高爾基體蛋白聯合甲胎蛋白檢測在原發性肝癌早期診斷中的價值

徐向勇 劉顯暢 李正峰 祝成亮

1.武漢鋼鐵（集團）第二職工醫院心內科，湖北武漢430085；2.武漢市兒童醫院，湖北武漢430080；3.武漢大學人民醫院檢驗科，湖北武漢430060

高爾基體蛋白聯合甲胎蛋白檢測在原發性肝癌早期診斷中的價值

徐向勇1劉顯暢1李正峰2祝成亮3

1.武漢鋼鐵（集團）第二職工醫院心內科，湖北武漢430085；2.武漢市兒童醫院，湖北武漢430080；3.武漢大學人民醫院檢驗科，湖北武漢430060

目的探討血清高爾基體蛋白73（GP73）、甲胎蛋白（AFP）聯合檢測對原發性肝癌（PHC）早期診斷中的作用。方法選取2007年7月～2012年7月武漢鋼鐵（集團）第二職工醫院PHC患者76例（PHC組）、肝硬化患者53例（肝硬化組）和正常人群50例（對照組），采用酶偶聯吸附法和化學發光免疫分析法進行血清GP73、AFP檢測，分析兩者單獨及聯合檢測在早期診斷PHC中的價值。結果①PHC組患者血清GP73[（208.3±53.6）μg/L]、AFP [（871.2±497.6）μg/L]明顯高于肝硬化組[（74.8±26.4）、（91.7±68.5）μg/L]和對照組[（31.6±7.7）、（12.7±7.9）μg/L]，差異均有統計學意義（P＜0.05）。②PHC組患者血清GP73和AFP陽性檢出率[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]分別高于肝硬化組[15.1%（8/53）、17.0%（9/53）]和對照組[0.0%（0/50）、0.0%（0/50）]，差異均有統計學意義（P＜0.05）。③聯合檢測對PHC診斷靈敏度[96.1%（73/76）]高于GP73和AFP單項檢測[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]，差異有統計學意義（P＜0.05）；而檢測的特異性與單項檢測相比差異無統計學意義（P＞0.05）。結論PHC患者血清中GP73和AFP水平較高，兩者聯合檢測可以顯著提高對PHC早期診斷的能力。

高爾基體蛋白；甲胎蛋白；原發性肝癌；診斷

原發性肝癌（PHC）是全球第六位常見的惡性腫瘤，是第三位常見的腫瘤相關死亡原因[1-2]。甲胎蛋白（AFP）是目前最重要的也是臨床使用最頻繁的肝癌標記物[3-4]，但AFP正常不能排除肝癌，有18%～20%的PHC患者特別是老年人血清AFP正常[5]，故需要結合臨床及其他檢測指標做出正確診斷。高爾基體跨膜糖蛋白73（GP73）系列相關研究，證實GP73是肝癌早期診斷和術后復發病情評估的理想血清標記物，敏感性、特異性高于AFP[6]。本研究通過測量患者血清GP73和AFP水平，探討聯合檢測在PHC早期診斷中的意義，為臨床預防和治療提供科學依據，現報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2007年7月～2012年7月來武漢鋼鐵（集團）第二職工醫院（以下簡稱“我院”）心內科住院治療76例PHC患者作為PHC組，男47例，女29例，平均年齡（47.4±11.5）歲；經影像及肝組織病理檢測確診為PHC，且住院前未接受相關治療。肝硬化組選擇同期住院的53例肝硬化患者，男33例，女20例，平均年齡（45.7±9.6）歲；患者經臨床、CT聯合檢查確診為肝硬化，排除肝占位相關疾病。對照組為來我院體檢中心體檢的50名健康人群，男29名，女21名，平均年齡（43.1±10.7）歲。三組年齡、性別構成比一般資料比較，差異均無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。研究對象均自愿簽署知情同意書。

1.2 檢測方法

三組研究對象均于清晨空腹肘靜脈取血5 mL，雙盲編號，離心后收集血清，置于-40℃冰箱保存備用。GP73采用酶偶聯吸附法（ELISA）檢測，試劑盒購至康乃格公司，全自動酶標儀（美國熱電公司）測定A值。AFP采用全自動化學發光分析系統檢測，儀器和試劑均購至羅氏公司。所有操作嚴格按照試劑和儀器說明書進行。

1.3 判斷指標

GP73的參考值為0～85.5 μg/L，當≥85.5 μg/L時為陽性；AFP參考值為0～200 μg/L，當≥200 μg/L時為診斷PHC臨界值[7]。

1.4 統計學方法

采用統計軟件SPSS 19.0對數據進行分析，正態分布計量資料以均數±標準差（x±s）表示，兩獨立樣本的計量資料采用t檢驗。計數資料以率表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組血清GP73和AFP水平檢測結果對比

PHC組患者血清GP73[（208.3±53.6）μg/L]、AFP [（871.2±497.6）μg/L]明顯高于肝硬化組[（74.8±26.4）、（91.7±68.5）μg/L]和對照組[（31.6±7.7）、（12.7±7.9）μg/L]，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

2.2 三組血清GP73和AFP陽性檢測率比較

PHC組患者血清GP73和AFP陽性檢出率[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]分別高于肝硬化組[15.1%（8/53）、17.0%（9/53）]和對照組[0.0%（0/50）、0.0%（0/50）]，差異均有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表1 三組血清GP73和AFP水平檢測結果比較（μg/L，x±s）

表2 三組血清GP73和AFP陽性檢測率比較[n（%）]

2.3 GP73和AFP單項檢測及聯合檢測對PHC診斷價值比較

聯合檢測對PHC診斷靈敏度[96.1%（73/76）]高于GP73和AFP單項檢測[81.6%（62/76）、63.2%（48/76）]，差異有統計學意義（P＜0.05）；而檢測的特異性與單項檢測相比差異無統計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 GP73和AFP單項檢測及聯合檢測靈敏度和特異性對比

