酪蛋白糖巨肽對二甲肼干預的大鼠細胞因子網絡變化的研究

陳慶森，王金鳳，閻亞麗，龐廣昌

（1.天津市食品生物技術重點實驗室，天津商業大學生物技術與食品科學學院，天津 300134；2.北京時合生物科技有限公司，北京 100176）

酪蛋白糖巨肽對二甲肼干預的大鼠細胞因子網絡變化的研究

陳慶森1，王金鳳2，閻亞麗1，龐廣昌1

（1.天津市食品生物技術重點實驗室，天津商業大學生物技術與食品科學學院，天津 300134；2.北京時合生物科技有限公司，北京 100176）

目的：探討不同劑量酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide，CGMP）干預二甲肼處理的大鼠時，外周血和結腸組織內細胞因子水平的變化情況，從而推斷CGMP對二甲肼處理的大鼠細胞因子網絡的影響。方法：60只Wistar雄性大鼠隨機分為正常組、模型組、CGMP低劑量組、CGMP中劑量組和CGMP高劑量組。除正常組外，對每只大鼠每周腹腔注射二甲肼，劑量為30 mg/（kg?周），同時，3 個劑量CGMP組注射二甲肼的同時每天灌胃CGMP，劑量分別為10、50、100 mg/（kg?d）。15周后，處死大鼠，取其結腸組織和血清，首先檢測結腸末端異型隱窩 灶個數，然后利用液相芯片法檢測結腸組織和血清中的細胞因子的表達水平。結果：乳源CGMP對大鼠體質量影響沒有顯著性差異，乳源CGMP對大鼠內毒素和活性氧簇的水平具有顯著的抑制作用，其抑制作用呈劑量依賴趨勢。乳源CGMP可顯著 抑制異型隱窩灶的形成，且異型隱窩灶個數呈劑量依賴性降低。乳源CGMP可以顯著抑制大鼠體內Th1/Th2類細胞因子的失衡，且呈劑量依賴趨勢。結論：乳源CGMP具有改善二甲肼處理的大鼠結腸組織損傷的功能，其機制為乳源CGMP可以有效抑制二甲肼處理的大鼠體內異型隱窩灶的形成，并呈劑量依賴性，研究顯示乳源CGMP可以下調大鼠體內IL-4等Th2類細胞因子的異常升高，促進IL-2等Th1類細胞因子的分泌，改善大鼠體內處于失衡狀態的細胞因子網絡。

乳源酪蛋白糖巨肽；細胞因子網絡；異型隱窩灶

乳源酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide，CGMP）是Delfour等[1]于1965年發現的一種含有唾液酸的糖肽，是牛乳中κ-酪蛋白經凝乳酶水解后產生的多肽片段。乳源CGMP是κ-酪蛋白第106位氨基酸（Met）至169位（Val）共64 個殘基構成的高度糖基化、并且有磷酸化修飾的多肽。它具有多種生物學活性，如抑制細菌和病毒的附著、抑制胃腸道分泌物、結合霍亂毒素和大腸桿菌毒素[2]、促進雙歧桿菌增殖[3]、抑制流感病毒紅細胞凝集素[4]等。

結直腸癌（colorectal cancer，CRC）是世界上第三大腫瘤，在美國，其癌癥相關死亡率在惡性腫瘤中位居第3位。在我國，近幾年的CRC在惡性腫瘤發病和死亡構成中分別占10.56%和7.80%，居第3位和第5位。CRC的發生在臨床上是一個漫長的過程，其發生發展和轉移是一個多因素參與多階段發展的復雜過程，是多種因素長期作用的結果，其發病原因尚未完全清楚，主要包括遺傳因素和環境因素兩大類。研究[5]發現結直腸癌的發病與免疫、炎癥的關系密切，但機制不明。

細胞因子是免疫細胞產生的一大類能在細胞間傳遞信息、具有免疫調節和效應功能的蛋白質或小分子多肽。T細胞主要分泌IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、TGF-β及血管內皮長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）等[6-8]，具有促進T細胞分化、成熟和增殖，激活細胞毒性T細胞、巨噬細胞，吞噬殺傷靶細胞，清除胞內病原體，介導細胞免疫應答作用，使機體識別和殺傷腫瘤抗原的能力，是機體免疫監視的主要炎性因子。

