不同分型的涎腺多形性腺瘤組織中血管內皮生長因子、核轉錄因子p50的表達及意義

張強 劉江 陳暉 畢磊

河北聯合大學附屬醫院口腔科，河北唐山063000

不同分型的涎腺多形性腺瘤組織中
血管內皮生長因子、核轉錄因子p50的表達及意義

張強 劉江 陳暉 畢磊

河北聯合大學附屬醫院口腔科，河北唐山063000

目的探討血管內皮生長因子(VEGF)、核轉錄因子(NF.κB)p50在不同分型涎腺多形性腺瘤中的表達及意義。方法本研究收集河北聯合大學附屬醫院和開灤總醫院2007年3月～2012年6月50例涎腺多形性腺瘤組織石蠟標本，采用免疫組化染色方法SP法檢測50例涎腺多形性腺瘤(基質豐富型25例為A組、細胞豐富型25例為B組)中VEGF、NF.κB p50的表達情況，并與瘤旁涎腺組織(對照組)25例的表達情況做對比分析。結果VEGF在A組的積分光密度(IOD)值為(153.13±60.81)；B組的IOD值為(954.65±305.79)；對照組的IOD值為(52.46± 9.76)，A、B組均較對照組增高，B組較A組增高，組間比較差異均有統計學意義(均P＜0.05)。NF.κB p50在A組的IOD值為(43.40±5.56)；B組為(529.79±163.81)；對照組為(6.83±1.90)，A、B組均較對照組增高，B組較A組增高，組間比較差異均有統計學意義(均P＜0.05)。結論細胞豐富型涎腺多形性腺瘤組織中VEGF、NF.κB p50較基質豐富型涎腺多形性腺瘤均有更高的表達，VEGF、NF.κB p50的檢測對鑒別涎腺多形性腺瘤的不同分型及指導臨床診斷和治療均有幫助。

VEGF；NF-κB p50；聯合檢測；涎腺多形性腺瘤

人類許多疾病的發生和發展都可以歸因于某些基因的異常表達，從而導致疾病的發生。其中一部分基因是在核轉錄因子kappa B(nuclear factor.kappa B，NF.κB)調控下進行［1］。涎腺腫瘤是口腔頜面部常見的腫瘤，而多形性腺瘤(pleomorphic adenoma，PA)則是涎腺腫瘤中最常見的一種，占涎腺腫瘤的60%～70%。腫瘤中不僅含有腫瘤性上皮組織，還含有黏液樣組織或軟骨樣組織，組織學形態呈顯著的多形性及混合性。由于其位置的特殊性，患者術后美容及心理都會受到一定的影響；并且由于其還具有侵襲性生長的生物學特性，使得術后容易復發，且多次復發或病史較長者會轉變為惡性多形性腺瘤或稱之為癌在多形性腺瘤中［2］。隨著研究的深入，后來為簡便起見，學者們將多形性腺瘤合并為兩型，即基質豐富型和細胞豐富型［3］。本研究通過檢測血管內皮生長因子(VEGF)、核轉錄因子(NF.κB)p50在基質豐富型和細胞豐富型多形性腺瘤以及瘤旁正常涎腺組織中的表達，以探討VEGF、NF.κB p50在涎腺多形性腺瘤不同分型中的表達及意義，以便對涎腺多形性腺瘤不同分型的鑒別診斷和治療提供幫助。

1 資料與方法

1.1 標本來源

收集河北聯合大學附屬醫院和開灤總醫院2007年3月～2012年6月80例涎腺多形性腺瘤組織石蠟標本，選取術前均無放療或化療史，具有完整病歷資料，無嚴重的心腦疾病、糖尿病等及石蠟包埋組織完整的50例患者的臨床資料，其中男23例，女27例；年齡20～79歲，平均(45.38±3.63)歲。據參考文獻［3］的判定標準，80例涎腺多形性腺瘤患者分為25例基質豐富型多形性腺瘤(A組)；25例細胞豐富型多形性腺瘤(B組)；采集涎腺多形性腺瘤旁涎腺組織(距腫瘤5 cm以外的涎腺組織)25例作為對照組。A組患者中男12例，女13例；年齡(44.76±2.83)歲。B組患者中男14例，女11例；年齡(46.06±1.83)歲。對照組患者中男13例，女12例；年齡(45.46±2.03)歲。3組患者的年齡、性別比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。本研究經醫院倫理委員會通過，患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 方法

