大羅傘鮮品根、莖、葉揮發油成分的GC-MS分析

秦慶芳，許蓉蓉，李勇文，楊新平，李 麗，楊成芳，谷立勍（.柳州食品藥品檢驗所，廣西 柳州 545006；.桂林醫學院藥學院，廣西桂林 54004；.廣西壯族自治區食品藥品檢驗所，南寧 500）

大羅傘即茜草科植物九節Psychotria rubra（Lour.）Poir.[1]，以根、葉入藥，別名九節木、山大刀等，在我國廣西境內有較廣泛的分布，為壯族民間用藥，具有清熱解毒、消腫拔毒的功效，臨床可用于治療白喉、扁桃體炎、咽喉炎、痢疾、腸傷寒、胃痛和風濕骨痛；其葉可外用于治療跌打腫痛、外傷出血、毒蛇咬傷、瘡瘍腫毒、下肢潰瘍。目前，關于大羅傘根、莖、葉揮發油成分的研究尚未見報道。為此，筆者嘗試采用氣相色譜-質譜（GC-MS）聯用技術對其揮發油進行分析，以期為大羅傘藥材的進一步開發利用提供科學依據。

1 材料

1.1 儀器

7890A-5975C 型GC-MS 儀（美國安捷倫公司）；全玻璃揮發油測定器（天津玻璃儀器廠）；AE240型電子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；粉碎機（浙江省溫嶺市大鵬機械有限公司）；DHG-9123A 型電熱鼓風干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）。

1.2 藥材

大羅傘于2013年10月采摘自廣西桂平太平山動植物保護區，經桂林食品藥品檢驗所饒偉文主任中藥師鑒定為茜草科植物九節P.rubra（Lour.）Poir.。

1.3 試劑

正構烷烴C8～C40（質量濃度：500μg/ml，美國AccuSandard公司）。

2 方法

2.1 揮發油的提取

將采摘12h 內的大羅傘藥材根、莖、葉分別粉碎成細粉，各精密稱取約100g，置于揮發油測定器中，分別加水500ml，按2010年版《中國藥典》（一部）附錄“揮發油測定”項下甲法提取揮發油[2]，取揮發油層，用乙醚溶解并定容至1ml，用無水硫酸鈉干燥，再經0.45μm微孔濾膜濾過，即得。

2.2 GC條件

色譜柱：HP-5MS毛細管柱（30m×250μm，0.25μm）；流速：1ml/min；進樣口溫度：250℃；不分流進樣；程序升溫：起始溫度80℃，然后以10℃/min的速率升至190℃，保持5 min，再以5℃/min的速率升至230℃，再以10℃/min的速率升至300℃，保持20min；傳輸線溫度：280℃。

2.3 MS條件

離子源：電轟擊電離（EI）源；四極桿溫度：150℃；離子源溫度：230℃；溶劑延遲2min；增益系數1.00＝1306V；質量掃描范圍（m/z）：20～500amu。

3 GC-MS分析[3-10]

取“2.1”項下溶液，按上述GC-MS條件對大羅傘根、莖、葉的揮發油成分進行分析，總離子流圖見圖1。

圖1 總離子流圖A.根；B.莖；C.葉Fig 1 TIC of volatile oilA.root；B.stem；C.leave

對圖1中的各峰進行峰純度檢查，再將各成分的質譜圖與NIST08標準譜庫進行比對。以圖1C 中的t＝23.874峰為例，其質譜圖與標準譜庫中的同分異構體Isophytol（3，7，11，15-Tetramethyl-1-hexadecen-3-ol，編號：133809）和1-Hexadecen-3-ol，3，5，11，15-tetramethyl（編號：133817）的相似度均極高，見圖2。

經分析，大羅傘的根、莖、葉揮發油分別分析出23、38、27個成分，扣除2個塑化劑峰及相對含量過低、碎片不完整的峰，根、莖、葉確定出7、12、5個成分，分別占各自揮發油總量的91.7%、83.6%、85.4%，均檢出肉豆蔻酸、十五烷酸、棕櫚酸等成分。使用面積歸一化法對各成分含量進行計算，結果表明棕櫚酸為主要檢出成分，分別占根、莖、葉中各自揮發油總量的66.0%、60.4%、71.8%。大羅傘根、莖、葉的揮發油化學成分分析結果分別見表1、表2、表3。

圖2 t＝23.874 min峰與標準譜庫編號133809、133817的MS圖A.t＝23.874min峰；B.標準譜庫編號 133809；C.標準譜庫編號133817Fig 2 MS of peak（t＝23.874 min）from TIC of volatile oil in leavesA.t＝23.874min peak；B.No. 133809；C.No.133817

表1 大羅傘根的揮發油化學成分分析Tab 1 Chemical constituents and relative content of volatile oil in roots of P.rubra

表2 大羅傘莖的揮發油化學成分分析Tab 2 Chemical constituents and relative content of volatile oil in stems of P.rubra

4 討論

KI 是氣相色譜定性指標的一種參數。試驗中計算KI 所用保留時間均為扣除背景后的保留時間，考慮到峰面積較大的成分存在保留時間漂移，例如根的揮發油中棕櫚酸峰保留時間為24.393min，而使用分流比20∶1進樣后的保留時間為24.078min，故本試驗使用分流比計算KI。

表3 大羅傘葉的揮發油化學成分分析Tab 3 Chemical constituents and relative content of volatile oil in leavesof P.rubra

由于貯存時間對植物揮發油的含量有顯著影響[11]，故本試驗選用采摘12h內的大羅傘作為樣品。

綜上所述，本試驗采用GC-MS 聯用技術分析大羅傘根、莖、葉的揮發油，方法精密度、穩定性和重復性均良好，可作為大羅傘質量分析和鑒別的科學依據。

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