血細胞分析儀檢測結果影響因素淺析

程瑞斌 湖北省咸寧市中心醫院檢驗科 437100

血細胞分析儀具有快速、準確、重復性好等特點，已被廣泛運用在臨床常規檢驗中，不僅能夠提高臨床工作效率及檢驗質量，同時為臨床提供更多的參數和診斷指標，更好地為臨床服務。但由于其自身檢測原理的限制，在干擾因素同時存在的情況下，導致檢測結果出現誤差時有發生，造成誤診或提供不合理的治療。為了避免這些因素對檢測結果造成影響，現對工作中常出現的影響因素進行綜合分析，以便采用相應的處理措施保證血液分析儀檢測結果的準確性。

1 影響檢測結果的因素分析

1.1 標本因素

1.1.1 標本的采集和運輸。不規范的標本采集和運輸均有可能導致檢驗結果不準確。如是否為真空靜脈采血，采血是否順利，混勻是否及時，有沒有從進行靜脈給藥、補液、輸血的肢體末端采血；有沒有及時送檢，送檢時樣本唯一性標志與患者信息是否一致，運輸過程中有沒有產生劇烈震動等。

1.1.2 血液與抗凝劑的比例。抗凝劑與血液的比例為1.5～2.2mg的EDTA－K2抗凝1ml的全血。如果血量過多抗凝不充分，則會出現不同程度的小凝塊，影響PLT和WBC的計數，同時易造成儀器的半堵孔，若未及時發現處理，影響后面樣本檢測結果的準確性；血量過少，易使細胞形態發生改變，分類結果不準確。

1.1.3 標本的性質。如患冷凝集素綜合征的患者，血液中冷凝集素引起RBC在室溫條件下聚集，使RBC數減少，HCT降低，造成MCHC假性增高；高脂血癥患者的乳糜血標本可影響透光度，高膽紅素血癥患者標本由于膽紅素測定波長與經溶血劑作用后的HGB測定波長較為接近，二者均可造成HGB假性增高；白血病患者的血液標本中白細胞的膜較脆而易被破壞，導致WBC計數降低，這些細胞碎片也會影響分類的結果；冷球蛋白增加疾病如骨髓瘤、癌癥、白血病、巨球蛋白血癥、糖尿病等均可導致WBC計數假性增高。

1.1.4 抗凝劑、藥物等因素。如EDTA抗凝劑可使少數人的血小板發生凝集，從而導致血細胞分析儀測定的血小板數值假性減少，即EDTA依賴性假性血小板減少癥。臨床上用ATP后血小板容易發生聚集，因ATP分解，產生大量ADP，而ADP是一種血小板誘導劑，易使血小板發生聚集可影響PLT計數［1］；輸液加入脂肪乳的患者血小板會假性增高；輸入右旋糖酐，血液分析時可產生假性凝集，造成血小板假性降低。

1.2 儀器因素

1.2.1 儀器的計數原理。目前大多數血細胞分析儀檢測原理采用電阻抗法，根據細胞體積大小，通過微孔產生脈沖數計數的，儀器只識別顆粒的大小而不能識別顆粒的性質，當其體積高于或低于儀器設定的閾值時，往往會造成誤判。如有核紅細胞、大血小板影響WBC計數與分類，細胞碎片、小紅細胞、大血小板、血小板凝集可影響PLT計數，極少數患者RBC能抵抗溶血劑的破壞，而使WBC假性增高。

1.2.2 儀器的分類原理。血細胞分析儀對白細胞分類與常規的涂片染色分類有本質不同，儀器只是依靠檢測細胞幾種物理特性而間接地加以計數和分類，而常規分類除細胞大小外，要根據細胞染色反應，核的形態及染色質的著色情況，胞質的著色及顆粒才能確定為某種細胞。儀器不能準確識別原始細胞、幼稚細胞、未成熟粒細胞、不典型淋巴細胞、NRBC等，僅作某些報警提示。在有些情況，特別是病理條件下，儀器測定結果并不可靠或難以確定，還需在顯微鏡下行復檢。1.2.3 儀器的工作環境。血細胞分析儀是一種精密的電子儀器，目前大多數儀器細胞計數設計原理為電阻抗法。采用電阻抗法進行細胞計數易受電源或其他射頻的干擾，特別是易引起血小板計數的假性增高。另外室內溫度和濕度不符合要求對儀器檢測結果也會產生較大影響。

1.2.4 儀器的日常維護。規范的日常保養和維護是保證儀器正常運行的前提，若儀器管路不清潔可導致空白計數本底增高。

1.2.5 儀器的性能驗證。血液分析儀使用一段時間后測定結果往往會發生漂移，若不定期校準，檢測結果會出現較大的偏差。

1.3 檢驗者因素 嚴格的崗前培訓、規范的操作及應有的責任心是保證檢測結果準確性的重要條件。檢驗工作者不按正確的方法操作，缺乏經驗或不重視儀器報警信息的復檢等都可能會給臨床提供錯誤的信息。

