妊娠高血壓綜合征患者胎兒臍帶血管形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化＊

藍(lán)永洪，楊 智，黃明媚，齊亞靈，牛海艷△

（海南醫(yī)學(xué)院：1.形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)室；2.附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科；3.組織學(xué)與胚胎學(xué)教研室，海口571199）

娠高血壓綜合征（pregnancy induced hypertension，PIH），簡(jiǎn)稱妊高征，是妊娠期特有的疾病。發(fā)生率中國(guó)為9.4%～10.4%，國(guó)外為7.0%～12.0%［1］。該病嚴(yán)重影響母嬰健康，是孕產(chǎn)婦和圍生兒死亡的主要原因［2-3］，其中，子宮胎盤血流灌注下降是影響胎兒生長(zhǎng)發(fā)育的重要因素［4-5］。多普勒超聲顯示，妊高征患者胎兒臍帶血管血流動(dòng)力學(xué)發(fā)生明顯的變化［6-7］，而血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)與血管的管徑大小和管壁的順應(yīng)性有密切的關(guān)系，管徑的減小和管壁彈性的下降均會(huì)導(dǎo)致血流阻力增加，從而影響血流量的供給。國(guó)外學(xué)者Koech 等［8］研究表明，妊高征與臍帶血管的形態(tài)結(jié)構(gòu)變化有密切的關(guān)系。國(guó)內(nèi)有研究［9-10］也證實(shí)妊高征患者臍靜脈的中膜厚度、細(xì)胞核的數(shù)密度和面密度均增大，平滑肌的含量增多，彈性纖維、膠原纖維數(shù)目增多。但是臍帶有胎盤端和胎兒端，其血管的管徑、管壁、中膜、管壁／管徑比值等形態(tài)結(jié)構(gòu)各不相同［11］。因此，本研究通過(guò)收集妊高征患者胎兒臍帶標(biāo)本，分別取胎兒端、中間段和胎盤端的臍帶標(biāo)本制成石蠟切片，并進(jìn)行HE染色，然后在數(shù)碼顯微鏡下攝取圖像，在圖像分析軟件中分別檢測(cè)靜脈和動(dòng)脈的管徑大小、管壁和管壁／管徑比值，并與健康孕婦胎兒臍帶進(jìn)行對(duì)照分析，探討妊高征患者臍帶血管形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化，為研究妊高征對(duì)血管形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響機(jī)制及其對(duì)胎兒發(fā)育的影響提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料 收集海南醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科2012年1～12月的36例胎兒臍帶標(biāo)本，排除臍帶繞頸、臍帶真結(jié)、臍帶假結(jié)及臍帶血管扭曲等標(biāo)本。健康孕婦胎兒17例，妊高征患者胎兒19例，其中，輕度子癇前期患者9例，重度子癇前期患者6例，子癇患者4例，妊高征的診斷和分類標(biāo)準(zhǔn)參考樂(lè)杰主編的《婦產(chǎn)科學(xué)》［12］。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)儀器及軟件 生物組織自動(dòng)脫水機(jī)（ZT-12P2，孝感亞光醫(yī)用電子技術(shù)有限公司）；冷凍包埋機(jī)（YB-6LF，孝感亞光醫(yī)用電子技術(shù)有限公司）；手動(dòng)輪轉(zhuǎn)切片機(jī)（RM2235，Leica，德國(guó)）；光學(xué)顯微鏡（CX31，Olympus，日本）；專業(yè)數(shù)字?jǐn)z像頭（DPIXEL200，廣州市泰柯計(jì)算機(jī)有限公司）；Image-Pro Plus 6.0 圖像分析軟件（Media Cybernetics，美國(guó)）。

