丙環唑·嘧菌酯在玉米和土壤中的殘留分析

李輝+劉磊+張玉婷+邵輝+李娜+李晶+宋淑榮+郭永澤

摘 要：經過對樣品前處理過程的研究和優化，建立了丙環唑和嘧菌酯的氣相色譜分析方法。樣品經乙腈水溶液提取分配后，用弗羅里硅土小柱凈化，采用氣相色譜（μ-ECD）測定。方法中目標物在50～2 000 μg·L-1濃度范圍內線性良好，相關系數分別為0.999 1和0.999 4。在5，50，200 μg·kg-13個添加濃度水平下，平均加標回收率在79.2%～110.9%之間，相對標準偏差不大于15%。該方法可靈敏、簡便、快速地測定玉米中丙環唑和嘧菌酯的殘留。

關鍵詞：丙環唑；嘧菌酯；殘留；玉米；土壤

中圖分類號：S513 文獻標識碼：A DOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2014.02.018

Analysis of Residues of Propiconazole and Azoxystrobin in Cron and Soil

LI Hui， LIU Lei， ZHANG Yu-ting， SHAO Hui， LI Na， LI Jing， SONG Shu-rong， GUO Yong-ze

（Tianjin Institution of Agricultural Quality Standards and Testing Technology，Tianjin 300381，China）

Abstract： Through studying and optimizing of sample preparation process， an gas chromatography method was developed for propiconazole and azoxystrobin in cron and soil. The sample were extracted with acetonitril and water， cleaned-up by an magnesiumsilicate solid phase，and analyzed by GC-ECD. The standard calibration curves for two pesticides showed high correlation coefficients over the range of 50～2 000 μg·L-1， with the correlation coefficients between 0.999 1 and 0.999 4.The average recoveries of two pesticides at the three levels of 5，50 and 200 μg·kg-1 were between 79.2% and 110.9%， with the relative standard deviation （RSD） less than 15%. So， this method could be further applied to detection of propiconazole and azoxystrobin in cron and soil.

Key words： propiconazole； azoxystrobin； residue； cron； soil

丙環唑屬于三唑類殺菌劑，對葉斑病、小麥全蝕病、粒黑粉病等有較好的防治效果[1-2]，嘧菌酯是甲氧基丙烯酸酯類殺菌劑，對幾乎所有真菌綱病害均有良好的活性，這兩種農藥均屬于新型高效、廣譜、內吸性殺菌劑[3]。

嘧菌酯與已有殺菌劑無交互抗性，因而常被用于制作混劑，18.7%丙環唑·嘧菌酯懸乳劑為最常見混劑之一。丙環唑和嘧菌酯在實際生產中均被廣泛使用，因此， 開發農作物中丙環唑和嘧菌酯的殘留分析方法，對農產品安全和合理用藥具有重要意義。目前對農產品中丙環唑和嘧菌酯殺菌劑殘留量的檢測方法雖已有報道， 但針對其混劑的檢測方法研究，以及在油脂和淀粉含量均較高的玉米等農作物中的檢測方法研究國內未見報道，本試驗應用氣相色譜（μ-ECD）對18.7%丙環唑·嘧菌酯在玉米和土壤中的殘留分析方法進行了研究，以期為此種農藥在農產品中的安全評估工作提供參考依據。

1 材料和方法

1.1 儀器與試劑

安捷倫氣相色譜儀（美國Agilent公司）；HZQ-C空氣浴振蕩器；旋轉蒸發儀（Laborota 4000 efficient，德國Heidolph）；旋渦混合器（QL-901，江蘇海門其林貝爾儀器制造有限公司）等。農藥標準品純度：丙環唑（96.5%）；嘧菌酯（99%），由德國Dr. Ehrenstorfer公司購買。

