凋亡調控因子Survivin、XIAP、c—Jun及NF—κB在卵巢上皮性腫瘤中表達的意義

李望華+歐陽強

摘要] 目的 探討凋亡調控因子Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB在卵巢上皮性腫瘤的表達。 方法 選取2009年3月～2013年3月在我院進行手術切除的卵巢上皮性腫瘤標本59例，采用免疫組化SP法，對卵巢良性腫瘤、卵巢交界性腫瘤、卵巢癌中凋亡調控因子XIAP、轉錄因子c-Jun、NF-κB的表達進行檢測。 結果 卵巢癌組Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB陽性表達率分別為74.29%、71.43%、82.86%及82.86%，均高于卵巢良性腫瘤組和卵巢交界性腫瘤組，差異有統計學意義（P < 0.05）。卵巢癌組織中XIAP、Survivin、c-Jun均與NF-κB表達呈正相關（P < 0.05）。 結論 臨床上檢測上皮性卵巢腫瘤中的Survivin、XIAP、c-Jun、NF-κB，對預防、治療上皮性卵巢腫瘤有十分重要的價值。

[關鍵詞] 凋亡調控因子；Survivin；XIAP；c-Jun；NF-κB；卵巢上皮性腫瘤

[中圖分類號] R737.31 [文獻標識碼] B [文章編號] 1673-9701（2014）02-0021-03

Expression and its significance of apoptosis regulatory factors Survivin， c-Jun， XIAP and NF-κB in ovarian epithelial tumors

LI Wanghua1 OUYANG Qiang2

1.Department of Gynaecology，Dingcheng Maternal and Child Care Service Centre of Changde City in Hunan Province， Changde 451001， China； 2.Department of Gynaecology， Hunan Provincial Tumor Hospital， Changsha 410013， China

[Abstract] Objective To explore the expression and significance of apoptosis regulatory factors Survivin， c-Jun， XIAP and NF-κB in ovarian epithelial carcinoma. Methods A total of 59 patients of operation excision of ovarian epithelial tumor specimens were collected in our hospital from March 2009 to March 2013. The immunohistochemical SP method was used to detect the ovarian benign tumor， ovarian cancer， ovarian cancer， apoptosis of XIAP transcription factor AP-1 （c-Jun） and the expression of NF-κB in detection. Results The positive expression rate of survivin， XIAP， c-jun and NF-κB of ovarian cancer group were 74.29%，71.43%，82.86%，82.86% respectively， and all were higher than that in benign ovarian tumors group and borderline ovarian tumors group， and the difference was statistically significant（P < 0.05）； The XIAP， Survivin， c-Jun of ovarian cancer tissue were positively correlated with NF-κB expression （P < 0.05）. Conclusion The clinical detection of Survivin， XIAP， c-Jun， NF-κB in epithelial ovarian tumor is very important to the prevention and treatment of epithelial ovarian tumors.

[Key words] Apoptosis regulatory factors； Survivin； XIAP； c-Jun； NF-κB； Epithelial ovarian tumor

細胞凋亡的失衡與腫瘤的發生發展密切相關。XIAP蛋白在正常組織中低表達，而在多種惡性腫瘤中呈現高表達。Survivin在多種腫瘤組織和人類胚胎組織中廣泛表達，其可以抑制細胞凋亡和有絲分裂。卵巢腫瘤是婦科常見腫瘤。目前凋亡調控因子XIAP、Survivin、Caspase-3和轉錄因子c-Jun、NF-κB在卵巢上皮性腫瘤中表達報道很少[1]。本研究通過檢測卵巢上皮性腫瘤中XIAP、Survivin、c-Jun及NF-κB表達，來探討其在卵巢腫瘤發生發展中的作用及與臨床病理的聯系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年3月～2013年3月在我院就診的卵巢上皮性腫瘤患者59例，所有患者均行手術切除。患者年齡最小23歲，最大75歲，平均（43.67±7.38）歲。其中卵巢癌35例，卵巢良性腫瘤12例，卵巢交界性腫瘤12例。endprint

1.2 方法

采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法（SP法），對卵巢交界性腫瘤、卵巢良性腫瘤、卵巢癌中凋亡調控因子XIAP、轉錄因子AP-1（c-Jun）、NF-κB的表達進行檢測。方法：烤片，68℃，20 min；常規二甲苯進行脫蠟，酒精梯度脫水；滅活其內源性過氧化物酶；抗原修復；滴加適當稀釋濃度的一抗：XIAP/Survivin（1∶300）和AP-1（c-Jun）（1∶50），NF-κB p65（1∶200），滴加生物素標記二抗，37℃孵育半小時，PBS沖洗3次，每次5 min；滴加鏈霉素卵白素工作液（辣根過氧化物酶標記），37℃孵育30 min，PBS沖洗3次，每次5 min；DAB/H2O2反應染色，自來水充分沖洗后，用蘇木素進行復染，常規脫水，透明，干燥，封片。

