陳言偉,王朝鑫
(解放軍第152中心醫院檢驗科,河南平頂山467000)
·經驗交流·
光學法檢測大血小板的臨床應用價值分析
陳言偉,王朝鑫
(解放軍第152中心醫院檢驗科,河南平頂山467000)
血小板計數;血細胞分析儀;阻抗法;光學法
低值血小板計數一直是檢驗和臨床的一個難點,目前血小板計數多使用各類血液分析儀完成,其計數原理多為經典的電阻抗法。近年來,雖然血細胞自動分析儀不斷的更新換代,但是大多是限于在白細胞分類的技術上的改進,對于紅細胞和血小板的計數大多停留在傳統的阻抗法上面,并且是在同一通道進行檢測。SysmexXT-4000i血細胞分析儀采用了阻抗法和光學法對血小板進行聯合檢測,光學法的應用在血小板數量減少和形態異常的計數上具有更重要的臨床意義。
1.1 患者,女性,47歲。急診以左拇指開放傷入院。
1.2 儀器與試劑日本Sysmex公司XT-4000i型全自動血細胞分析儀及原裝配套試劑,XT-4000i原裝質控。湖南省瀏陽市醫用儀具廠提供的EDTA-K2抗凝管,日本OLYMPUS CX-41顯微鏡。血小板工作液(1%草酸銨稀釋液)、瑞氏-姬姆薩染液按照《全國臨床檢驗操作規程》第3版配置后保存備用。
1.3 方法使用SysmexXT-4000i的“CBC+DIFF+ RET”模式,對患者EDTA-K2抗凝標本同時進行阻抗法(PLT-I)與光學法(PLT-O)檢測3次取均值,顯微鏡法血小板計數(PLT-M)由兩位中級職稱檢驗專業工作人員嚴格按照《全國臨床檢驗操作規程》第3版操作,用雙盲法分別計數取均值作為參考方法。同時手工涂片瑞姬氏染色鏡檢,觀察血小板與紅細胞形態。所有在標本采集后2h內檢測完畢。
阻抗法血小板計數(PLT-I)均值為17×109/L,光學法血小板計數(PLT-O)均值為44×109/L,顯微鏡法血小板計數(PLT-M)均值為48×109/L。阻抗法血小板直方圖走勢低平,幾乎呈一條直線,尾部快速上升,可信度低。血片染色后油鏡下可見多數為大或者巨大血小板,其中有的體積與紅細胞相近(如圖1、圖2所示)。由此可見阻抗法血小板計數時誤把大或者巨大血小板當作了紅細胞,從而導致血小板的真實計數降低。

圖1 大血小板(瑞姬氏染色×1000)

圖2 巨大血小板(瑞姬氏染色×1000)
SysmexXT-4000i血細胞分析儀光學法檢測血小板的優勢在于其檢測原理不同于阻抗法,通過對血小板核酸熒光染色激光散射原理,分別用前向散射光和側向散射光對血小板的內部核酸成份進行分析,利用與其他細胞熒光強度的不同從質的層面分析計數,不受細胞體積大小的影響。從而避免了阻抗法檢測血小板時出現小紅細胞、紅細胞碎片、大血小板及其他“非血小板顆粒”的干擾,彌補了阻抗法單就通過檢測顆粒的體積大小區分血小板和其他細胞的弊端。
低值血小板計數的精密度和準確度一直是檢驗醫學和臨床醫學非常重視的話題,也是評價一臺血細胞分析儀性能最重要的指標,其計數的正常與否可以直接影響到外科病人是否能實施手術進行治療,當血小板計數低于20×109/L時,病人發生出血的風險就會加大,特別是腦出血對于患者會有致命的危險,這也是臨床醫生選擇輸注血小板的醫學決定水平。當阻抗法血小板計數低于正常參考范圍下限,特別是低于20×109/L時,我們一定要提高警惕,充分考慮可能影響血小板計數的干擾因素。光學法復檢方便、快捷,并將血小板進行核酸染色,能將血小板與“非血小板顆粒”分開,很大程度上提高了對血小板識別的特異性,使其計數更加準確。由于目前光學法檢測血小板的試劑成本較高,因此常規工作中我們可以先用阻抗法檢測血小板,當發現血小板低于100×109/L、血小板直方圖出現分布異常、儀器提示血小板聚集、紅細胞碎片等出現血小板計數可疑時要進行光學法血小板計數,必要時推片染色鏡檢或者顯微鏡手工計數,以確保結果的準確性。
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R446.11+1
B
1674-1129(2014)05-0643-02
10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.071
2013-10-23;
2014-05-30)