依據分泌細胞因子的不同，輔助性T淋巴細胞（Th）主要分為兩類，Th1和Th2由共同的前體細胞Th0分化而來，Th0在IL-12作用下可分化為Th1，在IL-4作用下可分化為Th2。在抗原存在的情況下，人體內IL-12、IFN-γ最初由巨噬細胞、NK細胞分泌。Th1細胞以分泌IFN-γ和IL-2為主，可以增強殺傷細胞的細胞毒性作用，激發遲發型超敏反應，主要介導細胞免疫反應；Th2細胞分泌IL-4、IL-10等，促進抗體的產生，主要介導體液免疫反應。正常機體Th1/Th2類細胞因子處于平衡狀態。機體的抗腫瘤免疫以細胞免疫為主，當Th1/Th2平衡失調，由Th1向Th2漂移時會造成免疫抑制狀態，使腫瘤細胞能夠逃逸免疫系統的攻擊而繼續生長[9]。研究發現胃腸癌患者與對照組相比，其IL-2/IL-4比值降低，表明胃腸癌患者體內細胞免疫為Th1向Th2漂移狀態[10]。

生物活性肽作為一種生物制劑，可以提高機體的特異性和非特異性免疫功能，從而達到抗腫瘤的目的。目前，作為腫瘤治療的重要輔助手段——生物免疫治療法，已經越來越受到生物研究領域的重視。而本實驗室多年研究發現，酪蛋白糖巨肽作為一種食源性短肽，對結腸炎和結腸癌都具有一定的改善作用[11]。

本研究進一步明確乳源CGMP的生物學功能，在確定最佳劑量乳源CGMP能有效改善大鼠結腸損傷情況的前提下，以結直腸癌大鼠為模型，采用液相芯片法作為技術手段，進一步探討乳源CGMP在細胞因子水平上對大鼠結腸損傷改善的情況，為乳源CGMP作為改善結直腸癌的功能性食品提供更完善的理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

雄性Wistar大鼠，體質量在80～100 g，合格證號：0017037，購自中國人民解放軍軍事醫學科學院實驗動物中心。

酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide，CGMP）新西蘭Tatua公司；二甲肼（1,2-dimethylhydrazine，DMH） 日本東京化成株式會社；Milliplex大鼠細胞因子檢測試劑盒 美國Merck Millipore公司；內毒素、活性氧簇檢測試劑盒 美國IBL-America公司；亞甲基藍美國Sigma公司。

1.2 方法

1.2.1 實驗動物分組及結直腸癌大鼠模型的建立

SPF級純種Wistar雄性大鼠60 只，質量80～100 g。在動物房適應性喂養1 周后，隨機分為5 組：正常組、模型組、CGMP低劑量組、CGMP中劑量組和CGMP高劑量組，每組12 只。所有動物在整個實驗期間均飲用純凈水，定期更換墊料以保持清潔與干燥。實驗室溫度控制在（23±2）℃，空氣相對濕度為（60±10）%，室內照明以自然采光為主，環境較安靜。

實驗第1周，除正常組外，其余各組大鼠腹腔注射DMH，劑量為30 mg/（kg?周）（注射劑量經預實驗摸索而定）。實驗第2周始，選擇邊造模邊干預的方法進行研究，即在給Wistar大鼠腹腔注射DMH的同時給予灌胃CGMP進行干預。實驗組各組大鼠腹腔注射DMH的同時，CGMP低、中、高劑量組每天灌胃相應劑量的CGMP，劑量分別為10、50、100 mg/（kg?d），正常組不作處理。實驗期間，連續灌胃至15 周，期間每周記錄大鼠體質量，根據體質量調整灌胃和注射的量，15 周后處死大鼠采集樣品。

1.2.2 樣本采集與處理

1.2.2.1 血清采集

15 周后，大鼠眼眶靜脈采血，于4 ℃、2 000 r/min冷凍離心10 min后，取上清液，置于－20 ℃冰箱凍存。

1.2.2.2 結腸組織處理

處死大鼠，解剖取結腸，置于10%中性福爾馬林固定液中進行固定。

1.2.2.3 組織提取液制備

處死大鼠，解剖取結腸，準確稱取0.1 g后，置于組織勻漿器中，加入磷酸鹽緩沖溶液（phosphate buffer solution，PBS），研磨后得到10%的勻漿組織液，于4 ℃、5 000 r/min冷凍離心20 min后，取上清液，置于－20 ℃冰箱凍存。

