高效液相色譜法分析測定復硝酚鈉中三種組分

趙颯(西北化工研究院 陜西西安 7 10 0 6 1)

高效液相色譜法分析測定復硝酚鈉中三種組分

趙颯(西北化工研究院 陜西西安 7 10 0 6 1)

目的本文介紹了高效液相色譜法同時測定植物生長激素復硝酚鈉的3種組分，5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉和鄰硝基苯酚鈉含量的方法。方法以C18色譜柱(250mm×4.6mm，5μ m)為分離柱，以甲醇+水=60+40(V/V)做流動相，在254nm波長處測定。結(jié)果復硝酚鈉樣品中有效成分能達到有效分離；三種組分的線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9929、0.9921、0.9931。對方法精密度進行試驗；測得其相對標準偏差分別為0.47%、0.49%和0.35%。

復硝酚鈉；高效液相色譜；含量

復硝酚鈉是由鄰硝基苯酚鈉、對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉及其他助劑按一定比例混合加工而成，是一種強力細胞賦活劑，能迅速滲透到植物體內(nèi)，提高細胞活力，屬于廣譜型植物生長調(diào)節(jié)劑，具有促進植物生長、生根、發(fā)芽，保花坐果，提高產(chǎn)量等作用。目前有關(guān)復硝酚鈉相關(guān)檢測的報道還比較少[1]。本文采用高效液相色譜法同時對復硝酚鈉樣品中三種組分進行分析測定，簡單易行，同柱同條件分析，降低了分析成本和分析時間。

一、實驗部分

1.儀器與試劑

W a t e r s 2 6 9 5液相色譜儀，2 9 9 8二極管陣列檢測器，Emp o we r數(shù)據(jù)處理軟件。5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉（棗紅色片狀晶體），對硝基苯酚鈉（黃色片狀晶體），鄰硝基苯酚鈉（紅色針狀晶體）標準品，(9 9.0%，均由國藥集團化學試劑有限公司提供)；復硝酚鈉樣品(山東梁山鼎圣生物工程有限公司提供)；甲醇(色譜純)；超純水(自制)；磷酸(分析純，天津科密歐化學試劑有限公司)。

2.色譜條件

Sy mme t r y R C18色譜柱（2 50 mm×4.6 mm，5μ m）；2 9 9 8二極管陣列檢測器，檢測波長為2 54n m，柱溫2 5℃，進樣量為10 μ L，流動相為甲醇+水=6 0+40(V/V)溶液，流速0.8 mL.mi n-1。

3.試驗方法

圖1復硝酚鈉色譜圖

（1）標準溶液配制 分別稱取5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉標品各0.2 0 g(均準確至0.0 0 0 2g)于3個10 0 mL容量瓶中，用水溶解并定容。準確移取上述溶液2mL于10 mL容量瓶中，逐滴滴加磷酸溶液至溶液由橙紅色變?yōu)闇\黃色(p H值約為4.5)，用流動相定容，用0.45μ m微孔濾膜過濾，備用。

（2）試樣溶液的配制 稱取復硝酚鈉樣品0.6 0 g于10 0 mL容量瓶中，加水超聲溶解并稀釋至刻度。準確移取上述溶液2 mL于10 mL容量瓶中，逐滴滴加磷酸溶液至溶液由橙紅色變?yōu)闇\黃色(p H值約為4.5)，用流動相定容，用0.45μ m微孔濾膜過濾，外標法定量。標樣色譜圖如圖1。

4.計算

將測得的兩針試樣溶液和兩針標樣溶液（峰面積變化小于0.5%）中的5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉的峰面積分別進行平均，用外標法分別計算欲測組分質(zhì)量分數(shù)X,%，按下式計算：

式中:A標—標樣溶液中,鄰硝基苯酚鈉(對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉)峰面積;

A樣—試樣溶液中,鄰硝基苯酚鈉(對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉)峰面積平均值)峰面積值;

m標—鄰硝基苯酚鈉(對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉)標樣的質(zhì)量,g;

m樣—試樣的質(zhì)量,g;

P—標樣中鄰硝基苯酚鈉(對硝基苯酚鈉、5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉)的質(zhì)量分數(shù),%(m/m)。

二、結(jié)果與討論

1.檢測波長選擇

對三種組分標準溶液(0.4mg.mL-1)采用二級管陣列檢測器進行全波長(19 0～47 0 n m)掃描，發(fā)現(xiàn)波長2 54n m處均有較強的吸收，因此選擇2 54n m作為測定波長。

2.線性相關(guān)性測定

分別配制5個不同濃度的5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉標準品溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg.mL-1，按實驗操作條件分別測定，以樣品濃度為橫坐標，以峰面積為縱坐標，得工作曲線。結(jié)果表明樣品峰面積與濃度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，其線性相關(guān)系數(shù)分別為0.9 9 2 9、0.9 9 2 1、0.9 9 3 1。

3.方法精密度

在相同的色譜條件下，對0.4mg.mL-1的5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉混合標準溶液進行5次平行測定,測得其相對標準偏差分別為0.47%、0.49%和0.3 5%。

取同一樣品溶液分別于1天內(nèi)每隔1小時測一次，5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉的日內(nèi)相對偏差(n=5)分別為0.3 8%、0.50%、0.49%。

結(jié)論

試驗結(jié)果表明，采用本方法分析復硝酚鈉樣品，其中5-硝基愈創(chuàng)木酚鈉、對硝基苯酚鈉、鄰硝基苯酚鈉的百分含量分別為10.9 3%，3 5.8 9%，3 0.0 6%。復硝酚鈉樣品中有效成分能達到有效、穩(wěn)定分離，節(jié)省分析時間，可應用于工業(yè)生產(chǎn)中對產(chǎn)品質(zhì)量的控制。

[1]劉哲,史宏偉,田春祥.1.8%復硝酚鈉水劑的高效液相色譜分析[J].農(nóng)藥科學與管理，2005，26(11)：5-7.