AT-Ⅲ活性與D-D含量變化在不同程度肝損傷中的應用

覃乃輝，裴正玲，周達利，秦 立，黃慧嬪

（1.廣西壯族自治區人民醫院檢驗科，南寧530021；2.廣西壯族自治區南寧市第一人民醫院檢驗科530022）

肝臟是平衡抗凝與凝血的場所，肝臟疾病常常導致凝血功能的障礙，因此肝臟在凝血系統中占有重要的位置［1-2］。肝臟不同程度的損害將導致凝血功能不同程度異常改變。血漿D二聚體（D-D）是可敏感地反映抗凝與凝血喪失平衡的一種標志［3-4］，抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）是相關凝血因子與凝血酶的蛋白酶抑制劑［5］；血漿D-D的增高提示了患者機體處于高凝的狀態。AT-Ⅲ活性與血漿D-D 含量變化可反映肝臟的損害程度，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011年11月到2013年5月肝臟疾病患者255例，入選標準為：按肝病科的診斷標準［6］，255例患者均被確診為慢性肝病、肝硬化或肝癌，排除近期內服用抗凝藥物或溶栓藥物、脾切除術后、心肺功能不全與精神性疾病患者。根據肝臟疾病的類型將其分為3 組，100例肝癌患者為A組，其中男76例，女24例，年齡31～76歲，平均（52.8±6.7）歲，其中肝癌Ⅰ期患者20例，Ⅱ期患者25例，Ⅲ期患者30例，Ⅳ期患者25例；其中合并癌栓45例，非合并癌栓55例；合并肝硬化代償期56例，合并肝硬化失代償期24例，非合并肝硬化20例。85例肝硬化患者為B 組，其中男68例，女17例，年齡28～74 歲，平均（47.3±6.4）歲，其中肝硬化代償期60例，肝硬化失代償期25例。。70例慢性肝病患者為C 組，其中男52例，女18例，年齡18～73歲，平均（45.8±7.6）歲。隨機選取76例健康體檢者為對照組，其中男56例，女20例，年齡18～70歲，平均（45.4±7.9）歲。各組間患者的年齡、性別差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法 用含3.2%檸檬酸鈉抗凝劑的真空采血管（浙江拱東醫療科技有限公司提供）空腹采取靜脈血3 mL，以2500 g 離心力離心15min 獲取血漿待測；D-D測定采用免疫比濁法，AT-Ⅲ定量測定采用發色底物法，試劑盒均由法國Stago 公司提供；使用Stago 全自動血凝分析儀進行測定。

1.3 觀察指標 記錄全部患者AT-Ⅲ活性與D-D含量。利用MELD積分［7］對肝臟疾病的終末期進行評價，其積分越低，提示肝臟的損傷程度越輕。

1.4 統計學處理 數據均采用SPSS 17.0 統計軟件進行統計分析，兩組間的計數資料采用χ2檢驗，兩組間的計量資料采用t檢驗，相關系數的計算采用Pear son 法，以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 組間AT-Ⅲ活性與D-D含量之間的比較A、B、C組患者的AT-Ⅲ活 性 分 別 為（64.34±19.76）%、（71.38±28.35）%、（83.12±11.76）%，顯著低于對照組，D-D含量分別為（2.56±2.04）、（1.69±1.87）、（1.01±0.49）μg／mL，顯著高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05），見表1。

表1 組間AT-Ⅲ活性與D-D 含量之間的比較（±s）

表1 組間AT-Ⅲ活性與D-D 含量之間的比較（±s）

＊：P＜0.05，與對照組比較。

組別 n AT-Ⅲ活性（%） D-D 含量（μg／m L）A組 10064.34±19.76＊ 2.56±2.04＊B 組 8571.38±28.35＊ 1.69±1.87＊C 組 7083.12±11.76＊ 1.01±0.49＊對照組7697.97±10.030.20±0.08

2.2 肝癌患者AT-Ⅲ活性與D-D含量之間的比較 （1）肝癌Ⅳ期AT-Ⅲ活性顯著低于肝癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期（P＜0.05）；肝癌Ⅳ期D-D 含量顯著高于肝癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期（P＜0.05）。（2）肝癌患者合并肝硬化失代償AT-Ⅲ活性顯著低于肝癌合并肝硬化代償（P＜0.05）；肝癌患者合并肝硬化失代償D-D含量顯著高于肝癌合并肝硬化代償（P＜0.05）。（3）肝癌合并癌栓AT-Ⅲ活性顯著低于肝癌非合并癌栓（P＜0.05）；肝癌合并癌栓D-D含量顯著高于肝癌非合并癌栓（P＜0.05），見表2。