3 討論

PHC是全球第六位常見的惡性腫瘤，也是第三位常見的腫瘤相關死亡原因。PHC通常為生長緩慢、潛伏期長，肝癌的預后非常不好，主要原因在于當發現肝癌時，大多數已經處于中末期[8-9]，而處于初始階段尤其是肝功能良好、癌細胞沒有轉移時預后較好。日本有報道這種患者的5年生存率在89%～93%（外科切除）和71%（經皮治療）[10]。所以在早期階段發現PHC對患者的預后至關重要，臨床急切需要敏感的PHC標記物，用來診斷早期階段PHC和觀察對治療的反映以及監測切除術后的復發情況。血清AFP是目前最重要的也是臨床使用最頻繁的PHC標記物[11-12]，AFP常用于PHC臨床輔助診斷及高危人群的篩查。持續1個月以上AFP＞500 μg/L，并能排除妊娠、活動性肝炎、睪丸癌或卵巢畸胎瘤等，基本可確診為PHC。AFP也用于PHC的治療效果及預后評估，PHC徹底切除后，血清中的AFP濃度將迅速下降，1周內可降至正常水平[13]。若增高則可能復發，其增高比肝功能異常出現得更早。但AFP正常不能排除肝癌，有18%～20%的PHC患者特別是老年人血清AFP正常故需要結合臨床及其他檢測指標做出正確診斷[14]，且它的敏感性一直不高，文獻報道，診斷肝癌的敏感性為40%～69%。其次，在其他一些疾病中也有AFP高于臨界值的報道[15-16]。

近年來的研究發現，GP73是一種新型的標志物。Shi等[17]研究發現GP73對肝癌具有較高的診斷效率，其ROC曲線的AUC達到了0.94，高于AFP（AUC=0.79）（P＜0.01），若將GP73的診斷界值設置為8.5 RU，其診斷敏感性為74.6%，特異性為97.4%；而AFP在35 ng/mL的界值處，診斷敏感性僅為58.2%，特異性為85.3%。最重要的是，在AFP為陰性（＜35 ng/mL）的326例肝癌患者中，有218例GP73呈陽性；在GP73為陰性（＜8.5 RU）的200例肝癌患者中，AFP陽性的患者高達92例[18]。這提示，二者在肝癌的診斷上可能存在互補作用。本研究采用GP73聯合AFP檢測結果發現PHC組患者血清GP73、AFP、明顯高于肝硬化組和對照組（P＜0.05），該組患者血清GP73和AFP陽性檢出率分別高于肝硬化組和對照組（P＜0.05），說明PHC患者具有較高的血清GP73、AFP水平和檢測陽性率，提示兩者存在作為PHC標記物的可能。對GP73和AFP單項檢測及聯合檢測結果對比后發現，聯合檢測的靈敏度為96.1%，遠高于單項檢測的兩組，而檢測的特異性與單項檢測相比差異無統計學意義，由此說明兩者聯合檢測具有較高的互補性，避免早期PHC診斷過程中出現漏診，為臨床治療提供更為可靠的參考。

綜上所述，GP73與AFP聯合檢測可以為PHC早期診斷提供更有效的方法。但是本研究樣本數量有限，還需要進一步擴大樣本量進行深入研究。

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Value of GP73 and AFP in early diagnosis of primary liver cancer

XU Xiangyong1LIU Xianchang1LI Zhengfeng2ZHU Chengliang3
1.Department of Cardiology,the Second Worker's Hospital of WISCO,Hubei Province,Wuhan430085,China; 2.Children's Hospital of Wuhan City,Hubei Province,Wuhan430080,China;3.Department of Clinical Laboratory, Renmin Hospital of Wuhan University,Hubei Province,Wuhan430060,China

Objective To explore the clinical value of combined detection of serum GP73,AFP in the early diagnosis of primary liver cancer(PHC).Methods 76 cases of PHC,53 cases of liver cirrhosis,50 cases of normal people from July 2007 to July 2012 in the Second Worker's Hospital of WISCO were selected as PHC group,liver cirrhosis group and control group respectively,the enzyme coupling adsorption method and chemiluminesent lmmunoassay assay were used to detect the serum GP73,AFP,the value of single and combined detection in early diagnosis of PHC were analyzed. Results①The serum GP73,AFP in PHC group[(208.3±53.6),(871.2±497.6)μg/L]were higher than those in liver cirrhosis group[(74.8±26.4),(91.7±68.5)μg/L]and control group[(31.6±7.7),(12.7±7.9)μg/L],the differences were statistically significant(P＜0.05).②Positive detection rate of serum GP73 and AFP in PHC group[81.6%(62/76), 63.2%(48/76)]were higher than those in liver cirrhosis group[15.1%(8/53),17.0%(9/53)]and control group[0.0%(0/50), 0.0%(0/50)],the differences were statistically significant(P＜0.05).③PHC diagnosis sensitivity by combined detection [96.1%(73/76)]was higher than that by GP73 and AFP single detection[81.6%(62/76),63.2%(48/76)],the differences were statistically significant(P＜0.05).The differences of PHC diagnosis specificity between combined detection and GP73 and AFP single detection was not statistically significant(P＞0.05).Conclusion PHC patients have a higher GP73 and AFP levels,the combined detection can significantly improve the diagnosis of early PHC.

GP73;Alpha fetal protein;Primary hepatic carcinoma;Diagnose

R735.7

B

1673-7210（2014）01（a）-0083-03

2013-10-16本文編輯：李繼翔）

國家自然科學基金項目（編號81101485）。