溶血樣本對血吸蟲間接血凝試驗檢測結果的影響

高曉暉，姜唯聲，蘭煒明

(江西省寄生蟲病防治研究所，江西南昌330046)

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溶血樣本對血吸蟲間接血凝試驗檢測結果的影響

高曉暉，姜唯聲，蘭煒明

(江西省寄生蟲病防治研究所，江西南昌330046)

溶血；血吸蟲抗體；間接血凝試驗；影響

血吸蟲間接紅細胞凝集試驗(IHA)是檢測血吸蟲病人血清抗體常用的方法，廣泛用于疫區血吸蟲病人的篩查[1-3]。該方法在試驗環節中影響因素較多[4，5]。溶血為血清學試驗疑似干擾物質，在日常檢驗樣本中常見，但目前市售血吸蟲間接血凝試驗產品說明書并無相關說明，為探討溶血樣本是否對檢測結果產生影響，保證檢測結果的可靠性，本文采用血吸蟲間接血凝試劑對模擬溶血的血吸蟲病人血清進行了檢測，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 血吸蟲病病人血清來源以江西省鄱陽縣表恩村血吸蟲病患者12例為采血對象。血吸蟲病人確認以《血吸蟲病診斷標準》[5]規定的糞檢方法(Kato-Katz法和尼龍絹集卵孵化法)，以糞檢1項或2項陽性者作為血吸蟲病病人診斷標準，用真空負壓管采集每名患者靜脈血5ml，分離血清。

1.2 血吸蟲病病人溶血血清來源取1.2血吸蟲病患者靜脈血，分離后，每位患者取2ml血清，剩余血清與紅細胞置冰箱凍融2次后，用血細胞分析儀(希森美康XS－500i型)檢測每份樣本血紅蛋白含量，再用每位患者血清稀釋各自的溶血樣本，使每份血清樣本血紅蛋白含量分別為4g/L、8g/L、16g/L、32g/L。

1.3 試劑與方法日本血吸蟲抗體檢測試劑盒(IHA法)(江西環鄱科技有限公司產品，批號20121027)。試驗操作按試劑盒說明書進行，檢測所有模擬溶血血清樣本，并用無溶血血清作對照，每份樣本均作終點抗體滴度測試。

2 結果

對照血清與含血紅蛋白4g/L、8g/L血清樣本檢測結果一致，12例患者抗體凝集效價在1∶20～1∶160之間，抗體平均幾何效價為1∶47.32；當血清中血紅蛋白含量為16g/L時，有5例樣本抗體效價較血清樣本下降1個滴度，12例樣本抗體平均幾何效價為1∶35.48，而血清中血紅蛋白含量為32g/L時，所有樣本抗體效價均下降，較對照血清均下降1～2個滴度，抗體平均幾何效價為1∶22.38(表1)。

表1 溶血樣本對血吸蟲間接血凝試驗檢測結果的影響

3 討論

血吸蟲間接血凝試驗測定敏感、特異，操作簡便，是目前國內應用最廣泛的血吸蟲病血清學檢測方法。溶血樣本檢測結果表明，當樣本血紅蛋白含量大于或等于16g/L，血吸蟲抗體凝集效價隨血紅蛋白含量升高而下降，而樣本血紅蛋白含量小于16g/L時，檢測結果與對照血清一致。陳健康等采用血吸蟲病病兔溶血血清進行血吸蟲間接血凝試驗，血清血紅蛋白濃度在10～80g/L范圍內，抗體滴度隨血紅蛋白含量增加而下降，呈負相關[7]。本試驗結果與上述結論基本一致，但所檢測的血清類型不同。

溶血是由于各種原因造成紅細胞破壞，紅細胞內液游離入血清，對間接血凝試驗的影響可能是溶血時細胞內液對血清的稀釋作用。試驗結果顯示，溶血血清樣本血紅蛋白含量大于等于16g/L時，對實驗結果有影響，因此，樣本抗體滴度在陽性臨界值時，出現大于等于16g/L血紅蛋白含量的溶血，可能會檢出陰性結果。由于臨床并無嚴格的溶血程度劃分標準[8-11]，血清中血紅蛋白含量為16g/L時，已是肉眼清晰可見，臨床溶血樣本溶血程度血紅蛋白含量大多在16g/L以下，因此血清中含少量血紅蛋白的溶血樣本不影響血吸蟲間接血凝試驗的檢測結果。

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R446.62，R383.2+4

B

1674-1129(2014)06-0798-02

2014-08-15；

2014-10-10)

DOI∶10.3969/j.issn.1674-1129.2014.06.063