高致病性禽流感滅活疫苗免疫抗體消長規律研究

韓慶安等

高致病性禽流感是由高致病性禽流感病毒引起的對養禽業危害極其嚴重的一類動物疫病。該病的暴發流行，不僅沉重打擊養禽業的發展，而且對人類的生命安全也造成了極大的危害，已經引起了全世界各國的密切關注。目前，我國對H5亞型高致病性禽流感實行強制免疫政策，但隨著疫苗免疫的多年開展，H5亞型禽流感病毒也在不斷發生著變異。為了有效保護禽群不受禽流感病毒的侵害，禽流感國家參考實驗室適時推出新的重組禽流感H5亞型疫苗。2011年底，河北省引進重組禽流感H5N1（Re-4株+Re-6株）二價疫苗，為了摸清其免疫原性，從而制定出更加合理的免疫程序推薦給廣大的養禽戶，我們于2012年初開展了該疫苗免疫抗體消長規律研究，現將結果匯報如下，供大家參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 疫苗和檢測試劑

重組禽流感H5N1（Re-4株+Re-6株）二價疫苗，H5亞型禽流感Re-4株、Re-6株HI標準抗原以及相應的標準陽性血清，均由哈爾濱維科生物技術開發公司生產。

1.1.2 實驗動物

保定徐水某規模蛋雞場，1日齡海蘭褐雛雞2000只。

1.2 方法

1.2.1 試驗設計

定期檢測母源抗體，當母源抗體降至4lg2以下，群體抗體合格率低于國家規定的70%時進行首次免疫，免疫劑量為0.3 mL/羽，頸部皮下注射；首免后，根據免疫抗體監測結果，確定二免日齡，免疫劑量為0.5 mL/羽，胸部肌肉注射。定期采集血樣，每次采30份，分離血清進行抗體檢測。

1.2.2 檢測方法

按照國標《高致病性禽流感診斷技術》（GB/T 18936-2003）中血凝和血凝抑制試驗（HA-HI）進行。

2 結果

2.1 母源抗體監測結果

表1結果顯示，雞母源抗體可持續2周左右。雛雞到10日齡時，其群體抗體合格率已經接近70%，根據抗體下降速度進行推算，雞群首免日齡定在12日齡。

2.2 首免后免疫抗體監測結果

檢測結果表明，首免后直到37日齡，H5N1（Re-6株）抗體始終不高，群體免疫合格率一直低于70%；H5N1（Re-4株）抗體平均值和群體合格率雖然始終符合國家規定的要求，但37日齡時，其抗體離散度達到63.35%，抗體值極其不整齊，故將雞群二免日齡定在40日齡。結果見表2。

2.3 二免后免疫抗體監測結果

表3和表4結果表明，到130日齡，雞群其免疫抗體值依然很高，免疫保護率較好。但考慮到抗體離散度值及雞群開產后再進行疫苗免疫影響產蛋，建議雞場在120～130日齡時進行第三次免疫。開產前雞群禽流感抗體消長情況見圖1。

3 小結與討論

由于H5N1（Re-6株）是新開發的重組禽流感疫苗株，故未進行母源抗體檢測。正因為其是新疫苗，雞群機體對其免疫識別較差，故在整個試驗期，其免疫抗體值始終低于Re-4株的抗體值。

監測結果表明，新飼養的雞群經過二次免疫后，到開產前（130日齡），其免疫抗體值依然維持在較高水平，但考慮到雞群開產后再進行疫苗免疫影響產蛋，建議雞場在120～130日齡時進行第三次免疫。

抗體離散度值是反映抗體整齊度的指標。離散度值越高，抗體越不整齊，反之越整齊。在評價某一階段雞群禽流感免疫效果時，單純憑借群體免疫合格率來分析是片面和不準確的，只有將抗體離散度值和群體免疫合格率二者結合起來綜合分析，其評價的結果才能比較準確。通常，當抗體離散度值超過60%時，即使群體免疫合格率符合國家規定的要求，雞群也必須立即進行疫苗免疫，才能確保其得到有效保護。

本次試驗只對開產前雞群禽流感免疫抗體消長情況進行了研究，至于雞群開產后疫苗免疫保護期如何，我們又單獨進行了試驗研究。2012年5-12月份，我們對當年河北省中標的9個廠家生產3種不同類型14個批次禽流感疫苗在產蛋后雞群中進行免疫效果的比對試驗，結果其免疫保護期為4～6個月。

自2004年H5亞型高致病性禽流感在我國爆發流行以來，我國對其實行強制免疫政策。但隨著疫苗免疫的逐年開展，禽流感病毒也在不斷發生著變異。對此，國家也不斷推出新型毒株疫苗來應對。截至2011年底，國家陸續推出了禽流感H5N1（N28株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-1株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-4株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-5株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-6株）滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-4株+Re-5株）二價滅活疫苗、重組禽流感H5N1（Re-4株+Re-6株）二價滅活疫苗以及相應的禽流感H5+H9二聯滅活苗。每種疫苗在河北投入使用前或使用初期，我們均對其免疫效果進行評價，試驗結果表明，其在雞群的首免和二免時間相差不大，免疫保護期也基本一致。雖然H9禽流感對雛雞的致病力不強，但對青年雞的危害較大，并且嚴重影響蛋雞的產蛋率，故我們也對其免疫效果進行了多次評價。經過多年的試驗數據積累，考慮到地方高致病性禽流感病毒主導流行株，結合雞場的定位及經濟效益，我們分別對蛋（肉）種雞場和商品蛋雞場制定了參考免疫程序。

蛋（肉）種雞：7～14日齡注射禽流感H5N1滅活疫苗，35～42日齡注射禽流感H5N1滅活疫苗和H9滅活疫苗，75～80日齡時注射禽流感H9滅活苗，120～130日齡注射禽流感H5N1和H9滅活疫苗，以后每隔4～6個月注射一次禽流感H5N1和H9滅活疫苗。

商品蛋雞：7～14日齡注射禽流感H5N1滅活疫苗，35～42日齡注射禽流感H5N1滅活疫苗，75～80日齡時注射禽流感H5+H9二聯滅活疫，120～130日齡注射禽流感H5N1和H5～H9滅活疫苗，以后每隔4～6個月注射一次禽流感H5N1滅活疫苗。（編輯：郭遠）