前處理使用的乙腈、正己烷、丙酮、無水硫酸鈉、氯化鈉均為分析純。作為定容試劑，流動相使用的正己烷和丙酮為色譜純。弗羅里硅土柱（1 000 mg，6 mL）。

分別稱取標準品各5.00 mg放入50 mL棕色容量瓶中，用丙酮溶解并定容至刻度，配制成濃度為100 μg·mL-1的標準儲備液，于4 ℃條件下保存，備用。

1.2 樣品前處理方法

1.2.1 提取 稱樣品20.0 g置于具塞錐形瓶中，加20 mL水和40 mL乙腈振蕩30 min，用20 mL乙腈洗滌殘渣，合并濾液至裝有少量氯化鈉的分液漏斗中，振蕩3 min，靜置10 min，取上層有機相過無水硫酸鈉，用20 mL乙腈洗無水硫酸鈉，減壓濃縮至干，待凈化。

1.2.2 凈化 樣品濃縮殘留物用3 mL正己烷溶解待凈化。弗羅里硅土凈化柱依次用5 mL正己烷和5 mL丙酮+正己烷（體積比1+9）活化，然后將樣品溶液上樣，開始收集。再用10 mL丙酮+正己烷（體積比3+2）進行洗脫，收集洗脫液，40 ℃下減壓濃縮近干，用2 mL丙酮+正己烷（體積比1+1）定容待測。

1.3 色譜條件

Agilent 7890A氣相色譜儀。進樣口：260 ℃，不分流進樣；進樣體積：2 μL；載氣：高純氮氣（≥99.999%）。色譜柱（HP-5）：30 m×0.25 mm×0.25 μm。柱流速：1.5 mL·min-1；柱溫：100 ℃（1 min）20 ℃·min-1 220 ℃（8 min）10 ℃·min-1 260 ℃（20 min）。檢測器（μ-ECD）：300 ℃。

1.4 標準曲線制作

準確吸取丙環唑和嘧菌酯標準儲備液，將其逐級稀釋成質量濃度為0.05，0.1，0.5，1，2 mg·L-1混合標準工作溶液，在1.3的色譜條件下分別進樣，重復3次，以進樣濃度（mg·L-1）為橫坐標、峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

1.5 方法回收率試驗

根據玉米中丙環唑和嘧菌酯的MRL值以及方法的靈敏度，準確添加丙環唑和嘧菌酯的標準溶液于玉米空白樣品中，添加濃度分別為0.005，0.05，0.2 mg·kg-1，每個質量分數設5個重復，按照上述方法進行測定。

2 結果與分析

2.1 色譜柱的確定

試驗比較了DB-1 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）和 HP-5 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）兩種色譜柱對藥物分析的影響，結果表明使用非極性色譜柱DB-1時，藥物出峰和分離均不大理想，而使用弱極性色譜柱HP-5時，目標藥物出峰良好，且與組分達到較好的分離，而且雜質較少，因此試驗最終確定采用HP-5色譜柱為分析柱。

2.2 提取條件的確定

分別以正己烷、丙酮、乙腈和乙腈水[4-7]對樣品的提取效果做了分析比對，試驗結果證明，采用正己烷為提取液時，目標物的回收率低；采用丙酮提取樣品，雖然目標物的回收率提高，但樣品中雜質較多；使用乙腈和乙腈水為提取試劑時，均可得到較高的回收率，但當樣品含水量較低時，以乙腈提取樣品中目標物的回收率不如以乙腈水對樣品的提取效果好，因而試驗最終以乙腈和水為共萃劑對樣品進行提取。

2.3 凈化條件選擇

由于玉米中油脂和淀粉等雜質會干擾氣相色譜對待測組分的分離和測定，因此試驗選用石墨柱，C18和弗羅里硅土萃取柱[8-10]對樣品做了凈化處理對比。結果發現，當使用丙酮+正己烷（體積比3+2）作為洗脫液，采用弗羅里硅土固相萃取柱凈化樣品的效果最好，而且洗脫液的用量比較少。故本方法最終以弗羅里硅土為固相萃取柱，以丙酮+正己烷（體積比3+2）為洗脫液。