1.2.3 大鼠的異型隱窩灶（aberrant crypt foci，ACF）計數

處死大鼠后，分別在盲腸、結腸交界和骨盆處剪開取出全結腸，縱向剖開后漂洗去除腸內容物，將腸段盡可能平展于兩層濾紙之間，在10%中性甲醛中固定24 h；固定后的標本于0.2%亞甲基藍溶液中染色，40～60 s后轉移到玻片上，40 倍光學顯微鏡下計數ACF個數。

1.2.4 大鼠CGMP干預后的病理分析

結腸組織石蠟切片制作，參見文獻[12]。

1.2.5 氧化應激分析和內毒素分析

按試劑盒說明書測定各組血清中活性氧簇和內毒素的水平。

1.2.6 細胞因子的檢測

采用液相芯片法檢測CGMP干預后大鼠結腸組織及外周血中8 種細胞因子的變化，見表1。

表1 8 種細胞因子Table 1 List of cytokines tested in this study

96 孔板設置背景孔、標準品孔、對照孔和樣品孔，背景孔和樣品孔中加入測定緩沖液25 μL，標準品孔和對照孔中加入相應試劑25 μL，背景孔、標準品孔和對照孔中加入25 μL基質溶液，樣品孔中加入樣品25 μL。渦旋后，每孔加入25 μL混合的珠子，室溫下振蕩孵育2 h。清洗后，加入25 μL檢測抗體，室溫下振蕩孵育1 h。每孔加入25 μL鏈霉親和素-藻紅蛋白。室溫下振蕩孵育30 min，清洗后加入125 μL鞘液，振蕩30 min后讀板。

1.3 統計學分析

使用SPSS17.0統計軟件對實驗數據進行分析處理，進行單因素方差分析，處理結果以±s表示，定義P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果與分析

2.1 CGMP對大鼠一般狀態及體質量變化的影響

表2 CGMP對大鼠體質量變化的影響Table 2 Effect of CGMP on body weight change in rats %

由表2可知，各組大鼠體質量均有增長趨勢，經SPSS方差分析，每周實驗大鼠體質量組與組之間的差異不顯著（P＞0.05），即正常組與模型組體質量之間沒有顯著性差異，各劑量組與正常組及模型組相比體質量之間也不具有顯著性意義。即CGMP對大鼠體質量影響沒有顯著性差異。

2.2 CGMP對大鼠結腸組織形態的影響

圖1 各組大鼠結腸病理組織切片（HE，×40）Fig.1 Histological images of colon samples of rats from 5 groups (HE staining, ×40)

各組大鼠結腸組織石蠟切片經40倍顯微鏡放大后的形態如圖1所示。正常組大鼠結直腸黏膜光滑，細胞無水腫現象出現，腺體規則，未發生病變。而模型組大鼠結直腸黏膜出現局灶性增厚，未發現惡性腫瘤，細胞核增大，出現水腫現象，炎性細胞增生明顯，腺管擴張，杯狀細胞增多，上皮細胞層增厚，腺窩之間間隙增寬以及不規則的腺管結構。而3 個劑量CGMP組均有不同程度的改善，且低劑量組改善情況最好。

2.3 CGMP對大鼠內毒素、活性氧簇水平的影響

內毒素和活性氧簇的活力可以準確反應結腸的氧化損傷程度，本研究中CGMP對大鼠內毒素和活性氧簇活力的影響見圖2、3。

圖2 CGMP對大鼠內毒素水平的影響Fig.2 Effect of CGMP on endotoxin levels of rats

圖3 CGMP對大鼠活性氧簇水平的影響Fig.3 Effect of CGMP on reactive oxygen species levels of rats

由圖2、3可知，與正常組相比，模型組的內毒素和活性氧簇水平均有顯著性升高，具有極顯著性差異（P＜0.01），而3 個劑量CGMP組的內毒素和活性氧簇水平差異不顯著。與模型組相比，3 個CGMP劑量組的內毒素和活性氧簇水平均有顯著性降低，具有極顯著性差異（P＜0.01），而CGMP高劑量組的內毒素和活性氧簇水平降低效果最佳。即CGMP可以在一定程度上改善結腸的氧化損傷程度，且CGMP中劑量改善效果最佳。

2.4 CGMP對各組大鼠ACF的影響

確認結腸樣品ACF主要依據為：腺管染色加深，面積擴大；管腔口呈鋸齒狀、裂隙狀等多種形狀；上皮層增厚；腺管極性消失，細胞核大多表現為不典型增生征象[13-15]。通過制作病理切片計數異型隱窩灶，探討CGMP對二甲肼處理的大鼠異型隱窩灶的影響，各組大鼠異型隱窩灶形狀見圖4。