對所收集的標本切片后行HE染色，經有經驗的病理醫師進行在鏡下分型，分為細胞豐富型和基質豐富型兩類。VEGF和NF.κB p50的檢測采用SP免疫組化法，染色程序按SP試劑盒說明書進行［4］。用PBS取代一抗作為陰性對照，用已知陽性切片(惡性多形腺瘤)作陽性對照［5］。行鏡下觀察，計算腫瘤組織積分光密度(IOD)值。

1.3 統計學方法

采用SPSS 13.0軟件包對所得的數據進行統計學分析，計量資料數據以均數±標準差(x±s)表示，采用t檢驗。計數資料以率表示，采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

三組患者中，與對照組比較，A、B組患者VEGF、NF.κB p50 IOD值均增高(P＜0.01)；與A組比較，B組患者VEGF、NF.κB p50 IOD值均增高(P＜0.01)。見表1。

表1 三組患者各指標IOD值的比較

表1 三組患者各指標IOD值的比較

注：與對照組比較，aP＜0.01；與B組比較，bP＜0.01；VEGF：血管內皮生長因子；NF.κB：核轉錄因子；IOD：積分光密度

組別例數VEGFNF.κB p50 A組B組對照組25 25 25 153.13±60.81ab954.65±305.79a52.46±9.76 43.40±5.56ab529.79±163.81a6.83±1.90

3 討論

VEGF是Ferrara等［6］1989年在牛垂體濾泡的星狀細胞體外培養液中首先純化出血管內皮生長因子，是一類具有高度特異性的血管內皮細胞有絲分裂素，具有特異性促進血管內皮細胞增殖的作用。近來，以探討涎腺多形性腺瘤組織中VEGF的表達及其在腮腺多形性腺瘤細胞增殖活性中的價值逐漸成為熱點［7］，并有研究發現NF.κB p50除了在免疫炎性反應過程中發揮重要作用外，還參與多種細胞增殖和凋亡相關基因的轉錄和調控，目前研究顯示NF.κB p50在卵巢癌、乳腺癌、口咽部鱗癌等惡性腫瘤中表達顯著增加［8］。但國內外目前對VEGF、NF.κB p50聯合檢測在涎腺多形性腺瘤良惡性判定及預后評估的應用價值和意義尚未見報道［9.10］。

VEGF是一種作用于血管內皮細胞的多功能細胞因子，僅表達與血管內皮細胞表面，能引起血管通透性增加，引起細胞外基質成分改變，誘導血管形成。而NF.κB是一種重要的細胞轉錄因子，主要由p65和p50組成，激活后參與多種細胞增殖，凋亡相關基因和癌基因等的轉錄調控，在涎腺多形性腺瘤發生、發展以至惡變中起著重要的作用。

本研究結果顯示，VEGF在A組的IOD值為(153.13±60.81)；B組的IOD值為(954.65±305.79)；瘤旁正常涎腺組織對照組的IOD值為(52.46±9.76)，A、B兩組明顯高于對照組(均P＜0.01)，B組明顯高于A組(P＜0.01)，表示B組細胞豐富型PA中存在著豐富的新生血管形成，為腫瘤細胞的增殖供給了營養基礎，和國內外研究結論基本一致［11］。另外，NF.κB p50在A組的IOD值為(43.40±5.56)；B組的IOD值為(529.79±163.81)；對照組的IOD值為(6.83±1.90)，A、B兩組明顯高于對照組(均P＜0.05)，B組明顯高于A組(P＜0.05)，表示B組細胞豐富型PA中存在顯著的NF.κB p50異常活化，和國外研究結論基本一致［12］。

綜上所述，細胞豐富型涎腺多形性腺瘤與基質豐富型涎腺多形性腺瘤組織中VEGF、NF.κB p50均有較高表達，細胞豐富型較基質豐富型均有更高的表達，腺瘤組織中VEGF、NF.κB p50的聯合檢測對涎腺多形性腺瘤的不同分型的鑒別診斷和治療均有幫助。

［1］張強，李金源，王曉波，等.血管內皮細胞生長因子、核轉錄因子p50在多形性腺瘤中的表達及意義［J］.中國醫藥導報，2011，8(16)：19.20.

［2］楊文軍，劉應時，陳巨峰，等.涎腺多形性腺瘤微血管密度及血管內皮生長因子表達的意義［J］.實用口腔醫學雜志，2008，24(4)：571.574.