2.3 肝硬化及慢性肝病患者AT-Ⅲ活性、D-D含量與MELD積分的相關性 肝硬化及慢性肝病患者155例，MELD積分是1～34 分，平均積分是（12.05±4.96）分，其中MELD≤9分共75例，占48.39%，10～19 分共65例，占41.94%，≥20 分共15例，占9.68%。AT-Ⅲ活性隨肝硬化及慢性肝病病情加重而降低，D-D 含量則隨肝硬化及慢性肝病病情加重而升高，AT-Ⅲ與MELD積分呈負相關（r＝-0.406，P＜0.05）；D-D與MELD積分呈正相關（r＝0.378，P＜0.05），見表3。

表2 肝癌患者AT-Ⅲ活性與D-D 含量之間的比較（±s）

表2 肝癌患者AT-Ⅲ活性與D-D 含量之間的比較（±s）

a：P＜0.05，b：P＜0.05，c：P＜0.05，d：P＜0.05，e：P＜0.05，f：P＜0.05，與Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期分別比較。

肝癌分期／合并癥 n AT-Ⅲ活性（%） D-D 含量（μg／m L）2080.12±16.540.99±0.81Ⅱ期 2580.14±19.631.25±1.14Ⅲ期 3070.23±23.871.89±1.39Ⅳ期 2560.75±19.43b 3.25±2.17a未合并肝硬化 2071.21±27.571.82±1.76合并代償期肝硬化 5672.45±21.231.78±1.85合并失代償期肝硬化 2461.97±25.24d 3.06±1.95c非合并門靜脈癌栓 5574.85±21.271.71±1.85合并門靜脈癌栓 4550.48±25.62f 4.56±3.54Ⅰ期e

表3 D-D 含量與AT-Ⅲ活性與MELD積分的相關性（±s）

表3 D-D 含量與AT-Ⅲ活性與MELD積分的相關性（±s）

g：P＜0.05；h：P＜0.05；i：P＜0.05；j：P＜0.05，與MELD≤9 分比較。

MELD 積分 AT-Ⅲ活性（%） D-D 含量（μg／mL）99.32±9.050.52±0.2810～19 分 92.36±8.25 g 0.86±0.41i≥20 分 87.47±8.97 h 0.98±0.29j MELD 積 分（r）≤9 分-0.4060.378

3 討 論

肝臟可參與機體合成代謝與分解代謝的主要場所，機體上主要的凝血因子基本上在肝臟內合成，因此，肝臟的不同程度上的損害將導致凝血功能的障礙［8］。AT-Ⅲ可抑制相關凝血因子與凝血酶的蛋白酶，AT-Ⅲ與肝臟的損害程度密切相關［9］；D-D 的含量可作為纖溶亢進與機體高凝狀態的標志，提示血栓性疾病與血液高凝病變的可能性［10］。AT-Ⅲ與D-D可提示肝臟不同損害可能存在的機制是：（1）AT-Ⅲ是肝臟產生的一種抑制凝血的蛋白酶，因此具有預防血栓形成的功能，肝臟的損傷會造成AT-Ⅲ活性的改變，反之，AT-Ⅲ活性的改變將反應肝臟不同程度的損傷［11-13］。（2）D-D 主要參與了纖維蛋白溶解系統，D-D 含量的變化常可提示血栓疾病的發生，作為了解纖溶功能的一個常用檢驗，D-D檢測的原理是：D-D與試劑中的D-D 抗體發生反應，如有血栓形成性疾病，D-D檢測將出現陽性反應，現可用于血栓形成性疾病的診斷或排除性診斷的一種檢測方法［14］。肝臟不同程度的損傷將出現相應程度的纖溶功能的障礙，因此D-D含量的變化可反映肝臟損傷的不同程度。（3）MELD是評價肝臟疾病終末期的一種常用指標，其積分越高提示肝臟的損傷程度越重［15-16］，而AT-Ⅲ活性與D-D 含量、MELD積分密切相關，再次證實了AT-Ⅲ活性和DD含量變化與肝臟損害程度關系密切。

本研究表明：患有肝臟疾病的患者AT-Ⅲ活性顯著低于健康體檢者，肝癌Ⅳ期AT-Ⅲ活性顯著低于肝癌Ⅲ期，肝癌患者合并肝硬化失代償AT-Ⅲ活性顯著低于肝癌合并肝硬化代償，肝癌合并癌栓AT-Ⅲ活性顯著低于肝癌非合并癌栓，AT-Ⅲ與MELD積分呈負相關，提示了AT-Ⅲ的活性越高，肝臟的損傷程度越低；患有肝臟疾病的患者D-D含量顯著高于健康體檢者，肝癌Ⅳ期D-D 含量顯著高于肝癌Ⅲ期，肝癌患者合并肝硬化失代償D-D 含量顯著高于肝癌合并肝硬化代償，肝癌合并癌栓D-D含量顯著高于肝癌非合并癌栓，D-D與MELD積分呈正相關，提示了D-D 含量越高，肝臟的損傷程度越重。有關研究結果表明：AT-Ⅲ活性隨肝臟疾病病情加重而降低，D-D含量則隨肝臟疾病病情加重而升高，這與本研究結果相符［17-19］。