2.4 方法的線性、靈敏度、準確度和精密度

試驗以各組分的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制了標準工作溶液的標準曲線，線性方程和相關系數見表1。結果表明，目標物在50～2 000 μg·L-1的濃度范圍內，線性關系良好，相關系數分別為0.999 1和0.999 4。目標物在 5，50，200 μg·kg-1 3個添加濃度，按照上述提取、凈化和測定方法，做5個平行測定樣品，各農藥的平均回收率在79.2% 和110.9% 之間，相對標準偏差（RSD）不大于15%（表2）。各農藥的最低定量限可達到5 μg·kg-1，滿足殘留分析的要求。

3 結 論

采用乙腈水混合溶液提取，弗羅里硅土固相萃取柱凈化，氣相色譜法測定，建立了玉米和土壤中丙環唑和嘧菌酯的檢測方法。目標物在各樣品中3個添加濃度水平下的平均回收率在79.2%和110.9%之間，相對標準偏差不大于15%，定量限均可達到5 μg·kg-1。該方法操作簡便，樣品處理時間短，方法的靈敏度、準確度和精密度均符合農藥殘留分析的要求。

參考文獻：

[1] 趙琳， 張曉波， 任紅波， 等. 氣相色譜方法測定大豆中丙環唑殘留[J]. 農藥， 2012， 51（5）： 372-374.

[2] 劉燕菁，范玉，張旭光，等. 丙環唑在香蕉和土壤中的消解動態及殘留安全性評價[J].植物保護，2010， 36（2） ： 109-111.

[3] 薄海波，孫潔. 氣相色譜法檢測西蘭花和荷蘭豆中嘧菌酯殘留量[J].分析試驗室，2008， 27（9） ： 31-33.

[4] 王冬蘭，龔勇，李擁兵，等. 環丙唑醇在黃瓜和土壤中的殘留[J].江蘇農業學報，2011，27（6）： 1 371-1 375.

[5] 張國生，李永志，王麗穎，等. 28%百菌清·唑菌酯懸浮劑的研制[J]. 農藥，2012（6）：433-435.

[6] 吳常敏. 嘧菌酯在水稻中的殘留及消解動態[J].廣州化工， 2013，41（8）：139-141.

[7] 盧蕾，劉雪，趙善倉，等. 4%春雷霉素可濕性粉劑液相色譜串聯質譜法分析[J].農藥， 2013，52（4）： 273-274，277.

[8] 張月，林靖凌，蘇冰霞，等.丙環唑在香蕉及土壤中的殘留量測定[J].現代農藥，2012，11 （5）：44-47.

[9] 殷利丹，侯志廣，陳超，等. 嘧菌酯在大豆中的殘留及消解動態[J].農藥學學報，2011，13（3）： 304-309.

[10] 楊振華，魏朝俊，賈臨芳，等. 嘧菌酯在草莓與土壤中的殘留動態研究[J].農業環境科學學報，2013，32（4）：697-700.

1.3 色譜條件

Agilent 7890A氣相色譜儀。進樣口：260 ℃，不分流進樣；進樣體積：2 μL；載氣：高純氮氣（≥99.999%）。色譜柱（HP-5）：30 m×0.25 mm×0.25 μm。柱流速：1.5 mL·min-1；柱溫：100 ℃（1 min）20 ℃·min-1 220 ℃（8 min）10 ℃·min-1 260 ℃（20 min）。檢測器（μ-ECD）：300 ℃。

1.4 標準曲線制作

準確吸取丙環唑和嘧菌酯標準儲備液，將其逐級稀釋成質量濃度為0.05，0.1，0.5，1，2 mg·L-1混合標準工作溶液，在1.3的色譜條件下分別進樣，重復3次，以進樣濃度（mg·L-1）為橫坐標、峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