1.2.2 切片制備、圖像采集及測(cè)試 分別取胎盤端、胎兒端和中間段的臍帶組織進(jìn)行固定、脫水、包埋，制成4μm的石蠟切片，常規(guī)HE 染色，中性樹膠封片。在安裝外置式攝像頭的光學(xué)顯微鏡物鏡下拍攝臍帶靜脈和動(dòng)脈的圖像，并保存于計(jì)算機(jī)待測(cè)。采用Image-Pro Plus 圖像分析軟件分別測(cè)試不同段臍帶靜脈和動(dòng)脈的血管管徑和管壁厚度，并計(jì)算管壁／管徑的比值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料用±s表示。采用單因素方差分析（ONE-WAY ANOVA）及基于此的組間多重比較方法（SNK法）比較不同組間的形態(tài)結(jié)構(gòu)參數(shù)，上述分析均采用雙側(cè)檢驗(yàn)，檢驗(yàn)水平α＝0.05，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 一般情況比較 健康孕婦17例，年齡23～37歲，孕周37～41 周；妊高征患者19例，年齡22～44 歲，孕周32～39 周。與健康孕婦相比，妊高征患者的血壓升高，孕周下降，胎兒體質(zhì)量減輕（P＜0.05），而年齡、臍帶長(zhǎng)度和胎盤質(zhì)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 各組孕婦不同節(jié)段臍帶血管形態(tài)結(jié)構(gòu)比較 從胎盤端到胎兒端，臍帶靜脈和動(dòng)脈管徑、管壁／管徑比值逐漸減小、而管壁厚度逐漸增大（P＜0.05）。與健康孕婦相比，妊高征患者胎兒的臍帶靜脈和動(dòng)脈管徑、管壁／管徑比值明顯減小，管壁厚度明顯增大，并隨病情嚴(yán)重程度逐步加?。≒＜0.05）。

表1 健康孕婦和妊高征患者的一般情況比較（±s）

表1 健康孕婦和妊高征患者的一般情況比較（±s）

組別 n年齡（歲） 孕周（周） 收縮壓（mm Hg）舒張壓（mm Hg）臍帶長(zhǎng)度（cm）胎兒體質(zhì)量（g）胎盤質(zhì)量（g）±8.53089.1±560.7524.1±101.1輕度子癇前期患者 932.3±5.636.6±2.3151.9±17.587.8±11.853.7±11.32351.7±605.5507.9±108.0重度子癇前期患者 634.5±7.936.3±2.4165.2±4.2100.0±7.050.5±9.12250.0±867.8411.7±145.1子癇患者 436.5±1.335.3±1.7192.0±9.8112.0±25.851.0±14.02185.0±390.6408.8±64.3 P健康孕婦 1732.0±4.338.7±1.0113.9±8.672.5±3.950.40.3910.0020.0010.0010.8720.0050.082

表2 不同段臍帶靜脈形態(tài)結(jié)構(gòu)比較（±s）

表2 不同段臍帶靜脈形態(tài)結(jié)構(gòu)比較（±s）

＊：P＜0.05，與健康孕婦比較；＃：P＜0.05，與輕度子癇前期患者比較；▲：P＜0.05，與胎兒端比較；▼：P＜0.05，與中間段比較。

組別 n 胎兒端 中間段 胎盤段P管徑（μm）健康孕婦 17611.84±169.76748.10±124.10▲ 837.98±103.63▲▼ 0.001輕度子癇前期患者 9505.66±100.83＊ 622.28±100.04＊▲ 654.13±121.18＊▲▼ 0.019重度子癇前期患者 6405.05±120.65＊＃ 528.70±162.92＊＃▲ 637.23±109.53＊?！?0.028子癇患者 4367.67±57.36＊＃ 493.88±98.56＊＃▲ 561.36±105.70＊＃▲▼ 0.038 P 0.0040.0010.001管壁（μm）健康孕婦 17633.26±79.49555.51±105.01▲ 518.62±113.25▲▼ 0.001輕度子癇前期患者 9803.45±54.80＊ 693.66±91.31＊▲ 652.89±69.53＊▲▼ 0.001重度子癇前期患者 6706.62±107.58＊＃ 558.23±122.89＊＃▲ 499.47±113.14＊?！?0.019子癇患者 4703.88±99.11＊＃ 611.69±83.90＊?！?511.01±87.17＊?！?0.043 P 0.0010.0180.012管壁／管徑健康孕婦 171.12±0.380.76±0.15▲ 0.63±0.17▲▼ 0.001輕度子癇前期患者 91.64±0.29＊ 1.14±0.24＊▲ 1.02±0.16＊▲▼ 0.001重度子癇前期患者 61.92±0.80＊＃ 1.16±0.47＊?！?0.79±0.14＊?！?0.008子癇患者 41.98±0.52＊＃ 1.29±0.36＊＃▲ 0.94±0.25＊＃▲▼ 0.014 P 0.0010.0010.001

