小鼠皮質神經祖細胞分化過程中Twist1的功能

付紅燁，陰 彬，彭小忠

（中國醫學科學院基礎醫學研究所北京協和醫學院基礎學院醫學分子生物學國家重點實驗室，北京 100005）

大腦皮質是哺乳動物中樞神經系統的組成部分，是完成學習、語言和記憶等各種生物學功能最主要的器官。神經系統起源于外胚層，發育早期，神經外胚層內陷閉合形成神經管，神經管前端的神經上皮細胞逐漸轉化為神經祖細胞，最后發育成為大腦［1］。神經祖細胞分布于皮質內側的室管膜區（ventricular zone，VZ），其增殖與分化受多種基因與信號通路的調控，例如，Wnt通路成員β-catenin可以通過調控轉錄因子Pax6維持神經祖細胞的自我更新［2］。

堿性螺旋-環-螺旋（basic helix-loop-helix，bHLH）模體是一種典型的轉錄因子結構域，含有此結構域的蛋白大多與轉錄調控、細胞分化以及命運決定相關，這類蛋白在機體發育過程中起到重要的作用。Twist是bHLH蛋白家族的成員之一，最早在果蠅中發現，是果蠅原腸胚形成以及中胚層發育過程中的一個重要轉錄因子。Twist基因家族在人和小鼠等物種中非常保守［3］。Twist1是脊椎動物中Twist的同源基因，在小鼠中Twist1的功能與中胚層及神經嵴細胞發育相關［4-6］，而Twist1在大腦皮質發育中的作用少有報道，本研究以小鼠為研究對象，初步探討Twist1在皮質發育過程中的表達及功能。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

SPF級ICR小鼠［8～10周齡，26～30 g，北京維通利華公司，合格證號:SCXK（京）2012-0001］;HEK-293ET細胞系（中國醫學科學院基礎醫學研究所蔣澄宇教授饋贈）;pGEM-T質粒載體（Promega公司）;pCAGIG質粒載體（耶魯大學鐘偉民教授饋贈）;DNA聚合酶、DNA體外……