2 處理措施

由于各種因素的干擾，儀器檢測結果可能會出現各種異常情況，如檢測值過高或過低，儀器報告各參數間出現矛盾，結果出現警示符號，直方圖或散點圖出現與診斷明顯不符等。檢驗工作者先要仔細閱讀分析儀給出的參數、儀器報警提示、直方圖或散點圖的變化，對可能存在的血液學異常或技術性影響因素等進行初步判斷，然后結合本科室的復檢規則、標本外觀及患者的臨床情況來決定采取何種處理措施。2.1 觀察標本 檢查樣本的“唯一性標志”，避免張冠李戴；若血液與抗凝劑比例不恰當、標本溶血、存在凝集等干擾，有必要重新采血再行檢測；高脂血癥、高膽紅素血癥患者標本，應離心用等量稀釋液置換血漿后混勻再行測定；若標本出現冷凝集溫浴后混勻再行檢測。

2.2 重新檢測 若樣本外觀正常，重新檢測，可以觀察儀器的性能，如結果的重復性是否符合要求，有無突發因素如噪音、電壓不穩等的干擾，另外也可排除操作不規范引起的結果異常等。

2.3 人工計數 儀器計數結果超出規定范圍、過低或過高、與鏡下估算有較大出入、儀器提示存在細胞碎片或難溶紅細胞、直方圖不規則，需進行人工血細胞計數。

2.4 涂片染色鏡檢及人工分類 通過觀察RBC、WBC及PLT形態，并估計WBC、PLT的數量，看與儀器報告是否相符，從而糾正因儀器識別能力的限制或故障造成的誤差。如見有核紅細胞則應行顯微鏡下分類計數，報告結果時有核紅細胞應從白細胞數中減去；見幼稚細胞應在報告單中注明以提示臨床。觀察血小板的分布情況，如有無聚集、是散在還是成堆分布，可以幫助辨別血小板增減的性質。鏡檢對血液分析至關重要，可以為臨床診斷提供非常重要信息，也可發現某些結果不準確的原因，條件允許應盡可能提高鏡檢率。

2.5 重采標本復查 懷疑分析前因素引起的檢測結果異常或與既往結果有較大波動，應與臨床聯系，核實樣本抽取情況，必要時通知臨床重新采血復查；懷疑抗凝劑因素引起的血小板減少應更換抗凝劑采血復查。

3 討論

3.1 嚴格的崗前培訓，標準化的操作是確保檢測結果準確的重要保障，否則再好的儀器得出的結果也會缺乏可信度。

3.2 血細胞分析儀具有快速、省時省力、重復性和穩定較高等優點，可提高常規工作的效率，減輕勞動強度。但由于儀器自身檢測原理的限制和多種因素對檢測結果的影響，血細胞分析儀只能作為初篩手段，對可疑或異常結果仍需要顯微鏡復檢［2］。

3.3 儀器的工作環境是保證儀器正常運行的先決條件，儀器的使用應遠離強的電磁場，有穩壓的電源，儀器的外殼有良好的接地。良好的工作環境還要求實驗室內保持清潔無塵，室溫應控制在18～30℃之間，相對濕度小于80%。

3.4 定期校準是保證結果準確性的重要環節，每日的隨機質控是了解儀器是否處于正常工作狀態的有效手段。

3.5 血細胞形態學是診斷血液系統疾病的重要手段之一［3］。對于臨床診斷懷疑血液病、白細胞過高或過低、三系細胞減少的病例，儀器報警提示有原始細胞、幼稚細胞、異形細胞的標本，應涂片染色鏡檢觀察細胞形態，避免造成血液病漏診。

3.6 血小板計數的準確性是臨床診斷和治療血小板減少癥的重要指標。多種因素可引起血小板假性減少，假性血小板減少給臨床造成很大的困擾。血小板聚集是引起假性血小板減少的重要原因之一［4］，顯微鏡觀察是確認血小板聚集唯一的方法，故對血小板減少的標本，需涂片鏡檢觀察是否有血小板聚集現象以確保檢驗結果的可靠性。

總之，血細胞分析儀只能作為初篩手段，檢驗人員在審核結果時特別是儀器出現異常報警時，應綜合考慮儀器檢測的各種影響因素，以便采取正確的處理措施。只有這樣才能為臨床醫療提供可靠、真實的實驗數據，更好地為臨床服務。

［1］ 李永紅，鐘步云.血細胞分析儀測血小板結果偏低的原因及糾正方法〔J〕.臨床檢驗雜志，2001，9（2）：112－113.

［2］ 彭黎明，邱廣斌，趙威，等.全自動血細胞計數和白細胞分類計數的復檢規則〔J〕.中華檢驗醫學雜志，2007，30（4）：377－379.

［3］ 劉厚麗，姜茹，矯秀.血細胞形態學檢驗的經驗體會〔J〕.醫學檢驗與臨床，2000，21（1）：127.

［4］ 羅春麗.臨床檢驗〔M〕.北京：人民衛生出版社，1997：22.