表3 不同節(jié)段臍帶動(dòng)脈形態(tài)結(jié)構(gòu)比較

3 討 論

3.1 臨床資料顯示，與健康孕婦相比，妊高征患者的年齡增大，孕周縮短，血壓升高，胎兒體質(zhì)量和胎盤質(zhì)量減輕，說(shuō)明妊高征對(duì)妊娠會(huì)產(chǎn)生不良的影響，需要進(jìn)行相應(yīng)的臨床處理。但是統(tǒng)計(jì)分析顯示，2 組孕婦血壓、胎兒體質(zhì)量和孕周差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而年齡、臍帶長(zhǎng)度和胎盤質(zhì)量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其原因可能是病例數(shù)較少，需擴(kuò)大病例數(shù)，作進(jìn)一步的研究分析。

3.2 臍帶是連接胚胎和胎盤間的索狀結(jié)構(gòu)，臍帶血管是胎兒的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝產(chǎn)物的傳輸通道，其形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化會(huì)改變其生理功能。本研究結(jié)果顯示，從胎盤端到胎兒端，無(wú)論是臍帶靜脈還是臍動(dòng)脈，其管徑和管壁／管徑比值逐漸減小、而管壁厚度逐漸增大，說(shuō)明臍帶胎兒端是控制血流量主要部位，其血流量可影響胎兒的生長(zhǎng)發(fā)育。

3.3 張彤等［13］采用不同的壓力下體外培養(yǎng)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞，并借助掃描電鏡和光鏡觀察臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化，結(jié)果顯示：隨著壓力的增高，內(nèi)皮細(xì)胞排列紊亂，輪廓不清，細(xì)胞內(nèi)的吞噬溶酶體明顯增多，同時(shí)壓力刺激可導(dǎo)致血管平滑肌細(xì)胞增生、肥大，細(xì)胞外基質(zhì)增生，以至于血管重構(gòu)［14］，而血管壁細(xì)胞外基質(zhì)的增多和血管壁中膜平滑肌層的增厚是妊高征的一個(gè)特征。妊高征患者臍靜脈壁膠原纖維等細(xì)胞外基質(zhì)的增多一方面使臍靜脈壁明顯增厚、變硬，導(dǎo)致彈性下降，順應(yīng)性差，血流阻力加大；另一方面管壁增厚又可增加其抗高壓和耐牽拉的強(qiáng)度，管徑也隨之?dāng)U大，故可承受增高的壓力負(fù)荷。所以，為了克服血管阻力的增加和將胎盤內(nèi)臍靜脈血輸送給胎兒，勢(shì)必要增加臍靜脈壁的收縮力，而導(dǎo)致臍靜脈壁中膜平滑肌呈代償性肥大、增生。本研究結(jié)果顯示，與健康孕婦相比，妊高征患者胎兒的臍帶靜脈和動(dòng)脈管徑和管壁／管徑比值明顯減小，而管壁厚度明顯增大，并隨病情的嚴(yán)重程度逐步加劇。其中臍動(dòng)脈的管徑、管壁厚度和管壁／管徑比值變化幅度約為20%，而臍靜脈的變化幅度約為30%；胎盤端臍帶血管的變化幅度約為20%，而胎兒端的變化幅度約為30%；說(shuō)明妊高征和臍帶血管形態(tài)結(jié)構(gòu)變化關(guān)系密切，其中臍靜脈的形態(tài)變化大于臍動(dòng)脈，以胎兒端更為顯著。

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