1.3 結果判讀

首先要確定免疫組化技術是否合格，合格的染色結果應該是背景顏色淺淡或無著色，而陽性標志物清晰和定位明確，細胞呈棕黃色著色，陽性信號應與被測抗原所在的部位一致。按細胞染色強度分：弱陽性（+），陽性細胞數<10%，淡黃色顯色或僅個別細胞呈黃至棕黃色；強陽性（+++），即陽性細胞數>60%以上，多數細胞呈黃色至棕黃色染色；中度陽性（++），陽性細胞數及顯色程度介于弱陽性與強陽性之間。陰性染色結果是組織內預期特定區域中未見抗原表達[2]。

1.4 統計學方法

采用SPSS13.0統計學軟件，各組間陽性表達率比較采用χ2檢驗，各指標表達相關性采用相關性分析，P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB陽性表達率比較

各組Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB陽性表達率比較，差異均有統計學意義（χ2=11.379、7.983、14.168、10.139，P均<0.05）。見表1。

2.2 卵巢癌組織中XIAP、Survivin和c-Jun與NF-κB表達的相關性分析

卵巢癌組織中XIAP、Survivin、c-Jun和NF-κB分別為0.2413±0.0178、0.2381±0.0168、0.2390±0.0217和0.2476±0.0251。XIAP、Survivin、c-Jun均與NF-κB表達呈正相關（r=0.5231、0.4873、0.4389，P均<0.05）。

3 討論

近年來，卵巢癌發病呈現年輕化、增高的趨勢。卵巢癌發病隱匿，部分患者臨床有癥狀去就診時，大部分己發生遠處轉移，死亡率高，給婦女生命健康帶來極大威脅[3]。原因主要是：早期診斷方法不完善的卵巢癌；卵巢癌早期癥狀隱匿，其位于盆腔的深部；就診時已發生遠處轉移，病灶不能完全切除。

研究顯示，腫瘤發生、發展與細胞凋亡的失衡有密切關系。卵巢腫瘤是常見的腫瘤之一，卵巢癌致死率高，占女性生殖器官腫瘤第一位，嚴重危及患者的生命。XIAP作為凋亡抑制蛋白，在正常組織中很少表達，而在卵巢腫瘤中高表達，參與細胞增殖與惡性轉化。Survivin屬于凋亡抑制蛋白家族，在人類胚胎組織、腫瘤組織及極少數正常組織中均有表達，具有抑制有絲分裂及細胞凋亡功能。XIAP與Survivin蛋白均通過直接抑制Caspase-3、7、9的活性，使細胞凋亡得到抑制。作為核轉錄調節因子的NF-κB，在靜息狀態下，NF-κB與其抑制性蛋白IκB（抑制性蛋白）結合，起到調控細胞增殖、凋亡等作用。

細胞增殖及凋亡平衡對維持細胞內穩態起著重大作用，卵巢癌的發生是細胞凋亡激活因子受到Survivin抑制的結果[4，5]。Survivin屬于凋亡抑制蛋白（IAP）家族成員，是現在為止發現的最小IAP蛋白。其通過抑制蛋白水解酶級聯反應過程中位于下游的Caspaae-3、Caspase-7活性，發揮抗凋亡作用，促進細胞增殖。在卵巢腫瘤中，Survivin過表達可以預測卵巢上皮細胞癌[6，7]。

NF-κB活性的失控與哺乳動物腫瘤的發生密切相關，NF-κB的異常表達及活化在許多腫瘤中均可見到。卵巢組織中NF-κB基因擴增常見于多重內外因素作用于機體，其編碼的蛋白在細胞漿和細胞核中表達，細胞內多條信號轉導通路被激活，惡性細胞異常增生，最終導致癌癥發生[8，9]。

c-Jun是一種順序特異性轉錄激活因子，或激活轉錄因子家族成員組成。c-Jun的活性增加與乳腺癌、結腸癌等腫瘤相關。本研究中，卵巢癌組Survivin、XIAP、c-Jun及NF-κB陽性表達率均顯著高于卵巢良性腫瘤組和卵巢交界性腫瘤組，差異有統計學意義（P < 0.05）。表明NF-κB和c-Jun、Survivin、XIAP對卵巢癌的發生發展可能起著促進作用[10，11]。

本研究中，卵巢癌組織中XIAP、Survivin、c-Jun和NF-κ分別為（0.2413±0.0178）、（0.2381±0.0168）、（0.2390±0.0217）和（0.2476±0.0251）。XIAP、Survivin、c-Jun均與NF-κB表達呈正相關（r=0.5231、0.4873、0.4389，P均<0.05）。說明凋亡調控因子XIAP、Survivin的表達與轉錄因子NF-κB的表達具有相關性，這提示NF-κB對XIAP、Survivin的表達可能具有促進作用。轉錄因子c-Jun和轉錄因子NF-κB在卵巢癌組織中的表達呈正相關，提示二者在卵巢癌的發生發展中可能起著相互促進的作用。

綜上所述，在上皮性卵巢腫瘤中對Survivin、XIAP、c-Jun、NF-κB的表達進行聯合檢測，不僅有助于闡明上皮性卵巢腫瘤的發生、發展，對預防、治療上皮性卵巢腫瘤也有重要價值。

[參考文獻]endprint

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（收稿日期：2013-08-16）endprint

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