圖4 各組大鼠異型隱窩灶Fig.4 Aberrant crypt foci (ACF) of each group of rats

異型隱窩灶區別于正常腺窩的特征是腸腺和腸腺周圍帶大、染色加深和具有裂紋開口等。實驗結束后處死大鼠，取結腸組織，分析各組大鼠異型隱窩灶數目，結果如圖4所示，正常組大鼠結腸組織未見ACF的出現，模型組和各劑量CGMP組大鼠結腸組織均有ACF出現。分析ACF數目，結果如圖5所示。

圖5 各組大鼠異形隱窩灶個數變化Fig.5 Changes in ACF number in each group of rats

由圖5可知，正常組沒有異型隱窩灶的形成，與正常組相比，模型組的異形隱窩灶的個數極顯著高于正常組（P＜0.01），各劑量組均發現了二甲肼誘導的異型隱窩灶的形成，與正常組相比，各劑量組異型隱窩灶個數具有顯著性差異，與模型組相比，灌胃CGMP顯著抑制了異型隱窩灶的形成（P＜0.05），即CGMP能在一定程度抑制二甲肼處理的大鼠異型隱窩灶的形成。

2.5 CGMP對各組大鼠細胞因子網絡的影響

2.5.1 血清中細胞因子的變化

表3 血清中細胞因子的變化Table 3 Changes in serum cytokines levels pg/mL

由表3可知，與正常組相比，模型組大鼠血清中IL-2等Th1類細胞因子水平均明顯降低，IL-4等Th2類細胞因子水平明顯升高，即可以認為在DMH處理的大鼠體內細胞免疫存在Th1向Th2漂移。而與模型組相比，3 個劑量的CGMP組大鼠血清中Th1類細胞因子水平升高，Th2類細胞因子水平降低，即CGMP可以在一定程度上對二甲肼處理后的大鼠的Th1/Th2類細胞因子的失衡有改善作用，且以高劑量CGMP效果最佳。

2.5.2 結腸組織中細胞因子的變化

表4 結腸組織中細胞因子的變化Table 4 Changes in colonic cytokines levels pg/mL

由表4可知，與正常組相比，模型組大鼠結腸組織中IL-2等Th1類細胞因子水平均明顯降低，IL-4等Th2類細胞因子水平明顯升高，即可以認為在DMH處理的大鼠體內細胞免疫存在Th1向Th2漂移。而與模型組相比，3 個劑量的CGMP組大鼠結腸組織中Th1類細胞因子水平升高，Th2類細胞因子水平降低，即CGMP可以在一定程度上對二甲肼處理后的大鼠的Th1/Th2類細胞因子的失衡有改善作用，且以高劑量CGMP效果最佳。

3 討 論

結直腸癌腫瘤動物模型包括誘發性模型、移植性模型及轉基因模型[16-18]。誘發性模型操作簡單，重復性好，短時間內可以大量復制，基本模擬了癌變過程，實驗中應用較廣，目前建立結直腸癌誘發模型最常用DMH和及其代謝產物氧化偶氮甲烷[19]。本實驗選擇邊造模邊干預的方法進行研究，即在給Wistar大鼠腹腔注射DMH的同時給予灌胃CGMP進行干預。雖然結腸組織未見實體腫瘤出現，但ACF的出現可證明出現了癌前病變，因此認為模型建造成功。

細菌內毒素是革蘭氏陰性菌細胞壁上的一種脂多糖和蛋白的復合物，在正常機體內，腸黏膜可以有效防止微生物及毒素的侵入。當機體受到嚴重創傷、燒傷、感染、放化療和接受長期傳統的腸外營養時，腸黏膜會發生通透性升高，導致細菌和內毒素易位，引起內毒素血癥。快速檢測血液、臟器內毒素含量可以為臨床相關疾病的診斷預后提供參考。于耕紅等[20]的研究證明內毒素與潰瘍性結腸炎的病情嚴重程度相關，其水平隨病情加重而上升，可以作為活動期的監測指標。羅錦花等[21]研究發現嚴重燙傷破壞了腸道黏膜屏障功能，引起細菌、內毒素移位，應用中藥膳食干預，能有效預防腸源性感染。本研究結果表明，灌胃CGMP可以顯著抑制二甲肼處理的大鼠內毒素水平，其機制為CGMP作為一種食源性短肽，具有促進雙歧桿菌增殖的生物學活性，可改善二甲肼處理的大鼠腸道菌群失調的狀態。因此，對結直腸癌的發生發展具有緩解作用。