綜上所述，肝臟損傷程度越重，AT-Ⅲ活性越低，D-D含量越高；反之，肝臟損傷程度越輕，AT-Ⅲ活性越高，D-D含量越低，對于肝臟疾病的診斷與治療及判斷肝臟損傷程度提供理論基礎。

［1］ 張冬磊，郝建宇，楊寧.肝硬化患者抗凝血酶-Ⅲ與終末期肝病評分模型相關性分析［J］.中國醫藥導報，2012，9（33）：52-53，56.

［2］ 馬偉.肝硬化患者凝血3 項和抗凝血酶Ⅲ檢測分析［J］.檢驗醫學與臨床，2012，9（6）：708-709.

［3］ 肖強，楊善峰.乙型肝炎肝硬化患者血清D-二聚體、纖維蛋白原及抗凝血酶-Ⅲ的測定意義［J］.實用肝臟病雜志，2011，14（3）：214-215.

［4］ 孫書書，賈德興，孫翠蘭.轉化生長因子-β1 與慢性乙型病毒性肝炎肝纖維化形成相關性探討［J］.遼寧醫學院學報，2012，33（6）：499-500，508.

［5］ 竟陳峻，畢竟.肝病患者血漿AT-Ⅲ、FDP和D-D聯檢的臨床價值［J］.放射免疫學雜志，2012，25（6）：707-708.

［6］ 劉興輝.丙型肝炎患者PTA、CHE、D-D檢測的臨床意義［J］.國際檢驗醫學雜志，2012，33（15）：1910.

［7］ Zhou XS，Qiao YF，Wu RP，et al.Study on related indexes of the coagulation and fibrinolytic system after renal ischemia reperfusion injury in Wistar rats［J］.Saudi Med J，2013，34（6）：579-583.

［8］ Saray A，Mesihovic R，Vukobrat-Bijedic Z，et al.Impact of sustained virus elimination on natural anticoagulant activity in patients with chronic viral hepatitis C［J］.Bosn J Basic Med Sci，2013，13（2）：84-88.

［9］ Kazerooni T，Ghaffarpasand F，Asadi N，et al.Correlation between thrombophilia and recurrent pregnancy loss in patients with polycystic ovary syndrome：a comparative study［J］.J Chin Med Assoc，2013，76（5）：282-288.

［10］ 羅春華.凝血功能四項、TF、AT-Ⅲ對原發性肝癌的診斷意義［J］.社區醫學雜志，2011，9（12）：3-4.

［11］ Nakahara K，Okuse C，Adachi S，et al.Use of antithrombin and thrombomodulin in the management of dissemina-ted intravascular coagulation in patients with acute cholangitis［J］.Gut Liver，2013，7（3）：363-370.

［12］ 陳楠，徐昆.肝素、抗凝血酶Ⅲ在腫瘤治療中的應用與展望［J］.重慶醫學，2011，40（20）：2062-2064.

［13］ 強占榮，易彩霞，林中，等.急慢性肝病患者血清白蛋白、前白蛋白及膽堿酯酶的變化特點［J］.廣西醫學，2010，32（5）：513-515.

［14］ 高碧云.重癥肝病患者凝血和纖溶指標觀察［J］.微循環學雜志，2009，19（3）：68-69.

［15］ James AH，Konkle BA，Bauer KA.Prevention and treatment of venous thromboembolism in pregnancy in patients with hereditary antithrombin deficiency［J］.Int J Womens Health，2013，3（5）：233-241.

［16］ Durczyński A，Szymański D，Nowicki M.Very high concentration of d-dimers in portal blood in patients with pancreatic cancer［J］.Pol Przegl Chir，2012，84（10）：521-525.

［17］ Sebastian S，Sylvestre S，Jayarajan D，et al.Molecular structure，Normal Coordinate Analysis，harmonic vibrational frequencies，Natural Bond Orbital，TD-DFT calculations and biological activity analysis of antioxidant drug 7-hydroxycoumarin［J］.Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc，2013，101（15）：370-381.

［18］ Zhang DL，Hao JY，Yang N.Value of D-dimer and protein S for diagnosis of portal vein thrombosis in patients with liver cirrhosis［J］.J Int Med Res，2013，41（3）：664-672.

［19］ Saray A，Mesihovic R，Gornjakovic S.Association between high D-dimer plasma levels and ascites in patients with liver cirrhosis［J］.Med Arh，2012，66（6）：372-374.