GC法測定聚卡波非鈣中殘留異丙醇

邢琳琳，聶 磊

（1.山東大學藥學院，山東濟南250012；2.山東新華制藥股份有限公司，山東淄博255000）

GC法測定聚卡波非鈣中殘留異丙醇

邢琳琳1，2，聶 磊1

（1.山東大學藥學院，山東濟南250012；2.山東新華制藥股份有限公司，山東淄博255000）

目的建立頂空氣相色譜法測定聚卡波非鈣中殘留異丙醇的方法。方法采用氣相色譜頂空進樣法，ZB－624毛細管柱，以氮氣為載氣，FID檢測器。結果殘留異丙醇含量在50～5 000μg·g－1范圍內具有良好的線性，線性方程為Y＝－2 933＋4 947X，相關系數r＝0.999 66（n＝5），平均回收率為94.6%，RSD＝1.79%，檢測限為2.5μg·g－1。結論該方法靈敏、準確，可以有效控制聚卡波非鈣中異丙醇殘留。

聚卡波非鈣；異丙醇；氣相色譜法

聚卡波非鈣（calcium polycarbophil）最早由美國雅培公司開發，在歐美、日本已廣泛使用，用于腸易激綜合征（IBS）及各種原因便秘癥狀的緩解。2011年9月，聚卡波非鈣片（商品名為利波非）在中國上市。該藥適用于不宜攝入鈉的患者，如水腫、高血壓、心衰的慢性便秘等患者［1］。在聚卡波非鈣原料藥的生產過程中用到了異丙醇，因此可能在聚卡波非鈣中殘留，異丙醇為《中國藥典》2010年版中規定的要求限制使用的第三類溶劑［2］，考慮到其毒害，為了聚卡波非鈣的用藥安全，需要建立準確、可靠的分析方法用于聚卡波非鈣原料藥中殘留異丙醇含量的檢測［3～8］，對其殘留量加以控制，以確保藥品中殘留的異丙醇不會對人體造成危害。

1 儀器和試藥

1.1 儀器 氣相色譜儀（島津GC－2010），頂空進樣器（PE Turbomatrix40），電子天平（Mettler XS105），色譜柱：ZB－624（6%氰丙基苯基－94%二甲基聚硅氧烷，30 m×0.53 mm，膜厚3.0μm）。

1.2 試藥 異丙醇（分析純）；水（超純水）；聚卡波非鈣（山東新華制藥股份有限公司，批號：14037、14038、14039）等。

2 方法和結果

2.1 色譜條件 采用程序升溫方式，柱溫：70℃保持7 min，以每分鐘30℃的升溫速率升至100℃，保持5 min；檢測器溫度：250℃；進樣口溫度：150℃；檢測器：氫火焰離子化檢測器（FID）；載氣：N2；載氣流速：5 mL·min－1；分流比：10∶1。

自動頂空進樣器條件：爐溫：90℃；針溫：100℃；傳輸線溫度：105℃；加熱時間：30 min；加壓時間：2 min；進樣體積：1 mL。

2.2 溶液制備 標準溶液：稱取異丙醇約0.1 g，于已加有少量超純水的100 mL容量瓶中，然后加超純水稀釋至刻度，搖勻，作為標準溶液A。取1.0 mL標準溶液A，于200 mL容量瓶中，加超純水至刻度，搖勻，作為標準溶液B。取標準溶液B 5.0 mL，于20 mL頂空瓶中，加1.0 g無水硫酸鈉，密封。

供試品溶液：精密稱取聚卡波非鈣樣品約200 mg，于50 mL的帶蓋離心管中，加10 mL超純水，密封離心管，劇烈振搖使樣品充分分散，然后在振蕩器上機械振搖60 min后（平放于振蕩器上），放在離心機內，轉速2 000 rpm，離心10 min，將上清液小心轉移至20 mL容量瓶中；再加5 mL超純水，密封離心管，劇烈振搖，然后在振蕩器上機械振搖30 min后，離心10 min，將上清液小心轉移至同一20mL容量瓶中；再加5 mL超純水，重復上述操作，將上清液小心轉移至同一20 mL容量瓶中，用超純水稀釋至刻度，搖勻。取上述溶液5.0 mL，于20 mL頂空瓶中，加1.0 g無水硫酸鈉，密封。

樣品空白溶液：精密稱取已于105℃干燥48 h的聚卡波非鈣樣品0.2 g，按供試品溶液的制備方法制備。

2.3 專屬性測試 取空白溶液、標準溶液、樣品空白溶液、標準加樣品空白的混合溶液（向已于105℃干燥48 h的樣品中加入5.0 mL標準溶液和5.0 mL超純水，按樣品制備方法同法操作），依次放入自動頂空進樣器中，依法測定，結果空白溶液、樣品空白溶液中在異丙醇峰附近均無干擾峰。圖譜見1，2。

圖1 標準溶液色譜圖

2.4 線性試驗 精密稱取異丙醇適量，用水溶解并稀釋成每1 mL中分別含0.5、5、10、30、50μg的溶液，依法測定，以濃度（X）為橫坐標，峰面積（Y）為縱坐標，繪制標準曲線圖，計算回歸方程，Y＝－2 933＋4 947X，r＝0.999 66（n＝5），異丙醇濃度在50～5 000μg·g－1范圍內，具有良好的線性。