活性氧簇是一類含氧的、具有化學活性物質的總稱。主要包括超氧陰離子、過氧化氫、氫氧自由基等，它們廣泛存在于機體內并參與調節機體許多生理病理過程[22]。正常情況下，活性氧簇在代謝過程中產生（例如細胞呼吸鏈中），并保持平衡。它參與人體許多生理過程，是細胞主要的信號分子。大量研究顯示低水平活性氧簇在干細胞特性維持中起重要作用[23]。檢測細胞活性氧簇的含量，可以了解活性氧簇在細胞一些生理和病理狀態中的變化，分析藥物效應和相關機制。游宇等[24]研究發現，在炎癥性腸病小鼠體內，活性氧簇水平顯著升高，參苓白術散通過抑制氧化應激及隨后觸發的炎癥反應而起到抗炎癥性腸病的作用。本研究結果表明，灌胃CGMP可以顯著抑制DMH處理的大鼠活性氧簇水平，其機制可能與CGMP可以改善大鼠結腸黏膜水腫有關。因此，CGMP可以有效改善大鼠結腸黏膜損傷，緩解結直腸癌的發生和發展。

大鼠經DMH干預后其結腸內內毒素和活性氧簇的指標與結腸組織和血清中細胞因子存在病理狀態，即炎癥狀態。而炎癥狀態是結直腸癌發生發展的一個階段。

CRC的發生發展是一個復雜的病理學程，涉及多步驟多階段的變化，從正常隱窩到異型隱窩灶，在分裂成腺瘤，腺瘤進一步擴大最后發展成為結直腸癌[25-26]。飲食因素在CRC的發生過程中的作用近年來被高度關注，攝食高動物蛋白以及脂肪與結直腸癌的發生呈明顯的正相關，而大量攝食蔬菜和水果則明顯的抑制結直腸癌的發生發展，而近年來國內外生物活性肽的研究日愈活躍，越來越多的生物活性肽被發現分離，這些肽類不僅能夠用來作為氨基酸供體，而且被證明具有廣泛的生理功能，例如，抗血栓肽類，抗腫瘤多肽，免疫調節肽等[27]。

ACF是由Bird等[28]在1987年觀察鼠大腸癌模型時首次發現和提出的。ACF不同于正常腺管之處在于：腺管擴大，上皮層增厚，腺管之間間距增大以及不規則的管腔和輕微的隆起。它的這些特征可以通過組織切片和美藍染色后電子顯微鏡下觀察而加以辨別[29]。研究發現，無論是在致癌物誘導的嚙齒類動物還是人類大腸癌變過程中，ACF均是大腸癌變的一種癌前損傷，作為鏡下可見的最早的大腸癌前病變，人們把ACF作為結直腸癌的早期診斷觀察指標之一并用它來評價化合物和食品的抗癌和致癌作用以及相應的作用機制等[30-38]。作為鏡下可見的最早的大腸癌前病變，人們把ACF作為結直腸癌的早期診斷觀察指標之一并用它來評價化合物和食品的抗癌和致癌作用以及相應的作用機制等[39-41]。為了探討CGMP對結腸癌形成的作用及作用機理，本研究通過對DMH處理的大鼠灌胃CGMP，觀察其對ACF形成的影響。結果顯示，未經DMH處理的正常大鼠未沒有出現ACF，而經DMH處理的大鼠均發現有ACF的形成，但灌胃了CGMP的大鼠其ACF的個數顯著低于模型組，且隨著CGMP的劑量的升高，ACF的數目減少，說明CGMP對ACF具有一定的抑制作用。