1.5 方法回收率試驗

根據玉米中丙環唑和嘧菌酯的MRL值以及方法的靈敏度，準確添加丙環唑和嘧菌酯的標準溶液于玉米空白樣品中，添加濃度分別為0.005，0.05，0.2 mg·kg-1，每個質量分數設5個重復，按照上述方法進行測定。

2 結果與分析

2.1 色譜柱的確定

試驗比較了DB-1 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）和 HP-5 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）兩種色譜柱對藥物分析的影響，結果表明使用非極性色譜柱DB-1時，藥物出峰和分離均不大理想，而使用弱極性色譜柱HP-5時，目標藥物出峰良好，且與組分達到較好的分離，而且雜質較少，因此試驗最終確定采用HP-5色譜柱為分析柱。

2.2 提取條件的確定

分別以正己烷、丙酮、乙腈和乙腈水[4-7]對樣品的提取效果做了分析比對，試驗結果證明，采用正己烷為提取液時，目標物的回收率低；采用丙酮提取樣品，雖然目標物的回收率提高，但樣品中雜質較多；使用乙腈和乙腈水為提取試劑時，均可得到較高的回收率，但當樣品含水量較低時，以乙腈提取樣品中目標物的回收率不如以乙腈水對樣品的提取效果好，因而試驗最終以乙腈和水為共萃劑對樣品進行提取。

2.3 凈化條件選擇

由于玉米中油脂和淀粉等雜質會干擾氣相色譜對待測組分的分離和測定，因此試驗選用石墨柱，C18和弗羅里硅土萃取柱[8-10]對樣品做了凈化處理對比。結果發現，當使用丙酮+正己烷（體積比3+2）作為洗脫液，采用弗羅里硅土固相萃取柱凈化樣品的效果最好，而且洗脫液的用量比較少。故本方法最終以弗羅里硅土為固相萃取柱，以丙酮+正己烷（體積比3+2）為洗脫液。

2.4 方法的線性、靈敏度、準確度和精密度

試驗以各組分的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制了標準工作溶液的標準曲線，線性方程和相關系數見表1。結果表明，目標物在50～2 000 μg·L-1的濃度范圍內，線性關系良好，相關系數分別為0.999 1和0.999 4。目標物在 5，50，200 μg·kg-1 3個添加濃度，按照上述提取、凈化和測定方法，做5個平行測定樣品，各農藥的平均回收率在79.2% 和110.9% 之間，相對標準偏差（RSD）不大于15%（表2）。各農藥的最低定量限可達到5 μg·kg-1，滿足殘留分析的要求。

3 結 論

采用乙腈水混合溶液提取，弗羅里硅土固相萃取柱凈化，氣相色譜法測定，建立了玉米和土壤中丙環唑和嘧菌酯的檢測方法。目標物在各樣品中3個添加濃度水平下的平均回收率在79.2%和110.9%之間，相對標準偏差不大于15%，定量限均可達到5 μg·kg-1。該方法操作簡便，樣品處理時間短，方法的靈敏度、準確度和精密度均符合農藥殘留分析的要求。

參考文獻：

[1] 趙琳， 張曉波， 任紅波， 等. 氣相色譜方法測定大豆中丙環唑殘留[J]. 農藥， 2012， 51（5）： 372-374.

[2] 劉燕菁，范玉，張旭光，等. 丙環唑在香蕉和土壤中的消解動態及殘留安全性評價[J].植物保護，2010， 36（2） ： 109-111.

[3] 薄海波，孫潔. 氣相色譜法檢測西蘭花和荷蘭豆中嘧菌酯殘留量[J].分析試驗室，2008， 27（9） ： 31-33.

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[9] 殷利丹，侯志廣，陳超，等. 嘧菌酯在大豆中的殘留及消解動態[J].農藥學學報，2011，13（3）： 304-309.

[10] 楊振華，魏朝俊，賈臨芳，等. 嘧菌酯在草莓與土壤中的殘留動態研究[J].農業環境科學學報，2013，32（4）：697-700.