圖2 混合溶液色譜圖

2.5 回收率試驗 精密稱取9份聚卡波非鈣（105℃干燥48 h）0.2 g，分別加入異丙醇溶液（10、100、1 000μg·mL－1）各1 mL，按供試品溶液制備方法同法制備，使測試液中異丙醇含量分別為0.5、5、50 μg·mL－1（每個濃度制備3份），取標準溶液進樣6次、樣品空白溶液進樣1次、準確度測試液各進樣1次，依法測定，平均回收率為94.6%，具有良好的準確度。測試數據見表1。

表1 回收率試驗結果

2.6 重復性試驗 按標準溶液制備方法制備6份標準溶液于頂空瓶中，將頂空瓶依次放入自動頂空進樣其中，依法測定，計算異丙醇峰面積的RSD＝1.4%，重復性良好。

2.7 檢測限與定量限 取適當濃度的異丙醇溶液加入樣品空白溶液中，依法制備，同法配制3個頂空瓶溶液。頂空進樣測定，記錄色譜圖，當信噪比S／N＝3時，即為異丙醇的檢測限，經測定此時異丙醇濃度為0.025μg·mL－1，相當于樣品中異丙醇含量2.5 ppm；當信噪比S／N＝10時，即為異丙醇的定量限，經測定此時異丙醇濃度為0.100μg·mL－1，相當于樣品中異丙醇含量10.0 ppm。

2.8 樣品測定 分別取3個批號的聚卡波非鈣樣品（批號：14037、14038、14039），依法測定，結果3批樣品中均未檢出異丙醇殘留。

3 討論

3.1 本方法是應日本雅培公司要求開發。在此之前，中方和日方對聚卡波非鈣中殘留異丙醇的分析方法做了大量的研究工作，氣相色譜、液相色譜均做了方法研究。因聚卡波非鈣本身理化性質的原因，到目前為止，該樣品尚未找到能有效溶解它的溶劑，給方法研究帶來很大難度。我們曾經嘗試用酸、堿破壞的方法對樣品進行溶解，但酸堿試劑中存在的不明有機雜質給方法的專屬性帶來很大的困難，在異丙醇峰附近存在很多比異丙醇峰峰面積大得多的不明峰，給檢測限、定量限和專屬性帶來干擾。通過全面考察聚卡波非鈣的整個工藝流程，我們最終確定了現有方法，經過驗證，該方法準確可靠、重現性好，日本雅培公司對該方法予以了肯定和接受。

3.2 頂空瓶壓力的確定在方法開發過程中，最初的頂空瓶加壓壓力定在10 psi（約0.069 MPa），但出現了頂空預進樣現象，通過多次試驗，最后調節頂空加壓壓力到13 psi（約0.090 MPa），預進樣現象消除。

4 結論

用氣相色譜頂空進樣法對聚卡波非鈣中殘留異丙醇進行測定，回收率高，檢測靈敏度高，重現性好，測定結果準確可靠，各項驗證的結果均符合要求，證明該分析方法適用于聚卡波非鈣中殘留異丙醇的測定。

［1］ 韓振杰，袁耀宗.聚卡波非鈣的藥理及臨床研究［J］.中國新藥與臨床雜志，2012，31（6）：291－294.

［2］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版（二部）［S］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：附錄.

［3］ 趙勁松，張弘，周天杰，等.西沙比利原料中異丙醇殘留量的氣相色譜測定［J］.中國藥業，2003，12（4）：38－39.

［4］ 王春霞，王新牛，張言軍，等.用GC測定阿替洛爾片中異丙醇殘留［J］.醫學信息，2013，26（4）：457－458.

［5］ 劉路，張圣華，宋冬梅，等.雷貝拉唑鈉中有機溶劑殘留的頂空毛細管氣相色譜法測定［J］.中國醫藥工業雜志，2013，44（11）：1148－1150.

［6］ 劉冬，楊敬芝，杜守穎，等.頂空氣相色譜法測定大孔樹脂提取物中的殘留溶劑研究［J］.藥物分析雜志，2009，29（11）：1877－1880.

［7］ 馮光玲，丁文娟，馮愛國，等.毛細管氣相色譜法測定依諾昔酮原料藥中6種有機溶劑殘留量［J］.中國藥房，2014，25（13）：1210－1211.

［8］ 王梅.毛細管氣相色譜法測定尼莫地平原料藥中殘留溶劑［J］.中國醫學雜志，2012，47（14）：1168－1169.

Determ ination of isopropanol in calcium polycarbophil by gas chromatography

XING Lin-lin1，2，NIE Lei1
（1.School of Pharmaceutical Sciences，Shandong University，Jinan 250012，China；2 Shandong Xinhua Pharmaceutical Co.，Ltd.，Zibo 255000，China）

ObjectiveUsing GCmethod for the determination of isopropanol in calcium polycarbophil.MethodsU-sing Head－Space GCmethod，the column was ZB－624 capillary column；The carrier gas was nitrogen and FID detector was adopted.ResultsIsopropanol had a good linearity in the range of 50～5 000μg·g－1，the linear equation was Y＝－2 933＋4 947X（r＝0.999 66）（n＝5）.The average recovery was 94.6%，and the RSD＝1.79%.The detectability was 2.5μg·g－1.ConclusionThemethod was sensitive and accurate，and suitable for the determination of isopropanol in calcium polycarbophil.

Calcium polycarbophil；Isopropanol；GC

R927.1

A

2095－5375（2014）08－0461－003

山東省研究生教育創新計劃（No.SDYY12074）

邢琳琳，女，研究方向：藥物分析，E－mail：13853328043＠163.com

聶磊，男，博士研究生，副教授，研究方向：中藥質量評價，Tel：0531－88382330，E－mail：nielei2004＠sdu.edu.cn