［3］楊慧遠，楊學華，鄭穎，等.咽旁間隙多形性腺瘤的CT表現［J］.放射學實踐，2012，27(5)：506.508.

［4］宋萌，汪廷樂，肖翠翠，等.涎腺多形性腺瘤中Gli.2蛋白的表達及意義［J］.中華口腔醫學雜志，2011，46(1)：58.60.

［5］謝東華，唐孝達，夏術階，等.核轉錄因子κB在膀胱癌中的表達及臨床意義［J］.癌癥，2002，21(6)：663.667.

［6］Ferrara N，Henzel WJ.Pituitary follieular cells secrete a novel heparin.binding growth factor specific for vascular endothelial cells［J］.Bio.chem Biophys Res Commun，1989，161(2)：851.858.

［7］張學斌，楊文軍，劉應時，等.細胞核增殖抗原及血管內皮生長因子在多形性腺瘤中表達的相關性研究［J］.中華臨床醫師雜志：電子版，2011，5(9)：2728.2730.

［8］Yu LL，Yu HG，Yu JP，et al.Nuclear factor kappa B p65 transcription factoris constitutively activated in humancolorectal carcinoma tissue［J］.World J Gast roenterol，2004，10(22)：3255.3260.

［9］張麗，唐軍民，唐巖，等.人外周血單核細胞分化為樹突狀細胞過程中核轉錄因子.κB p50的表達及柴胡皂苷a的影響［J］.解剖學報，2007，38(6)：681.686.

［10］Suboj P，Babykutty S，Valiyaparambil DR，et al.Aloe emodin inhibits colon cancer cell migration/angiogenesis by downregulating MMP.2/9，RhoB and VEGF via reduced DNA binding activity of NF.κB［J］.European journal of pharmaceutical sciences，2012，45(5)：581.591.

［11］Kim JW，Kwon GY，Roh JL，et al.Carcinoma ex pleomorphic adenoma of the salivary glands：distinct clinicopathologic features and immunoprofiles between subgroups according to cellular differentiation［J］.Journal of Korean medical science，2011，26(10)：1277.1285.

［12］Sezgintürk MK.A new impedimetric biosensor utilizing VEGF receptor.1(Flt.1)：Early diagnosis of vascular endothelial growth factor in breast cancer［J］.Biosensors &bioelectronics，2011，26(10)：4032.4039.

VEGF and NF-kappa B/p50 joint detection in benign and malignant salivary gland pleomorphic adenoma determination and prognosis evaluation of application value and significance

ZHANG QiangLIU JiangCHEN HuiBI LeiDepartment of Stomatology,the Affiliated Hospital of Hebei United University,Hebei Province,Tangshan063000, China

Objective To study the expression and it significance of VEGF and NF.κB/p50 in cell.rich and matrix. rich polymorphous adenomas of salivary gland.Methods 50 cases of salivary gland pleomorphic adenoma tissue paraffin specimens were collected in the Affiliated Hospital of Hebei United University and Kailuan General Hospital from March 2007 to June 2012,and were detected by the method of immunohistochemical staining SP（25 cases of matrix rich type were in group A,25 cases of cell type were in group B）in the expression of VEGF and the nf.kappa B/p50 situation,and peritumoral were compared and analyzed with 25 cases of normal salivary gland tissue expression in the control group.Results The IOD value of VEGF in group A was（153.13±60.81）;the IOD value of group B was（954.65±305.79）;IOD value of control group was（52.46±9.76）,the differences between the three groups had statistical significance（P＜0.05）.The NF.kappa B p50 IOD values in group A was（43.40±5.56）;the IOD value of group B was（529.79±163.81）;IOD value of control group was（6.83±1.90）,the differences between the three groups had statistical significance（all P＜0.05）.Conclusion VEGF,the NF.kappa B p50 joint detection in benign and malignant salivary gland pleomorphic adenoma judgement has practical application value,better for the treatment of pleomorphic adenoma and prognosis judgement,can identify different classification of the salivary gland pleomorphic adenoma and to guide clinical diagnosis and treatment with helpful.

VEGF;NF.κB p50;The joint detection;Salivary gland pleomorphic adenoma

R781.1

A

1673-7210（2014）02（a）-0041-03

2013.10.30本文編輯：衛軻)

河北省科學技術研究與發展計劃項目(編號11276135)；河北省唐山市科學技術研究與發展計劃衛生臨床研究項目任務分解計劃(編號11150205A.9)。

張強(1975.)，男，碩士，副主任醫師，主要從事口腔疾病防治研究。