1.3 色譜條件

Agilent 7890A氣相色譜儀。進樣口：260 ℃，不分流進樣；進樣體積：2 μL；載氣：高純氮氣（≥99.999%）。色譜柱（HP-5）：30 m×0.25 mm×0.25 μm。柱流速：1.5 mL·min-1；柱溫：100 ℃（1 min）20 ℃·min-1 220 ℃（8 min）10 ℃·min-1 260 ℃（20 min）。檢測器（μ-ECD）：300 ℃。

1.4 標準曲線制作

準確吸取丙環唑和嘧菌酯標準儲備液，將其逐級稀釋成質量濃度為0.05，0.1，0.5，1，2 mg·L-1混合標準工作溶液，在1.3的色譜條件下分別進樣，重復3次，以進樣濃度（mg·L-1）為橫坐標、峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。

1.5 方法回收率試驗

根據玉米中丙環唑和嘧菌酯的MRL值以及方法的靈敏度，準確添加丙環唑和嘧菌酯的標準溶液于玉米空白樣品中，添加濃度分別為0.005，0.05，0.2 mg·kg-1，每個質量分數設5個重復，按照上述方法進行測定。

2 結果與分析

2.1 色譜柱的確定

試驗比較了DB-1 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）和 HP-5 （30 m×0.25 mm×0.25 μm）兩種色譜柱對藥物分析的影響，結果表明使用非極性色譜柱DB-1時，藥物出峰和分離均不大理想，而使用弱極性色譜柱HP-5時，目標藥物出峰良好，且與組分達到較好的分離，而且雜質較少，因此試驗最終確定采用HP-5色譜柱為分析柱。

2.2 提取條件的確定

分別以正己烷、丙酮、乙腈和乙腈水[4-7]對樣品的提取效果做了分析比對，試驗結果證明，采用正己烷為提取液時，目標物的回收率低；采用丙酮提取樣品，雖然目標物的回收率提高，但樣品中雜質較多；使用乙腈和乙腈水為提取試劑時，均可得到較高的回收率，但當樣品含水量較低時，以乙腈提取樣品中目標物的回收率不如以乙腈水對樣品的提取效果好，因而試驗最終以乙腈和水為共萃劑對樣品進行提取。

2.3 凈化條件選擇

由于玉米中油脂和淀粉等雜質會干擾氣相色譜對待測組分的分離和測定，因此試驗選用石墨柱，C18和弗羅里硅土萃取柱[8-10]對樣品做了凈化處理對比。結果發現，當使用丙酮+正己烷（體積比3+2）作為洗脫液，采用弗羅里硅土固相萃取柱凈化樣品的效果最好，而且洗脫液的用量比較少。故本方法最終以弗羅里硅土為固相萃取柱，以丙酮+正己烷（體積比3+2）為洗脫液。

2.4 方法的線性、靈敏度、準確度和精密度

試驗以各組分的濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制了標準工作溶液的標準曲線，線性方程和相關系數見表1。結果表明，目標物在50～2 000 μg·L-1的濃度范圍內，線性關系良好，相關系數分別為0.999 1和0.999 4。目標物在 5，50，200 μg·kg-1 3個添加濃度，按照上述提取、凈化和測定方法，做5個平行測定樣品，各農藥的平均回收率在79.2% 和110.9% 之間，相對標準偏差（RSD）不大于15%（表2）。各農藥的最低定量限可達到5 μg·kg-1，滿足殘留分析的要求。

3 結 論

采用乙腈水混合溶液提取，弗羅里硅土固相萃取柱凈化，氣相色譜法測定，建立了玉米和土壤中丙環唑和嘧菌酯的檢測方法。目標物在各樣品中3個添加濃度水平下的平均回收率在79.2%和110.9%之間，相對標準偏差不大于15%，定量限均可達到5 μg·kg-1。該方法操作簡便，樣品處理時間短，方法的靈敏度、準確度和精密度均符合農藥殘留分析的要求。

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