機體Th1/Th2平衡狀態失調后，與腫瘤免疫逃逸，細菌、病毒等微生物感染有一定關系，并參與變態反應性疾病、自身免疫性疾病和移植排斥反應的發生[42]。較多的證據表明，Th1/Th2極化是免疫應答調節中的關鍵環節，Th1/Th2極化異常或缺陷與許多疾病有關，因而Th1/Th2極化已成為研究的新熱點[43]。高赟等[10]研究發現在胃腸癌患者與對照組相比IL-2/IL-4比值降低，證實在胃腸癌患者體內細胞免疫為Th1向Th2漂移狀態。陳貴平等[9]研究發現，大腸癌患者PBMC中Th1型細胞因子IL-2表達明顯低于正常組，Th2型細胞因子IL-4和IL-10表達率明顯高于正常組；外周血血清細胞因子蛋白水平檢測，發現大腸癌患者血清中IL-2，明顯低于正常組，IL-10明顯高于正常組，與國內外許多研究結果相同[44-46]。本研究通過對DMH處理的大鼠灌胃乳源CGMP，采用液相芯片技術分析DMH處理的大鼠血清和結腸組織提取液中8 種細胞因子的水平，分析結果發現在DMH處理的大鼠體內細胞免疫存在Th1向Th2的漂移，乳源CGMP對這種狀態有一定的改善作用，且呈劑量依賴性。由此可以推斷，CRC的發生和發展與Th1/Th2的失衡是密切相關的，而乳源CGMP可以使大鼠機體內細胞免疫由Th2向Th1逆轉，為CRC的免疫治療提供了一定的理論依據。

4 結 論

乳源CGMP具有改善大鼠結腸組織損傷的功能，其機制為乳源CGMP 可以在一定程度上改善結腸的氧化損傷程度，且中劑量CGMP改善效果最佳。可以有效地抑制DMH處理的大鼠體內異型隱窩灶的形成，并呈劑量依賴性，而且CGMP可以下調大鼠體內IL-4等Th2類細胞因子的異常升高，促進IL-2等Th1類細胞因子的分泌，改善大鼠體內處于失衡狀態的細胞因子網絡，從而改善結直腸癌發生發展。對于CGMP對大鼠結腸組織形態的影響，低劑量效果好，而在其他結果中又有劑量依賴性，這可能是因為量效關系。

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Effects of Casein Glycomacropeptide on Dimethyl Hydrazine-Induced Alteration of Cytokine Network in Rats

CHEN Qing-sen1, WANG Jin-feng2, YAN Ya-li1, PANG Guang-chang1
(1. Tianjin Key Laboratory of Food Biotechnology, College of Biotechnology and Food Science, Tianjin University of Commerce, Tianjin 300134, China; 2. Beijing Shihe Biological Technology Co. Ltd., Beijing 100176, China)

Purpose: In order to infer the infl uence of casein glycomacropeptide (CGMP) on the cytokine network in rats treated with dimethyl hydrazine, we studied the changes in cytokines in peripheral blood and colon of rats challenged with intraperitoneal injection of dimethyl hydrazine, followed by intragastric administration of different doses of CGMP. Methods: A total of 60 Wistar rats were randomly divided into fi ve groups: normal, model, low dose CGMP, moderate dose CGMP and high dose CGMP groups. The rats from all other groups except for the normal group were injected weekly with dimethyl hydrazine at 30 mg/kg bw. At the same time, the rats in the low-, moderate- and high dose-CGMP groups were orally ad ministered daily w ith CGMP at 10, 50 and 100 mg/(kg·d), respectively. Fifteen weeks later, the rats were killed and colon and serum samples were taken. The number of colon aberrant crypt foci was counted, and the levels of cytokines in colon and peripheral blood were detected by using the Luminex assay. Results: 1) no signifi cant difference in body weight in rats among CGMP-treated and control groups was seen whereas CGMP signifi cantly reduced the levels of endotoxin and reactive oxygen species in a dose-dependent manner; 2) CGMP signifi cantly inhibited the formation of aberrant crypt foci (ACF) in a dose-dependent manner; 3) CGMP signifi cantly inhibited imbalance of Th1/Th2 cytokines in rats treated with dimethyl hydrazine in a dose-dependent manner. Conclusions: CGMP could improve colon damage in rats treated with dimethyl hydrazine by effectively inhibiting the formation of ACF in a dose-dependent manner, downregulating the levels of Th2 cytokines such as IL-4, and promoting the secretion of Th1 cytokines such as IL-2 to improve the imbalance of the cytokine network.

casein glycomacropeptide (CGMP); cytokine network; aberrant crypt foci(ACF)

TS252.1

A

1002-6630（2014）13-0192-07

10.7506/spkx1002-6630-201413037

2014-03-24

國家自然科學基金面上項目（30771524；31071522）

陳慶森（1957—），男，教授，碩士，研究方向為發酵生物技術、功能成分與腸道健康的關系。E-mail：chqsen@tjcu.edu.cn