出率高于傳統涂片，差異有統計學意義(P＜0.01)。見表2。

表2 TCT與傳統涂片檢查細胞診斷結果對比 例(%)

2.3 TCT和組織病理學診斷結果 選取細胞學和組織病理學標本均滿意，有明確診斷結果196例;TCT的敏感度 73.5%(50/68)、特異度 99.2%(127/128)。見表3。

表3 TCT與組織病理學結果對比 例(%)

2.4 傳統涂片和組織病理學診斷結果 選取細胞學和組織病理學標本均滿意，有明確診斷結果196例;傳統涂片的敏感度為66.2%(45/68)、特異度99.2%(127/128)。見表4。

表4 傳統涂片與組織病理學結果對比 例(%)

3 討論

膀胱癌是最常見的惡性腫瘤之一，位居世界腫瘤第7位，發病率占癌癥總數的3.2%［3］;早期診斷比較困難［4］，膀胱鏡和尿脫落細胞學檢查是診斷、隨訪監測膀胱癌的“金標準”;但膀胱鏡檢查為創傷性操作，易引患者不適并可能導致尿路感染;尿傳統細胞學檢查雖然特異度高，但低敏感度，因此對膀胱癌診斷的作用受到一定限制;Arora等［5］報道，其敏感度為65.8%，特異度為100%;國內葉見波等［6］報道敏感度為65%，特異度為99.3%，本研究結果尿傳統細胞學敏感度為66.2%，特異度為99.2%;與前二者報道的敏感度及特異度相近。因此人們對非創傷性和高敏感度的診斷方法越來越感興趣;TCT是20世紀90年代發展起來的一項細胞檢測新制片技術，目前廣泛用于婦科宮頸腫瘤篩查，并逐步擴展到細胞學檢測的其他領域，如尿脫落細胞［6，7］;本研究結果 TCT 制片的敏感度為73.5%，高于傳統涂片;特異度99.2%;TCT制片與傳統涂片的特異度的差異無統計學意義(P＞0.05)。Niedworok等［8］研究尿傳統涂片檢測對高級別尿路上皮癌的診斷敏感度3次分別為85.9%、83.6%、89.2%;國內陳岳等［9］研究結果傳統涂片檢測對高級別尿路上皮癌的診斷敏感性高，低級別敏感性低;本研究結果TCT制片與傳統涂片兩者對高級別尿路上皮癌的敏感度都高于低級別;可能與低級別尿路上皮癌脫落的癌細胞異型性小，并且數量較少，造成診斷困難有關;近年部分學者運用尿液膀胱腫瘤標志物(如核基質蛋白22等)檢測證實可進一步提高敏感度［10，11］。

TCT比傳統涂片敏感度高的原因如下:(1)尿脫落細胞收集方式，TCT標本經離心沉淀后置于專用保存液中，使細胞幾乎100%保留。(2)在細胞保存液中含有固定劑、細胞分離提取劑等成分，它不但可以除去尿中的大部分血細胞、炎性細胞及碎片等非診斷雜質，還可以及時固定并保持尿中細胞的原始形態結構。(3)在制片過程中，采用標準化的操作，避免手工操作的隨意性;經過梯度離心，自然沉降等過程進一步分離血細胞、炎性細胞等雜質;同時因病變細胞比正常細胞比重大，沉降速度快，靠細胞表面的張力均勻分布，與玻片形成穩固的結合;因此TCT制片大大提高了對病變細胞的捕獲能力，并細胞單層排列，防止脫片或白片;(4)TCT制片的濕固定法使細胞核結構更清晰;同時TCT制片使細胞固定在較小的范圍內，便于閱片者觀察，不易形成視力疲勞。(5)在傳統制片尿中細胞不能完全保留，丟失部分診斷細胞;不能有效除去非診斷雜質，細胞過度重疊，干擾診斷;涂片視野大，閱片者易形成視力疲勞等。

尿TCT與傳統制片標本的質量評估均暫無統一標準;沈周俊等［11］報道的標準為:尿涂片標本要求保存完好，形態結構晰，上皮數＞50個;本研究兩組標本均參照此標準，尿傳統涂片的滿意度為86.2%，TCT標本滿意度為95.5%，結果表明TCT組的滿意度明顯高于傳統涂片組，組間比差異具有統計學意義(P＜0.01)。

綜上所述，尿TCT制片標本滿意度和敏感度明顯高于傳統涂片，兩者的特異度相同;TCT在尿脫落細胞學檢查中的應用值得推廣。

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2 馬正中主編.診斷細胞病理學.第1版.鄭州:河南科學技術出版社，2000.218-227.

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5 Arora VK，Sarungbam J，Bhatia A，et al.Usefulness of NMP22 as an adjunct to a typical urine cytology and low-grade urothelial carcinoma.Diagn Cytopathol，2010，38:56-58.

6 葉見波，朱有凱，周祥禎，等.尿液基細胞學與傳統細胞學對膀胱癌診斷價值的比較.現代腫瘤醫學，2010，18:2209-2211.

7 Piaton E，Faynel J，Hutin K，et al.Conventional liquid-based techniques versus cytyc thin preparation processing of urinary samples:a qalitative approach.BMC Clin Pathol，2005，5:9-16.

8 Niedworok C，Rembrink V，Hakenberg OW，et al.The value of urinary cytology in the diagnosis of high grade urothelial tumors.Urologe A，2009，48:1018，1020-1022，1024.

9 陳岳，徐勇，王錦，等.晨起第一次新鮮中段尿用于膀胱癌細胞學診斷的臨床價值.中華泌尿外科雜志，2010，31:700-703.

10 Song JM，Du LL，Zhao XW，et al.Expression and clinical singnificance of nuclear matrix protein 22 and cytokeratin 18 in transitiomal cell carcinoma of the bladder.Zhonghua Zhong Liu Za Zhi，2009，31:274-277.

11 沈周俊，胡明明.膀胱癌尿液腫瘤標志物的研究和應用現狀.臨床外科雜志，2009，17:726-728.