田 迎,王建東,滕兆剛,盧光明,鄭 玲
293T細胞對介孔二氧化硅納米材料的攝取研究
田 迎,王建東,滕兆剛,盧光明,鄭 玲
目的:研究在脂質體Lipofectamine 2000的介導下,293T細胞對介孔二氧化硅納米材料(mesoporous silica nanomaterials,MSNs)的攝取變化。方法:制備和表征MSNs;293T細胞分別與100 μg/mL MSNs、MSNs+Lipofectamine 2000共孵育,通過透射電鏡(transmission electron microscope,TEM)觀察及定量分析293T細胞對材料的攝取。結果:TEM、X線衍射及氮氣吸附-脫附分析表明,制備的MSNs結構規則、分散性好,尺寸在100 nm左右;TEM定量結果發現,Lipofectamine 2000顯著提高了293T細胞對MSNs的攝取,P<0.001。結論:Lipofectamine 2000能提高293T細胞對MSNs的攝取,為MSNs在293T細胞內的生物應用創造了條件。
介孔二氧化硅納米材料;Lipofectamine 2000;細胞攝取
介孔二氧化硅納米材料(mesoporous silica nanoparticles,MSNs)具有載藥、靶向成像、診療等潛在的應用價值,成為生物醫藥領域新的研究熱點[1-3]。細胞攝取對MSNs生物功能的發揮有重要的影響,MSNs表面的電荷修飾也反過來促進細胞對材料的吞噬[4]。陽離子脂質體Lipofectamine 2000是用于DNA、RNA轉染真核細胞的生物學常規試劑,其作用原理是帶正電的陽離子脂質體結合帶負電的核酸物質,形成核酸-陽離子脂質體復合物,進一步吸附到帶負電的細胞膜表面,通過內吞作用導入細胞[5]。目前,利用Lipofectamine 2000這一性質,包被或中和MSNs表面的負性電荷來提高MSNs細胞攝取率的研究還鮮有報道。本文針對此研究目的,初步探索在Lipofectamine 2000介導下人胚腎細胞系293T對MSNs攝取的影響。
1.1 MSNs的制備和表征
MSNs由實驗室自制,制備方法參照文獻[6]。MSNs利用透射電子顯微鏡(transmission electron microscope,TEM)進行表征,加速電壓為200 kV。首先配制0.05 g/L納米粒的乙醇溶液,超聲分散均勻后,滴于覆蓋有膜的銅網上,真空干燥后,于Hitachi H-8100型透射電子顯微鏡下拍攝,觀察納米粒的尺寸及分散性?!?br>